Samčí gametofyt
mikrosporogeneze
mikrogametogeneze
SE micrograph of an early floral developmental stage
Photo:
C. J. Runions
Cornell University
Am. J. Botany
Clarkia xantania (Onagraceae)
blizna s čnělkou
http://www.botany.org/
plantimages větší prašníky
menší prašníky
petaly
sepaly s trichomy
Samčí rozmnožovací orgán = tyčinka
soubor tyčinek = androeceum
* tyčinka se zakládá jako meristematický hrbolek na
vrcholu květního základu
* z baze nitka (filamentum)
* z apexu prašník (anthera)
prašný váček prašný váček
konektiv
(spojidlo)
prašné pouzdro prašné pouzdro prašné pouzdro prašné pouzdro
prašný váček
prašné
pouzdro
tetrády
tapetum exothecium
endothecium
mezofyl
konektiv s CS
nitka
prašný váček
stomium
Řez prašníkem lilie
Mikrosporogeneze
vývoj mikrospor ze
sporogenních buněk
subepidermální buňky
meristem. hrbolku
primární
archespor
sporogenní
buňky
mikrosporocyty
pylové mateřské
buňky (PMC)
tetrády
mikrospor
mikrospory
redukční
meiot.
dělení kaláza
Stavba stěny prašníku
* exothecium = pokožková vrstva s kutikulou
* endothecium = subepidermální, vláknitá vrstva
* střední vrstva = mezofyl, parenchymatické pletivo
* tapetum = výstelka prašného pouzdra
­ žlaznaté (sekretorické)
­ ameboidní = periplazmodium
* stomium, hypostomium
Mikrogametogeneze
= vývoj samčích gamet
mikrospory
pylová zrna
dvoubuněčná
(tabák)
pylová zrna
tříbuněčná
(Arabidopsis, trávy)
mitóza
1x
2x
nezralá
stěna
vakuola
Meióza
I a II
Kaláza
1. mitóza
jádro
veget.
buňky
jádro
generat.
buňky
odvodnění
Pylová mat. buňka Tetráda volné mikrospory
mikrospora
nezralé pylové zrno
zralé pylové zrno
klíčící pylové zrno
2. mitóza
migrace
jádra
Apertura
dozrávání
tvorba mikrospor
tvorba gamet
kalózová stěna
spermat. buňky
pylová láčka
jádro
Nicotiana tabacum L. SR1
Vakuolizované mikrospory
polotenký řez, pryskyřice SPURR
vnější
tapetum
vnitřní
tapetum
mezofyl
endothecium
Variabilita pylu
Lilium Passiflora Accacia - polyady
Torenia Arabidopsis
Edlund et al. 2004
Lilium
desikovaný pyl
3 (-4) apertury
SEM, vysušeno metodou
,,critical poit dry", pozlaceno
Nicotiana tabacum L.
Cucurbita pepo L.
AQUASEM
mnoho apertur polysyfonické
klíčení
pylu
Vývoj prašníku tabákuparafínový řez:
alciánová modř
jaderná červeň
polotenký řez:
toluidinová modř
polotenký řez:
toluidinová modř
kryostatový řez:
indigogenní lokalizace
-glukosidasy
profáze I. mikrospory
pylpyl
pylpyl
Barvení pylu - materiál
květy a poupata:
* Cyclamen persicum
* Fuchsia sp.
* Setscresea purpurea
* Tradescantia sp.
Hodnocení viability pylu
* barvení ­ často nadhodnocuje životaschopnost pylu
* fluorescenční mikroskopie ­ aktivita enzymů: esterázy
(substrát FDA), peroxidázy (substrát TTC)
* klíčivost pylu in vitro
médium pro klíčení pylu in vitro:
Brewbaker ­ Kwack (1964) 100 ml
H3BO3 10mg
Ca(NO3)2 . 4 H2O 30mg
MgSO4 . 7 H2O 20mg
KNO3 10mg
+ 10% sacharóza
nebo 10% sacharóza a 1% agar (nanesení média na podložní sklo)
Diferenciální barvení pylu
Alexander 1969
96% ethanol 10 ml
malachitová zeleň 10 mg
destilovaná voda 50 ml
glycerol 25 ml
fenol 5 g
chloralhydrát 5 g
kyselý fuchsin 50 mg
oranž G 5 mg
ledová kys. octová 1 ­ 4 ml
abortovaná pylová zrna jsou zbarvena zeleně, dobře
vyvinutá (neabortovaná) červeně