■■■■% Mikrobiologický ústav uvádí NA STOPĚ PACHATELE rinacty: Spolupráce při pátrání aneb Klinická mikrobiologie II Opět začneme testíkem... Hi. IWIttE: WE:,: :3l*m-./«**:■ i 1 ,J" sum .mm n Které jsou cíle mikrobiologické diagnostiky? 1. odhalit patogena (+ 2. citl. na antimikr. látky) Co prokazujeme nepřímými dg. metodami? Protilátky proti mikrobovi Které bakterie nezachytí běžná kultivace? Například anaeroby, mykobakteria, spirochety, mykoplasmata, chlamydie, ale ani kapavku Který materiál je nutno dopravit nejn ' '^ Moč - do dvou hodin po odběru TOi Testík pokračuje... a konci a .&m Jak se odebírá stolice na různá vyšetření? Výtěr postačuje u bakteriologie a mykologie. Kusový vzorek nutný u virů a parazitológie. Je na kapavku nutná speciální transp. půda? Není - běžná Amiesova je zcela dostačující Proč se u vyšetření MOP posílají dvě sklíčka? Jedno se barví Gramem, druhé Giemsou Kdy se v mikrobiologii posílá jaká krev? Nesrážlivá na hemokultivaci, srážlivá k serolog Na úvod (Vánoce v laboratoři) Príbeh první a anesjeainy ■ Nicol škrábalo v krku, a tak zašla k lékaři. Lékař provedl výtěr z krku, ale byla nalezena pouze běžná flóra. Lékaři se to nezdálo, protože dle CRP i zvýšeného počtu polymorfonukleáru vše nasvědčovalo hnisavé bakteriální infekci. Když se lékař zeptal Nikol, jestli praktikuje orální sex, nejdříve se rozčílila, ale pak, červenajíc se, připustila, že ano, a dokonce před časem i s mužem, na kterého by dnes raději zapomněla. Lékař provedl nový odběr, tentokrát s poznačením, že jde o vyšetření na kapavku. A nemýlil se. •Itll Vi n ike Neisseria gonorrhoeae ■ft.. ft», vďb * " ^í^n ».»* <"? v ■»■ íl .-:*' ,;'■■■¥ " ,""-^3S" Proces vyšetřování - na všem záleží ■&..■%, ■•■. - ■■ <•»-_. i, m ■ wiiiiľ m **i -.i \ ;i .j-: '•■ , j. ?f *:■■&& 4 Rozhodnutí, jak zpracovat ■Gfe:.*s5í.v ■•■. * ■■' T"i£.ii •-: ■*■■ r* *«.řH '.■ ii--iíWiba ./.issa :«■! Je dáno standardními operačními postupy (SOP). Pro každý typ vzorku je dáno v SOP, jak má být vzorek zpracován a jaké metody na něj mají být aplikovány Ne vždy je ovšem vše dáno SOP. Zvláště ve vzácných a mimořádných případech je na rozhodnutí zkušeného laboranta či VŠ mikrobiológa, jak vzorek zpracovat V důležitých případech není naprosto chybou zatelefonovat do laboratoře a domluvit se. 5 Vlastní zpracování (1) ■&..■%, ■ - ■■■' "I ríf IT r WTBiľ in' ' ' n HIM 111111 '1 j .mm Vlastní zpracování zpravidla zajišťují laboranti, dříve se SŠ vzděláním, nyní s VOŠ nebo Be. stupněm vysoké školy Postupuje se vždy přísně aseptický, aby se omezilo riziko laboratorní kontaminace. Práce 7 v biohazard boxu je zároveň i dobrou prevencí profesionálních ™ nákaz i 5 Vlastní zpracování (2) ■HSklfc*;.-;.. ■•■. «." »-f .-M ».»* <"? v ■»■ íl .-:*' ,;'■¥ " "iHS? Jak n flórou (zejména orofaryngeální) ■&.. Kras-;, vďb * " *d:<íim ».»* <"? v ■»■ il .-:*' v.