Geny lokusů jsou umístněné na krátkém rameně 6. chromozomu HLA I.: A,B,C, geny kódují MHC I. HLAII.: DP, DQ, DR geny kódují MHC II. HLA III.: geny, které kódují proteiny účastnící se imunitní odpovědi Význam HLA typizace pro transplantace Vyšetření poskytuje podklady k výběru optimálního páru dárce-příjemce A)Transplantace ledvin B transplantace kostní dřeně (TKD) A)Transplantace ledvin je podstatná kompatibilita v lokusech HLA-A, B odlišnost v jediné antigenní specifitě HLA-DR negativně ovlivňuje přežívání štěpu Postup: 1. u všech čekatelů, tj pacientů chronického dialyzačního programu je dopředu vyšetřen HLA fenotyp, 2. ten je evidován evidován v pražském centru na tzv čekací listině. 3. v sérech čekatelů jsou každé 3 měsíce vyšetřovány Ab proti HLA antigenům (ty se objevují u nemocných často u opakovaných transfuzí, např. v důsledku těhotenství či opakované transplantace). 4. vyšetřovaná séra čekatelů jsou distribuována do regionálních laboratoří k provedení cross-match (křížová zkouška) při vlastním výběru optimálního páru V případě výskytu dárce: 1. Spádová HLA laboratoř okamžitě vyšetří HLA fenotyp dárce a sdělí jej centru. 2. Centrum zadá fenotyp dárce do počítače k provedení výběru 50 potenciálních příjemců, vyhovující výběrovým kriteriím: a)kompatibilita v ABO systému b)HLA kompatibilita c)urgentnost indikace d)doba čekání na transplantaci Jména čekatelů sdělí centrum spádové HLA laboratoři, která provede cross-match. Cílem je zjistit: 1. zda čekatelé nemají Ab proti HLA antigenům dárce 2. séra vybraných čekatelů se inkubují s lymfocyty dárce, jsou ­li Ab v séru přítomny, naváží se Ag lymfocytů dárce (pozitivní reakce) 3. pozitivní výsledek křížové reakce transplantaci kontraindikuje 4. jména pozitivních čekatelů jsou nahlášena do centra a ze seznamu vyloučena 5. konečném rozhodnutí se zohledňuje vzdálenost místa odběru k místu transplantace 6. dva definitivně vybraní jedinci jsou uvědoměni a převezeni do transplantačních center. V ČR je sou časně 6 transplantačních center provádějící transplantace ledvin sdružené v organizaci ,,český transplant", která provádí i jiné transplantace. B) Imunologické vyšetření před transplantací kostní dřeně TDK je indikována u stavů 1. s primárně nebo sekundárně porušenou funkcí kostní dřeně (u pacientů s malignitamilymfomy, akutní leukémie, některé solidní nádory). 2. Transplantace umožňuje terapii poškození hematopoetických buněk vyvolaného vysokodávkovanou chemoterapií. 3. při léčbě jiných sekundárních poruch kostní dřeně (aplastická anémie, stavy po ozáření) 4. při terapii primárních poruch kostní dřeně (při těžkých imunodeficitů) 5. u thesaurismós Séra vybraných čekatelů se inkubují s lymfocyty dárce. Jsou ­li Ab v séru přítomny, naváží se Ag lymfocytů dárce (pozitivní reakce). K vyhodnocení reakvce se používá lymfotoxický test. Pozitivní výsledek křížové reakce transplantaci kontraindikuje. Jména čekatelů jsou nahlášena do centra a ze seznamu vyloučena. V konečeném rozhodnutí se zohledňuje vzdálenost místa doběru k místu transplantace. Dva definitivně vybraní jedinci jsou uvědoměni a převezeni do transplantačních center. V ČR je sou časně 6 transplantačních center provádějící transplantace ledvin sdružené v organizaci ,,český transplant", která provádí i jiné transplantace. Imunologické vyšetření před transplantací kostní dřeně TDK je indikována u stavů 1. s primárně nebo sekundárně porušenou funkcí kostní dřeně (u pacientů s malignitamilymfomy, akutní leukémie, některé solidní nádory). 2. Transplantace umožňuje terapii poškození hematopoetických buněk vyvolaného vysokodávkovanou chemoterapií. 3. při léčbě jiných sekundárních poruch kostní dřeně (aplastická anémie, stavy po ozáření) 4. při terapii primárních poruch kostní dřeně (při těžkých imunodeficitů) 5. u thesaurismós Specifita TDK: Dárcovská dřeň obsahující mnoho imunokompetentních buněk, je transplantována pacientovi, jehož IS je vážně narušen primárním onemocněním (hematologické malignity, imunodeficity aj). Vždy dárcovské T lymfocyty pronikají do příjemcova organismu, který není schopen je eliminovat a vyvíjí se reakce štěpu proti hostitelu (GvHD) se závažnými důsledky. Zasažení dárcova organismu je tím vyšší, čím více se buňky dárce a příjemce liší ve své HLA výbavě. Z toho důvodu se snažíme o co nejvyšší stupeň kompatibility, tj shodu ve všech HLA I. A II. třídy. (ideální mezi jednovaječnými dvojčaty nebo HLA identickými sourozenci). Hledání dárce se soustřeďuje na nejbližší příbuzné (příbuzenské TKD). Příbuzenské TKD Z praxe pravděpodobnost výskytu HLA identického sourozence je 25%, neboť geny pro všechny HLA antigeny jsou přítomny na jediném 6. chromozomu. Pokud nemocný nemá HLA identického sourozence, může transplantace s menší pravděpodobností úspěchu proběhnout u rodičů nebo od haploidentických sourozenců (jeden HLA haplotyp je identicky, druhý odlišný). Nepříbuzenské TKD Pro větší část nemocných se musí hledat mezi nepříbuznými jedinci. Vyhledáváme dárce s identickým HLA fenotypem ve velkém souboru dobrovolných dárců (tzv. registru). 1.Centrální registr dárců KD Plzeň, 2.národní registr dárců KD Praha, 19 tisíc dárců. Vzhledem k velkému polymorfismu HLA systému zřídka ( v 1/5 případů) najdeme identického jedince na národní úrovni. Národní registry se spojují na evropské i světové úrovni (4 miliony registr. dárců). Místo plné kostní dřeně s transplantují pouze pluripotentní kmenové buňky (CD34+), které lze získat z dřeně nebo periferní krve. Vzhledem k prevence GvHDje výhodné transplantovat vlastní autologní (CD34+) tj. buňky odebrané pacientovi s malignitami ještě před nasazením vysokodávkované chemoterapie. Zkouší se i transplantace z pupečníkové krve.