Mikroreliéfová metoda
metoda studia povrchu
neprůhledných objektů
Možnosti studia povrchu
neprůhledných objektů
* mikroskopie v dopadajícím světle
­ optická (např. mikroskop Lug Zeiss)
­ elektronová ­ SEM, kryoSEM (aquaSEM)
* izolace povrchové vrstvy
* zhotovení otisku mikroreliéfu
* konfokální mikroskopie
Lug Zeiss
Jena
mikroskop pro práci
v dopadajícím
světle
speciální konstrukce
objektivu, který
štěrbinou ve vnějším
plášti osvětluje
objekt shora
Terminologie
* Průduch, stoma (pl. stomata) epidermální struktura
tvořená dvěma svěracími buňkami, které obklopují pór,
jehož šířka je aktivně regulována.
* Svěrací buňka: buňka ledvinovitého tvaru, která mění tvar
se změnami turgoru a tak ovlivňuje šířku póru.
* Stomatální komplex: stoma plus přiléhající epidermální
buňky.
* Neighbor cell (buňka sousední): epidermální buňka v
kontaktu se svěrací buňkou.
* Subsidiary cell (buňka vedlejší): buňka sousedící se
svěrací buňkou, morphologicky odlišná od ostatních
epidermálních buněk.
Tvar a rozmístění stomat
Arabidopsis thaliana Heynh.
Transmisní elektronový mikroskop
Zhao and Sack (1999)
měřítko = 2 m
Kryo-skanovací elektronová mikroskopie
epidermis dělohy.
měřítko = 30 m
Nadeau J.A. and Sack F.D.
The Arabidopsis Book, 2002
Tvar a rozmístění průduchů
Arabidopsis thaliana Heynh.
Kryo-skanovací elektronová mikroskopie
stomata na vrcholu nektarií
stomata na abaxiální epidermis prašníku
Foto: Kim Findlay
měřítko = 30 m (nahoře)
100 m (dole)
Nadeau J.A. and Sack F.D.
The Arabidopsis Book, 2002
Tvar a rozmístění průduchů
na děloze Nicotiana tabacum L.
Hustota průduchů:
Počet průduchů na
jednotku plochy
Stomatální index:
Počet stomat
dělený celkovým
počtem
epidermálních
buněk včetně
stomat.
Foto: Dubová
Geisler et al. (2000)
Vývoj průduchů - abaxiální strana dělohy
Arabidopsis
otisk v laku na nehty
Bar = 25 m
Konfokální snímek
abaxiální epidermis listu Arabidopsis
20 m Cutler et al.
2000
GFP lokalizovaný
v plazmatické
membráně ("Q8")
Definice rozlišovací schopnosti
 
a = =
A n . sin 
 - vlnová délka světla
A ­ numerická apertura
n ­ index lomu
 ­ polovina otvorového úhlu (otvorový úhel lze
zvětšit pomocí šikmého osvětlení)
Vliv šikmého osvětlení na rozlišovací schopnost
Možnosti nastavení šikmého osvětlení
* zešikmením zrcátka (používáme plochou stranu
zrcátka)
* vložením stínícího disku s excentricky umístěným
otvorem
* vysunutí aperturní clony mimo optickou osu
* vysunutí kondenzoru mimo optickou osu
Dělení listů podle výskytu průduchů
* Epistomatické listy ­ průduchy pouze na svrchní
(adaxiální) straně listu
* Hypostomatické listy ­ průduchy pouze na spodní
(abaxiální) straně listu
* Amfistomatické listy ­ průduchy na obou
stranách listu
Typy stomatálních aparátů
dvouděložné rostliny
jednoděložné rostliny