Molekulárne aspekty evolúcie človeka Vladimír Ferák Molekulárna Jedna z možností ako využiť súčasné výsledky molekulárnej genetiky je použiť ich pri štúdiu evolúcie Gény (resp. ich produkty - RNA a bielkoviny) - slúžia ako historické dokumenty Táto možnosť využitia sa rýchlo rozširuje v dôsledku súčasného zjednodušenia metód (celogenómového) sekvenovania a možností hromadného stanovovania polymorfizmov DNA genetika a evolúcia PATTERNS IN EVOLUTION The New Molecular View Roger Lewin Porovnávacia analýza informačných makromolekul (nukleové kyseliny, bielkoviny) kvantitatívna miera pre stanovenie evolučného vzťahu medzi súčasťami bunky, bunkami, organizmami, populáciami atď. Zuckerkandl a Pauling (1965) "Molekuly ako dokumenty evolučnej histórie" - molekulárna revolúcia v (evolučnej) biológii. Sekvencie polypeptidov ako miera evolučnej príbuznosti organizmov - molekuly odrážajú evolučnú vzdialenosť Počet odlišných aminokyselín v ß-ret'azci hemoglobínu vo vzťahu k hemoglobínu človeka (celková dĺžka reťazca je 146 aminokyselín) Druh počet odlišností človek 0 gorila 1 gibon 2 makak 8 myš 27 žaba 67 mihuľa 125 Human Dog Bird 8 32 45 J_ _L X JL J. Frog _L 67 -L Lamprey :" _L Jľ _L _L JL 125 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 Number of amino acid differences between this hemoglobin polypeptide and a human one FIGURE 21.18 Molecules reflect evolutionary divergence. You can see that the greater the evolutionary distance from humans (white cladogram), the greater the number of amino acid differences in the vertebrate hemoglobin polypeptide. Molekulárne chronometre - konkrétne nástroje, ktoré merajú čas v molekulových hodinách Amino acid s O tz ubstitutions per site, per 1 O9 years 5 V.5 1 O ____________________I__________________________________t__________________________________\ Com plemeni Fibrinopeptides Growth hormone Ig K-chain C region k: casein Ig y-chain CI region Lutropin ß-chain Ig >L-chain C region -»t C3a anaphy latoxi n La cta I b u m i n Epidermal growth -factor Somatotropi n Pancreatic ribonuclease Lipotropin ß Haptoglobin oc—chain Serum albumin Phospholipase A<~2. Rrotease inhibitor, PST1 type Prolactin Pancreatic hormone Carbonic anhydrase CZ Lutropin oc-chain Haemoglobin cx-chain Haemoglobin ß-chain Li pid-bi nd ing protein A-l Gastrin Animal lysozyme TV! yog I obi n A m y l o í d AA Nerve growth factor Acid proteases Myelin basic protein Thyrotropin ß-chain f^Sk r a thy r i n Paríža ibu mi n Protease inhibitors, BP1 type Trypsin l\/lelanotropin ß cx-crysta 11 in A-chain Endorphin Cytochrome b5 * Insu I in Calcitonin Neurophysin ~2. Plastocyani n Lactate dehyd rogenase Adenylate kiinase Triosephosphate isomerase Vasoactive intestinal peptide Corticotropin Glyceraldehyde 3-P04 dehydrogenase Cytochrome c Plant ferredoxin -rCol lagen Troponin C, skeletal muscle ot-crystallin ß-chain G lucagon Glutamate dehydrogenase H í sto n e H2B H í sto n e H2A Hístone H3 <0.01-90 Histone H4 <0.010> Ubiquitin (0.010) Mimoriadne postavenie majú nerekombinujúce molekuly DNA: mtDNA Y-chromozómová DNA I?is_ -y.4 Rates of amino acid substitution for various mammalian proteins. ^Excluding guinea pig and coypu, trie phylogenetic position of which has been, debated (see section -7.