Bi1090c Systém a evoluce nižších rostlin – cvičení

                                 Část – sinice/cyanobakterie a řasy



                                            Cvičení č.3

   

   Téma:         „Barevní bičíkovci“ (Chromista)

   

   Úloha 1:      Pozorování nativních rozsivek (Bacillariophyceae) a zhotovení rozsivkových
   trvalých preparátů

   

   Materiál:     přírodní vzorky (fixované a nativní)

   Pomůcky:      mikroskop, pipeta, kapátko, preparační jehla, pinzeta, miska s vodou, zalévací
   medium Naphrax, líhový kahan

   Postup:       A) Příprava preparátů:

   1.       15 ml vzorku, přidejte 10 ml 65% HNO[3

   ]2.       Opatrně vařte na ploténce, dokud se neodpaří minimálně polovina objemu roztoku

   3.       Potom přidejte na hrotě skalpelu K[2]Cr[2]O[7

   ]4.       Celý roztok vařte pak 5 min.

   5.       Stočte na centrifuze při 1500 až 2000 otáčkách za minutu

   6.       Po každém stočení supernatant odeberte a doplňte destilovanou vodou

   7.       Body 4-5 opakujte 6x

   8.       Do posledního stočeného vzorku přidejte líh (po odebrání supernatantu)

   Takto připravený vzorek dostanete k dispozici, postupujte pak následovně:

   9.      Na krycí sklíčko přidejte kapku vzorku, nechte vysušit opatrně nad kahanem

   10.  Na podložní sklíčko dejte 2 kapky zalévacího media Naphrax

   11.  Hned potom přikryjte krycím sklíčkem (stranou, kde je vysušený vzorek rozsivek)

   12.  Nad kahanem opatrně zahřívejte preparát. Když začnou unikat bublinky, vzorek odtáhněte od
   plamene a preparační jehlou opatrně tlačte na krycí sklíčko

   B) Vlastní pozorování:

   1. Nejdřív pozorujte nativní preparát rozsivek a pak po vychlazení vlastní trvalý preparát;

   2. Pozorujte preparát při objektivovém zvětšení 10x: zjistěte jestli jsou buňky jednotlivé
   nebo vytvářející kolonie

   3. Když se v preparátu zorientujete, použijete objektivové zvětšení 40x

   4. Dílčí výsledky sumarizujte: Schematicky znázorněte mikroorganismy a popište jednotlivé
   struktury (všímejte si rozdílů mezi nativním a trvalým preparátem)

   5. Zapište Závěry pozorování a stručně charakterizujte pozorovanou skupinu mikroorganismů.