Nepřímý test Reakce: Ag + Ab + Ab[s]E Ab ¯ Ab[s] ® 1 2 3 4 5 6 1:100 1:500 1:1000 1:2000 1:5000 nic + - + - + - + - + - + - 10x^ A 50x B 100x C 150x D 200x E 250x F 300x G x1 350x H x2 x3 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Například: Ab ¯ Ab[s] ® 1 2 3 4 5 6 1:100 1:500 1:1000 1:2000 1:5000 nic + - + - + - + - + - + - 10x^ A 1,545 0,158 1,469 0,136 1,348 0,108 1,149 0,091 0,830 0,068 0,603 0,035 50x B 1,412 0,119 1,271 0,096 1,093 0,081 0,832 0,068 0,603 0,050 0,437 0,025 100x C 1,067 0,085 0,883 0,700 0,707 0,057 0,534 0,046 0,410 0,032 0,275 0,018 150x D 0,608 0,062 0,470 0,050 0,385 0,039 0,297 0,030 0,225 0,021 0,154 0,012 200x E 0,273 0,041 0,240 0,031 0,205 0,027 0,169 0,018 0,132 0,013 0,101 0,007 250x F 0,158 0,025 0,136 0,019 0,116 0,013 0,100 0,010 0,085 0,006 0,068 0,003 300x G 0,090 0,014 0,080 0,011 0,071 0,007 0,063 0,005 0,051 0,002 0,042 0,001 350x H 0,036 0,006 0,032 0,005 0,027 0,003 0,023 0,002 0,020 0,001 0,017 0,001 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1.) Naneseme na destičku Ag o známé konstantní koncentraci (1-2 μg/ml): + s Ag, - bez Ag 2.) Ředění Ab (séra) 10x, 50x, 100x, 150x, 200x, 250x, atd. do jamek A, B, C, D 3.) Ředění Ab[s]: 1:100, 1:500, 1:1000, 1:1500, 1:2000, 1:5000, bez Ab[s] 4.) Blank x : 1.) bez Ab[s], [ ]2.) s Ab (sérem), 3.) bez Ag Výsledek: pokud křivka stoupá, Ab vykazuje dostatečnou specifitu a afinitu