Cvičení 3

                          6.11. (10:00 – 13:00h) a 13.11. (8:00 – 12:00h)



Téma: acidorezistentní barvení a gramlabilní buňky


Pomůcky: Ziehl-Neelsenův karbolfuchsin, kyselý alkohol (96% alkoholu se 3% HCl), Löfflerův roztok
methylenové modři (před použitím zředěný 1:10), 1% HCl – pro důkaz druhého stupně acidorezistence


Mikroorganismy – od každého kmene prosím 3 misky:


Mycobacterium phlei CCM 5639 –  1. stupeň

-         rychle rostoucí mykobakteria. Tráva (Phleum), seno. medium č.24

-         22-52°C

-         krátké tyčky, 1-2 um, acidorezistence 2 stupně u mladých kultur (3-4denní), více než 5ti
denní acidorezistentní v rozmezí 5 – 100%.

-         drsné kolonie s intenzivním žlutým až oranžovým pigmentem po 2-5ti dnech

-         mladé kultury acidorezistentní, po 5 – 7 dnech kultivace může být barvitelnost nestabilní

2. stupeň acidorezistence:

Nocardia carnea CCM 2756

Rhodococcus erythropolis CCM 277

Corynebacterium glutamicum CCM 2428

Acinetobacter grimontii CCM 7198T – gramlabilní!!



Mycobacterium

Nocardia

Rhodococcus

Corynebacterium

Rovné nebo mírně zakřivené tyčky,

0,2-0,6 x 1-10 μm

zřídka větvená

vlákna, netvoří vzdušné

mycelium

Mycelium

Starší kultury: fragmentace

Vláken v tyčinky a koky

Obvykle tvoří vzdušné

mycelium

Slabé mycelium,

Fragmentujíví v nepravidelné tyčky a koky

Netvoří vzdušné mycelium

Nepravidelné tyčinky

Často svírají úhel

Nebo tvoří palisády

Rychlost růstu:

2-40 dní

1-5 dní

1-3 dny

1–2 dny

Acidorezistence 1.stupně

Nemusí být 2.stupeň

Acidorezistence 2.stupně

Acidorezistence 2.stupně

Acidorezistence 2.stupně

Špatně barvitelné

Gramovým barvením,

Pokud ano, tak G+

Barvitelné Gramem

Barvitelné Gramem

Barvitelné Gramem

Penicilin rezistentní

(některé druhy mohou

být sezitivní,

Př:M. avium)

Penicilin rezistentní

Penicilin sezitivní

Penicilin sezitivní