Bi1090c Systém a evoluce nižších rostlin – cvičení Část – sinice/cyanobakterie a řasy Cvičení č.3 Téma: „Barevní bičíkovci“ (Chromista) Úloha 1: Pozorování nativních rozsivek (Bacillariophyceae) a zhotovení rozsivkových trvalých preparátů Materiál: přírodní vzorky (fixované a nativní) Pomůcky: mikroskop, pipeta, kapátko, preparační jehla, pinzeta, miska s vodou, zalévací medium Naphrax, líhový kahan Postup: A) Příprava preparátů: 1. 15 ml vzorku, přidejte 10 ml 65% HNO[3] 2. Opatrně vařte na ploténce, dokud se neodpaří minimálně polovina objemu roztoku 3. Potom přidejte na hrotě skalpelu K[2]Cr[2]O[7] 4. Celý roztok vařte pak 5 min. 5. Stočte na centrifuze při 1500 až 2000 otáčkách za minutu 6. Po každém stočení supernatant odeberte a doplňte destilovanou vodou 7. Body 4-5 opakujte 6x 8. Do posledního stočeného vzorku přidejte líh (po odebrání supernatantu) Takto připravený vzorek dostanete k dispozici, postupujte pak následovně: 9. Na krycí sklíčko přidejte kapku vzorku, nechte vysušit opatrně nad kahanem 10. Na podložní sklíčko dejte 2 kapky zalévacího media Naphrax 11. Hned potom přikryjte krycím sklíčkem (stranou, kde je vysušený vzorek rozsivek) 12. Nad kahanem opatrně zahřívejte preparát. Když začnou unikat bublinky, vzorek odtáhněte od plamene a preparační jehlou opatrně tlačte na krycí sklíčko B) Vlastní pozorování: 1. Nejdřív pozorujte nativní preparát rozsivek a pak po vychlazení vlastní trvalý preparát; 2. Pozorujte preparát při objektivovém zvětšení 10x: zjistěte jestli jsou buňky jednotlivé nebo vytvářející kolonie 3. Když se v preparátu zorientujete, použijete objektivové zvětšení 40x 4. Dílčí výsledky sumarizujte: Schematicky znázorněte mikroorganismy a popište jednotlivé struktury (všímejte si rozdílů mezi nativním a trvalým preparátem) 5. Zapište Závěry pozorování a stručně charakterizujte pozorovanou skupinu mikroorganismů.