Cytologie a morfologie bakterií Morfologie • Buňky • Charakteristických shluků buněk • Buněčných útvarů (spory, konidie, sporangia, pouzdra..) • Bakteriální kolonie Morfologie buňky • PREPARÁT - co chceme vidět? – podle toho preparát a typ mikroskopie tvar buňky – fázový kontrast, barvený fixovaný prep. pohyb buňky – fázový kontrast, fluorescence barvené struktury – pomáhají identifikaci (PHB, síra..) typ buněčné stěny – Gramovo a acidorezistentní b. • Borrelia burgdorferi (fig 1, 2) • Borrelia recurrentis (fig 1) • Bartonella henselae (fig 1, 2) • Chlamydia trachomatis (fig 1, images of elementary bodies, images of reticulate bodies) • Chlamydophila pneumoniae (images of elementary bodies, images of reticulate bodies) • Chlamydophila psittaci (images of elementary bodies, images of reticulate bodies) • Coxiella burnetii (fig 1, 2) • Ehrlichia chaffeensis (fig 1, 2) • Anaplasma phagocytophilum (formerly; Ehrlichia phagocytophilum or E. equi; Fig. 1) • Legionella sp. (fig 2) • Leptospira sp.(fig 1, 2) • Mycobacterium bovis (fig 1) • Mycobacterium tuberculosis (fig 1, 2 thanks to Anders Olav Lande, 3) • Mycobacterium avium, Mycobacterium intracellulare (fig 1 thanks to Anders Olav Lande) • Mycobacterium kansasii (fig 1) • Mycobacterium leprae (fig 1, for a close up thanks to Anders Olav Lande) • Mycobacterium marinum (fig 1) • Rickettsia rickettsii (Fig. 1,: scroll down to bottom of the page. 2) • Orientia tsutsugamushi (formerly; Rickettsia tsutsugamushi; Fig. 1) • Treponema pallidum(fig 1, 2, 3) U jednoho bakteriálního rodu různý vzhled char. tvaru buňky! • Př: tyčky bacilů •Haemophilus Posuzujeme-li vzhled buňky kmene určitého bakteriálního druhu, je třeba si uvědomit: 1) Prochází tento druh růstovými cykly? - v každém z nich má pak buňka jinou morfologii! Př: Chlamydia, Bdellovibrio, Streptomyces, Caulobacter, myxobakterie…. Mění se nejen vzhled buňky, ale buňka v cyklech prochází typickou změnou vnitřních struktur. Morfologie buňky vprostřed buněčného cyklu 2) Vytváří posuzovaný druh endospory? - v preparátu pak mohou měnit tvar buněk! Endospory vs. exospory 3) Stárnutím mění buňky tvar 4) Závislost tvaru buňky na vnějším prostředí - živiny, tlak, osmolarita… 5) pleomorfní buňky – př. rody Mycobacterium, Corynebacterium, Haemophillus, Mycoplasma Co je možno vyčíst z tvaru buňky • tvar buňky napovídá o metabolické aktivitě (kokovité buňky vykazují max. metabol. aktivitu neboť mají největší povrch ku objemu b.) • fáze růstového cyklu • ……. Morfologie charakteristických shluků buněk • typické shluky napomáhají identifikaci Morfologie bakt. kolonií • potřeba zvážit typ media, ne kterém kolonie hodnotíme! kultivace - zda vůbec kultivovatelné?? - sledování typu kolonií Př: sledování morfologie kolonií – univerzální media, jiný vhled na selektivním – zda vůbec růst či ne? barevná reakce?) S-, R- a M-formy sledování pohybu terasovité kolonie (Př: Proteus) Kontaminace na misce! Cytologie BAKTERIÁLNÍ BUŇKA x vs. eukaryotní • nutno porovnat pro pochopení fyziologie Zvláštnosti prokaryotické buňky • živý, otevřený systém schopný regulace a autoreprodukce • jádro neodděleno od CPL membránou, větš. kruhová (i lineární) DNA • haploidní buňky (1 alela) množící se nepohlavně • bez buněčných organel, jediná membrána je cytoplasmatická • ribosomy se liší od ribosomů eukaryotních buněk – menší, volně v CPL vyjma Archea: 5S, 16S a 23S rRNA translace začíná N-formylmethioninem geny pro RNA bez intronů specifické struktury a vlastnosti bakt. buňky: peptidoglykan (až na mykoplasmata) steroly v membránách zcela výjimečně bičík – globul. bílk. flagelin, pohyb rotací anaerobiosa, schopnost vázat N tvorba kyseliny PHB (zásob.l.) pokud fotosyntéza - anoxigenní • rozdíly ve strukturách v říši bakterií - G+ a G- atd. • Cytoplazmaticá membrána a buněčná stěna: • Buněčné povrchy • CYTOSOL Cytologie – 1) buněčné struktury • metody výzkumu PŘÍKLADY: • Složky peptidoglykanu (AMK, cukry) napomáhají při taxonomických studiích - složení PG, barvitelnost b. stěny, serologie, fagotypizace • Výskyt typ.inkluzí – pomoc při identifikaci • Bičík – vztah mezi strukturou a mechanismem otáčení, který je různý u různých druhů!! Cytologie a morfologie buněk v průběhu buněčného cyklu, ve fázích růstového cyklu, při dělení a smrti buňky • Opravy vždy • Nové kapitoly – biofilm • Rozšíření příkladů růstových cyklů – patogeni, prostředí.. • Protokoly – ppt, snímky na IS • Bc práce…. Bezpečnost a zásady práce