^); -j- Excluding non-repetitive ends. Data from ISTei (l^SV). „Molekulárny" pohľad na evolúciu človeka (a ľudoopov) Sarich, V., Wilson, A.: „Genomic evolution in primates" Science, 179, 1973 Porovnávali sekvencie polypeptidov; málo dát Skeptické prijatie... Skepsa prekonaná až po potvrdení z porovnania chromozómov (Yunis a Prakash, 1982) ale najmä zo sekvencií DNA (90-te roky) (a) Before Sarich and Wilson Chimpanzee Gorilla Orang-utan Human Divergence time >15 Myr ago (b) After Sarich and Wilson Chimpanzee Gorilla Divergence time — 5 Ivlyr ago To Old World monkeys ~30 Myr ago Orang-utan To Old World monkeys — 30 Ivlyr ago Porovnávacia cytogenetika ľudoopov a človeka c ■H 5 m n n R |— 'ä r* 3 H n n 3 2. mm %sm r....., j | er n d3Ô n I G H \ n 5 m e H C G O DVfl' 5 * B B B B |n n n S f"00^ )&tfäi ŕ=aas^ í n r — Jsi n n n ^ ■ ■ ■ ■ n n n n flnnn .BBSS IB R R R ■n' n n n Ľ o n n H - Šimpanz-C, gorila-G, orangutan-O: 2n=48 chrom. R sapiens: 2n=46 chrom. - Ľudský chrom.č.2 vznikol Robertsonovou translokaciou - Nezhody v niektorých C-prúžkoch + inverzie, recipročné translokácie, Robertsonova translok. Orangutan 20 Fusion ■ Pericentric inversion Paracentric inversion i!y Reciprocal M Uncharacterizôd [j{ j translocation ' \ rearrangement Čím sa odlišujeme od ľudoopov? > len veľmi málo génov človeka nemá ortológ v genóme šimpanza a gorily; vysoká sekvenčná homológia > omnoho menšia genetická variabilita u človeka než u ostatných primátov (<=■ štúdie génov a sekvencií lokalizovaných v rôznych oblastiach genómu) >ľudská populácia prešla relatívne nedávno genetickým bottleneckom, ktorým sa značná časť predtým existujúcej variability stratila >„Bottleneck" nastal nedávno (pred rádovo 105 rokmi (možno <200 000 r.) a prežilo ho len rádovo stovky až tisíce jedincov i 8.2 mil Orangutan Gorila Šimpanz Človek Dendrogram na báze veľkého množstva sekvencií DNA a odhad času od spoločného predka Nástroje štúdia evolúcie H. sapiens -mtDNA a Y-DNA • Nepodstupujú rekombináciu, polymorfizmy sú prenášané spolu a tvoria haplotyp so samostatnou históriou (majú v sebe zapísanú vlastnú genealógiu) • Dedia sa uniparentalne, poskytujú možnosť sledovať individuálne maternálne/paternálne línie - migrácie ľudských skupín • Vysoká mutačná rýchlosť - ideálna pre relatívne krátku evolúciu moderného človeka, umožňuje datovanie recentných udalostí, napr. osídľovania kontinentov a populačných migrácií • Majú oblasti pomaly mutujúce aj rýchlo mutujúce Štruktúra ľuc Oh Pi-ic etc. D-lQop ■ i i L k L ■ I- I L I £>—-. '-^ ůtC. L Phů 1BS H STRAND Qly ATPase 8 ATPase 6 mtDNA cirkulárna, 2-vláknová, 16 569 bp 1/200 000 veľkosti jadrového genómu niekoľko 100-1000 kópií na bunku Kóduiúce oblasti - 93 % 37 tesne usporiadaných génov Kontrolná oblasť - 7 % približne 1200bp hypervariabilné segmenty HVSI (CRS: np 16024-16383) a HVSII (np 57-372) Kay: --------- ------------------------------------------1 On« 0|_ origin and direction of synthesis of heavy and light 5-1 rands H> PH, P_ origin and direction of transcription of heavy and light strands IS2 rRNA genes I tRNň genes Ganůs on ceding proteins r 1 I ..; Ľudský Y-chromozóm i______i 1 Mb M X-transposed S Ampllconlc ■ Pseudoautosomal D