2a_Chromatografie – AK+bílkoviny

   

    1. Jaké pořadí eluce uvedených aminokyselin lze očekávat při jejich IEC?

   a)      Gly, Asp, His

   b)      Arg, Glu, Ala

   c)      Phe, His, Glu

   

   

    2. V jakém pořadí  budou následující proteiny eluovány z kolony DEAE-Sephadexu stoupajícím
       gradientem soli – pI jednotlivých bílkovin je uvedeno:

   Vaječný albumin – 4,6, Cytochrom c – 10,6, Pepsin – 1,0, Myoglobin – 6,8, Serový albumin –
   4,9, Hemoglobin – 6,8.

   

   

   

    3. Aminokyseliny a mastné kyseliny se nedají běžně dělit pomocí GC i při teplotách nad 200
       ^oC. Jak byste dosáhli zlepšení?

   

   

    4. Popište užívané metody detekce při HPLC. Které typy biomolekul jsou detektogovány
       jednotlivými metodami?

   

   

    5. Vyjmenujte 3 enzymy, o nichž lze předpokládat, že se budou vázat na afinitní nosič
       5’-AMP-Sepharosu.

   

   

   

    6. Jak by se dal určit vylučovací limit pro Sephadex, když se ztratila popiska z jeho láhve?

   

   

    7. Alkoholdehydrogenasa je vázána na sloupci Cibacron Blue Sepharosy. Jak dosáhnete její
       „afinitní eluce“?