ítíl.ifflli Řada patogenů se projeví, například výraznou hemolýzou na krevním agaru Pokud se neprojeví, je často třeba běžnou flóru odclonit diskem s antibiotikem ■ Pro záchyt hemofilů se používá bacitracin - ve vyšší koncentraci než v bacitracinovém testu ■ Pro záchyt meningokoků se používá směs vankomycinu s kolistinem ~^W Záchyt p hemofily aÉaJ M KiUHU bacitracinovy disk [na hemofily] V + K disk [vanko. + kol istin] -meningokoky ^stafylokok, čára očkovaní tamponem očkovaní klíckou Kultiv s běžnou flórou V těchto místech pátráme po hemofilech ^7 MM Laboratoř klinické bakteriologie iLäŔtiant 2 %i\& fl Mikrobiológ (VS) „odečítá 'opáčka": Ui " laboratoř" - prohlíží rků Výsledky kultivací sty Laborant.1 zapisuje vyšlep ky ■ Vysvětlivky k dalším obrazovkám mm., mm. i um i ir T-Mnwimmt linľ nr' mra iiiwirri i . y* -> .* , • .,. ;■¥ " T':-T?5H Úkol 1: Diagnostické schéma (1) ■Bi..ttr*ý.v.!,Xi «."^dm ».»* <"? » ■»■ ii .-:*' v.v^a.jffiM Den 0: mikroskopie (Gramovo barvení) Den 1: výsledek primokultivace vzorku na KA, EA a NaCI. Je-li přítomna jen běžná flóra, EA se vyhodí a KA a NaCI se prodlužuje do dalšího dne. Případný patogen se určuje a testuje se jeho citlivost; je-li ho málo dělá se jeho izolace (kolonie se opatrně nabere kličkou a naočkuje se na celou misku křížovým roztěrem tak, aby se určitě získal čistý kmen Úkol 1: Diagnostické schéma (2) ■Bi..ttr*ý.v.!,Xi «."^dm ».»* <"? » ■»■ ii .-:*' v.v^a.jffiM Den 2: expedice negativních výsledků (prohlížení „prodlužek", jak říkáme u nás, či „dohřívek", jak říkají v nemocnici na Homolce). Expedice většiny pozitivních výsledků, je-li bližší určení hotovo a test citlivosti uspokojivý. Není-li, nebo je-li hotova teprve izolace, „jede se dál". Den 3: expedice většiny zbylých pozitivních výsledků (rezistentní, špatně určitelné, z izolací) Den 4: výjimečně expedice posledních výsledků Sputum - možné nálezy a.mu Běžná flóra: V DCD sice není, ale při průchodu HCD vždy dochází ke kontaminaci ústními streptokoky a neisseriemi Patogeny: pneumokoky, pyogenní streptokoky, hemofily (klasické pneumonie). Původci atypických pneumonií většinou nejsou kultivovatelní. Ko-amoxicilin pokryje původce většiny klasických pneumonií; je ovšem otázkou, zda bylo správné začít hned atb s t širokým spektrem Praktická poznámka mm., mm. i nm i ir T-Mnwimmt finľ nľ' inir¥ i nim i . y* -> .* , • .,. :i®m -.mm m Malé, našedlé, skoro bezbarvé, s viridací, to jsou ústní streptokoky. ■ Malé, nažloutlé, bez viridace, bez hemolýzy (nebo s nepatrně naznačenou hemolýzou), oxidáza pozitivní, to jsou ústní neisserie ■ Pokud na misce vidíte ještě něco jiného, a zvlášť pokud to „něco" má výraznou hemolýzu,! bude to asi kýžený patogen. >■¥ " T':-T?5H Odečítání" bakteriologie Úkol 2: Diagnostické schéma ■Bi..ttr*ý.v.!,Xi «."^dm ».»* <"? v ■»■ ii .-:*' v.v^a.jffiM Den 0: pouze nasazení kultivací Den 1: výsledek primokultivace vzorku na KA a EA. NaCI se zde nepoužívá. I v tomto případě se KA s běžnou flórou prodlužují Den 2: expedice všech negativních a většiny pozitivních výsledků Den 3: expedice téměř všech zbylých pozitivních výsledků Farynx - možne nálezy .jfcjwifefeBfeite'iiWHi n,a«Bafrai*-í <% a.mu Běžná flóra: Ústní streptokoky a neisserie; hemofily (hlavně H. parainfluenzas), za normálni se považuje i malé množství aureů, pneumokoků, meningokoků, moraxel apod. Další součásti běžné flóry (anaeroby, spirochety) se při běžné kultivaci neodhalí Patogeny: pyogenní streptokoky, arkanobakteria; často se nenajde nic a původ je virový (EB viry a jiné) mm., mm.. so o •Q co P c ä r> Úkol 3: Základní diagnostické schéma ■Bi..ttr*ý.v.!,Xi «."^dm ».»* *^ v ■„■ il .-:*' ,;