X-degenerate M Heterocramatlc G Other • 60 Mb dlhá lineárna molekula DNA • 95% predstavuje NRY - non-recombining region of Y (zvyšných 5%: ijj-autozomálna oblasť, rekombinuje s X-chromozómom) • Heterochromatín: 6 rôznych typov sekvencii v tandemových zoskupeniach • Euchromatín: X-transponované, X-degenerované a amplikonické segmenty • 156 transkripčných jednotiek, 27 proteínových rodín (12 vo všetkých tkanivách, 11 špecifických pre testes) • Polymorfizmy: SNP (nízka mutačná rýchlosť) a STR (vysoká mutačná rýchlosť) Prenos mtDNA, Y-chromozálnej DNA a autozomálnej DNA Pred 5 generáciami mal každý jedinec 25 = 32 predkov, z nich len od jedného zdedil Y, od jedného mtDNA, ale od všetkých autozomálnu DNA mtDNA a Y-DNA: žiadna rekombinácia \z prenos „en bloc" cez generácie Dieťa Každý má práve jedného Y-predka a jedného mt predka v ktorejkoľvek predošlej generácii Koalescencia línií mtDNA a Y-DNA in M"1] o n_ ottJm ni ^ i i in n mi im i mrml irrh m u nm min ninni nnnim Možno nájsť spoločného predka pre členov akejkoľvek populácie/taxónu: koalescencia V každej generácii dôjde k zániku a naopak k zmnoženiu niektorých línií Po čase v rovnovážnej populácii prevládne mt/Y DNA odvodená od jediného spoločného predka Mutácie na mtDNA alebo Y-DNA a ich postupnosť i--------------n---------------------------------------^k~i / i------------n-----------------------------------^k~i 1________LJ________________________^K_l i--------------n---------------------------------------^k~i ,__._____v i_______■_____________________^k_j _____ _.\ 1________LJ________________________^K_l 1----------------TT----------------------------------------------^K—1 1________LJ________________________^K_l i--------------n---------------------------------------^k~i 1________LJ________________________^K_l i--------------n----------------------------------------^k~i / ^ y i------------n-----------------------------------^k—i 1________LJ______________S________^H_l i--------------n---------------------------------------^k—i 1_______■____________■_______^K_J ___ \ 1________LJ______________■________^K_l i--------------n----------------------------------------^k~i Y-DNA alebo mtDNA 1/ 1________LJ______________S________^K_l i-------------------------------------------------^k~i 1______________________________^K_l _____ \ \ ^ * ■ --------------------------------------------------------► generácie ----------------------------- ^ Haplotyp: súbor konkrétnych mutácií najednej molekule DNA Haploskupina: súbor podobných haplotypov, odvodených od spoločného predka; majú spoločnú mutáciu ypy a haploskupiny haplotyp C | haplotyp B haplotyp A \ zx zx zr haploskupina Mutácie a migrácia • Ak vieme, že haplotyp B je odvodený od A a haplotyp C od B, pričom jednotlivé haplotypy sa nachádzajú na uvedených kontinentoch, migrácia populácií prebiehala v smere, znázornenom šípkami • V praxi sa častejšie sleduje migrácia haploskupín ako migrácia haplotypov • Možné problémy: spätné mutácie; spätná migrácia Markery mtDNA DO \ S lihliĺ E T Uieiai llHlitfH HU \ k: 1FJH JL t LH1I V Wľíl \ 23 IKHI «111 IBM \ 'I-. rttn \ / . P3 ■?■ n i. y opi km P r."". rtlll / / ■:■:: li i f IP l / .. ■ miŕi i:hi s íl.".!.1-." itiJa \ 1EfH X \ \ v \ Iťlľí II". \ It .>■ \ hi »™ j \ \ T MJ4 IUIIÍ*' I \ \ i j,. íluCKfl- \ "t! ™ V" .tfUCOV \ \ m X2a IHfr Nii^ i líľ«-«- ■: I ľľ-^ iSHÍD*,^] Tla ■i-a ÍKľJ mttíto K—IOI-. uu-^Jll; -MÄ4'" >#t;^. ]l \1[* EÉ -TIL. \,< T Bot4 r;:.:- V ' Mi Min 4, / "" ~ / ■en* "is; T**** fS5 \ >.r> *.«K. X H? \ ' Hľ^b to Q ftp / ™ IHlíta 2HJ ■.MJU ■ f I41S jj" / '.■-.'■ i. -■. vil ~~ ÍIkm-^^HJ^ um .i, Jf"J ««- S? hJ. i»«. 1! ils «:£ Pfui—»W-lt=J^T2S A» mu ■ŕ* _,v / ■■■■ u* i». 1 ísaít ^T I ^Ju WH5 IGffTl _AÍJ' /■>.'.■ T/ .Ja hiuh x- X K:." 1B1T1 X" 1E3ÍS iJĽ -díl- mäS S i.-.-n: ri-r- ^llluD-|IKMJ afi|j■^íIJ^4-lBIBl-■FM^|H1^ iw-1 IWT1 J íT «™ VO. nJRh \ lArtUKM^lťi-..... \ " wii'Tff'. -igl \ rftalř »«c ^ M/b iL: i-^ \ MTW \ ini^ 1 M731 _ í:\: , .'Ej ■ i .T.!-:' -|K'' .- ""d rfL -IHHDJH- Uüi 111 Hirt- tu. JWHl Hat i y r \ ■1]ri7 'd^H _ ^i- Mi«! B.1ÉM3 j lMiBr lirti f UM jTW-W-H-AMPttii '■■■ l Hifi" J« J ■i—ffW H Tím tH w i llfc ":USb-H^-----4—'■-*■"-"-"-■'^—"" ■ HJ-ÖH>A>HY ■-!-»-»i--------isi-"bl----r'-rfe-k-i = 1 ■- ťj I Rebecca L. Cann, Mark Stoneking & Allan C. Wilson "Mitochondrial DNA and Human Evolution" Nature, 325(1987), 31-6 Allan C. Wilson & Rebecca L. Cann „The Recent African Genesis of Humans" Scientific American (April 1992), 22-27 „..all humans today can be traced along maternal lines of descent to a woman who lived about 200,000 years ago, probably in Africa. Modern humans arose in one place and spread elsewhere." súčasná variabilita mtDNA je najväčšia medzi africkými populáciami všetky ostatné mtDNA typy sú odvodené od pôvodných haploskupín nájdených v Afrike za predpokladu rovnomernej mutacnej rýchlosti došlo k rozdeleniu hlavných línií približne pred 140 000 - 200 000 r. mtDNA a „mitochondrialna Eva" é é mnrnnrh rmiin min r~^ n rm n rih np pi 111 m tili ififlttifl i i T • • T t T T f • • nlnnl nnnrrn • línie sa smerom dozadu (v čase) zbiehajú: koalescencia • to umožňuje sledovať mtDNA línie ďaleko do minulosti až k spoločnej mtDNA „pramatke" -žila pred cca 150 000 rokmi v Afrike: „mitochondrialna Eva" • len jej mtDNA sa zachovala dodnes, hoci to samozrejme nebola jediná žena, ktorá vtedy žila • štúdium mtDNA umožňuje rekonštruovať osídľovanie kontinentov Haploskupiny mtDNA EVE AFRICA: 3 MATERNAL LINEAGES Mitochondrial DNA are passed from mother to child and are not subject to the generational shuffling of genes. The mutations that do arise correlate to different continents and form lineages. Here, each continent and its daughters of Eve. (Dales of branches are approximate) Hlavné haploskupiny sú definované len niekoľkými mutáciami v kódujúcej oblasti mtDNA a ich výskyt vykazuje kontinentálnu špecifickosť: • 3 v Afrike (L1, L2, L3); všetky haploskupiny mimo Afriky sú vlastne podskupinami L3 • 7 v Ázii a Oceánii odvodené z ancestrálnej línie M: A, B, C, D, E, F, G • 9 v Európe, 7 hlavných, tzv. Eviných dcér: H, J, K, T, U, V, X • 4 v Amerike: A, B, C, D - relatívne recentné osídlenie z Ázie Rozšírenie hlavných línií mtDNA Afnca 120.OQ0-15Q.0QO Out of Africa S5i.000- 75,000 Asia 4C.0QD- 70 .ODO Australia i'PNG 40,000- 60.000 Europe 33,000- 50.000 Americas 15.000- 35.000 N a-De h e/E s It/Aleuts fl.OGQ- 10.000 „Mitochondriálna Eva" a jej „sedem dcér" v Európe BRYAN SYKES Sedm dcer Evi ných ■ j ■■ ■ ■ j______ i^l Helena 20 000 r. 47% Jasmína 10 000 r. 20% Katarína 15 000 r. 6% Tara 17 000 r. 9% Ursula 45 000 r. 11% Velda 17 000 r. 5% Xénia 25 000 r. 2 % V Európe je 7 hlavných haploskupin mtDNA: H, J, K, T, U, V, X - sedem „Eviných dcér" Príslušnosť ku „klanu" možno určiť testom DNA „Sedem dcér Eviných" na Slovensku Tracing the maternal genetic roots of Slovaks - a phylogeographic analysis of mitochondrial DNA variability in Slovak population Zuzana Koledová HV2H N1aO preHV2 6 N1b ~.......\ U5 I j3 uj * - u • UlA ^ U4' U2 w o Wi L3 o'................. D • c • M5 [hs % vek (r.) | H 42% 21 000 J 8% 10 000 K 5% 20 200 T 9% 44 500 U 26% 57 000 V 3% ? | X 1% 25 000 | Záver: ako inde v Európe Markery (DNA polmorfizmy) na chromozóme Y Bialelické markery (binárne) • SNP, indley: nastali sa v evolúcii len raz - definujú jednotlivé haploskupiny • Nízka mutačná rýchlosť (10_8/báza/generácia) • Ancestrálne/odvodené stádium Multialelické markery • Mikrosatelity (STR polymorfizmy) a minisatelity (VNTR polymorfizmy) • Vysoká mutačná rýchlosť (až 103/ generáciu) - definujú jednotlivé haplotypy • stanovenie diverzity, odhad veku haploskupiny - podobne ako pri mtDNA R1b2 \ 2LpDE M73 R1b1 Rlala I M[S Rlalb R1a1 o^-cM2B9T— R1b Mlfl M17 ^M64 M87s R1b3f-TM167-R1b3 \ J?X* KIDJT SRYH27 wsirqpe Soít -A F25 SRY1532 R1 R2 | %V" M173 Q1 R1a1c Ml 24 —ST 1 02 X P31 03 / M122 Ol—M119—O N1 M175 / M120 * M25—-Q2 Q-^M143 M207 T/ XM3 {■ cM242 X. r Q 3 80%. Amerind I 92R7 c ■,^3 ',r- N2. N3a T.Mi7a: P43r 2bp De M128 =N' AM231' Mv «ft- K2 M4 M5 & M106 I JW7D I N11N22 L J1 G1a H1V M 9 J2a / M47 J2e G .T-"* / ^M12 P 2 [i 'M82^ G2a. G2b" C3c^ "P16. aM286g H*^-M52 M69^C*' M285„ TM201G^r ' pG2—pis^G"*"" 'G1.c I n12f2 M 287 G3 \TrAf~~C3—M217—Q-----JRpBř1 urflB1 ^ M105 C2 ""i CÍ M267 >T ___, I O;___ (J C-T-M1Í2G J ^-----A- M 6 7 .t. Ma M253 -J2f I M253 ^11 3-TP37 c—11 b-=M26 H 1 b2 M223T B1—M146—D___iQ^M60*-----Ť E1-M33 M132-E M182 l „ / O E- TM4t> M 9 6 SRY8299 (4064) ^M174- I1c ^D1 delM15 S -D M 57 M64^ D2 B2a-M150'B2 M112 SRY1532 P N 2 C -T / B2b A1—mS? M& A2 S I A3 E3b1 M78 Y (root) \ x E3—M35—E3b—M31—E3b2 / \ M123 \ E3b3 Udus K. April 2004 Šírenie hlavných línií chromozómu Y z Afriky ? Y-DNA Adam - žil pred -100 000 rokmi v Afrike Šírenie Y-línií z Afriky podobné šíreniu mt-línií ^ * "VI242" To.38% **> N2 2bp del MÍ 28 5bp del M175 IM231 M4M5M106 92R7 CJ/I214-T- K2 H TM^7 G1H N3 TX O "»" ■M70C 0.38% M20., q M9 M52 ' 0.38% ^O M267 T J3 J1 M285 3.04% pis-----y ' A 0.76% M287 G3^ «ŕ* 0.76% O'2 .* 3.8% T/0.38% ^V2^P38 '>C M89 0.76% YT-i . QyfO> YAP + D EvtM174 M91 SPY 1532 M168 M130 Cr V P37^ C c M223 c' D T i — ^ * 11c ins M60 del 0.38% M40 M9CL. Ý b1 í í '4.94% Mb 33 r 12.55% E1b1 11 E3 PN2 / C-T Y (root) VB é, -G-M35-C- Jßi.18% M78 E3b2 E3b/^M81^ E1b3 1.14% M81 M123 ta)' Hlavné Y-DNA línie v slov. populácii • Najčastejšou líniou je R1a, ktorá je aj najčastejšia v Európe spolu s R1b (65%) • Spoločný predok R1 žil pred 35 -40 tisíc rokmi • Línia I - 22 % - pôvod z oblasti Balkánu - vek 22 000 rokov • Línie J a E, ktoré sa považujú za markery neolitickej migrácie, majú početnosť cca 10% a vek ~ 10 000 r. • Podobne ako inde v Európe Rozloženie početnosti haploskupín R1a a R1b R1a R1b Neolitické osídlenie Európy 1>I KSJA Zátoka Perská Mont Sródzicmnc SYRIA PALESTYNA n w Približne pred 12 000 rokmi z oblasti Blízkeho Východu - v Európe nastalo vytláčanie lovecko zberačských spoločenstiev roľníckymi - neolit. Šírenie ľudí lebo kultúry? väčšina mt a Y haploskupín v Európe je datovaná na dobu pred 35 000 - 50 000 r., „mladšie" haploskupiny majú len < 20 %-ný podiel v mtDNA a Y-DNA európskej populácie - to sú haploskupiny neolitického (a neskoršieho) pôvodu neolitická migračná vlna predstavuje teda prevažne šírenie kultúry a spôsobu života (obrábanie pôdy, domestifikácia rastlín a zvierat), len v menšej miere šírenie ľudí. Dve hypotézy o pôvode Homo sapiens multiregionálna .Out of Africa" (B) Extinction Extinction výsledky štúdia mtDNA a Y-DNA sú navzájom veľmi podobné (hoci nie vždy úplne identické) 1. Mutliregionálna hypotéza 2. „Out of Africa" • spoločný predok všetkých dnešných ľudí žil v Afrike približne pred 150 000 rokmi • posledný spoločný predok pre africké a neafrické mtDNA Y-DNA žil pred asi 100 000 rokmi - migrácia anatomicky moderných do Ázie a Európy pred cca 60 - 40 tis. rokmi • nahradenie populácií H. erectus moderným H. sapiens afrického pôvodu 9 H. sapiens vs. H. neaderthalensis HVR1 100 íl si BI U3 päd fll Vlndlls ľ í Mezkai akaya rr-lrhľlrr Afrtatis n Ort-Africans / AfT CSUS H Aire?n : Afr.can Afrcan 3 Afr ctia Homo neanderthalensis, v Európe žil pred približne 300 000 až 28 000 r. spoločná koexistencia s anatomicky moderným H. sapiens trvala približne 30 000 rokov mtDNA izolovaná fosílnych vzoriek neandertálcov vykazuje v D-kľučke mtDNA 3,5 - 7 % divergenciu oproti H. sapiens nízka variabilita v rámci mtDNA neandertálcov napriek rôzne lokalizovaným a datovaným vzorkám spoločný mtDNA predok H. sapiens a H. neanderthalensis žil približne pred 500 000 rokmi zrejme nedochádzalo k vzájomnému kríženiu a teda neandertálec je bočnou vývojovou vetvou, ktorá asj nezanechala stopy v našom genofonde Počkajme na sekvenovanie neandertálcovho genómu 15 Prečítajte si P m matky Evrcipanü BRYAN SYKES Sedm dcer Eviných Bryan Sykes: Sedm dcer Eviných_ Vyd. Paseka p A j i i A ^^^ a Spencer Wells: Adam a jeho rod Vyd. Argo Závery zo štúdia mtDNA a Y-DNA Relatívne recentný a monocentrický pôvod anatomicky moderných H. sapiens: platí hypotéza „Out of Africa" Osídlovanie kontinentov a trasy migrácií pomerne dobre rekonštruované; korešpondujú s archeologickými a historickými záznammi Podstatná časť (-80%) európskej populácie má paleolitický pôvod! Šírenie archeologických kultúr, resp. technológie, jazyka alebo etnicity nemusí vždy znamenať migráciu veľkých skupín jej nositeľov (príklad neolitu v Európe) Homo neanderthalensis pravdepodobne nevstúpil do vývojovej línie človeka Slovenská/česká populácia je typická (stredo)európska populácia Takže je úplne v poriadku, že o týždeň vstúpime do Schengenu! Bolo pre mňa cťou prednášať genetiku v Mendelovom meste Bolo pre mňa potešením spoznať sympatických študentov Prírodovedeckej fakulty Masarykovej univerzity, ktorým - ďakujem za pozornosť, ktorú venovali mojej prednáške; - prajem príjemné prežitie blížiacich sa sviatkov; - želám veľa úspechov pri skúškach - a v celom ďalšom profesijnom živote