Karyotyp člověka
Karyotyp - soubor chromozomů v jádře buňky
21        22 xy
Význam - v genetickém poradenství ke stanovení změn ve struktuře a počtu chromozomů
Karyotyp člověka
Historie:
20. léta 20. století - přibližný počet chromozomů v buňce člověka 1956 - přesný počet chromozomů = 46 chromozomů
1965 - technika vyšetření chromozomů z periferní krve
- klasická technika barvení mitotických chromozomů orceinem = období morfometrických metod identifikace chromozomů
např. dle polohy centromery - metacentrický, submetacentrický, akrocentrický,
telocentrický
chromatidy
A
centromera-
ramena chromozómu
J
:
Karyotyp člověka
Historie:
20. léta 20. století - přibližný počet chromozomů v buňce člověka
1956 - přesný počet chromozomů = 46 chromozomů
1965 - technika vyšetření chromozomů z periferní krve
- klasická technika barvení mitotických chromozomů orceinem = období morfometrických metod identifikace chromozomů
např. dle polohy centromery - metacentrický, submetacentrický, akrocentrický,
telocentrický
1969 - 1. proužkovací technika - Q-pruhování
- počátek proužkovacích technik - identifikace chromozomů na základě počtu, tloušťky a pozice proužků - G-pruhy - působení trypsinem na metafázní chromozomy s následným barvením
Giemsovým barvivem
Karyotyp člověka
Chromozomy barvené G-pruhováním.
Karyotyp člověka
Historie:
20. léta 20. století - přibližný počet chromozomů v buňce člověka
1956 - přesný počet chromozomů = 46 chromozomů
1965 - technika vyšetření chromozomů z periferní krve
- klasická technika barvení mitotických chromozomů orceinem = období morfometrických metod identifikace chromozomů
např. dle polohy centromery - metacentrický, submetacentrický, akrocentrický,
telocentrický
1969 - 1. proužkovací technika - Q-pruhování
- počátek proužkovacích technik - identifikace chromozomů na základě počtu, tloušťky a pozice proužků - G-pruhy - působení trypsinem na metafázní chromozomy s následným barvením
Giemsovým barvivem
1976 - HRT - zavedení proužkovacích technik v profázi mitotického dělení - chromozomy
jsou méně spiralizované a kondenzované = více pruhů + identifikace i malých chromozomů
Současnost - G-pruhy
- FISH (Fluorescenční in situ hybridizace) - fluorescenční obarvení části chromozomu pomocí komplementární sondy
Výhody oproti pruhování:
- méně pracná
- nevyžaduje pro vyhodnocení takovou zkušenost
- odhalí i mikrodelece a drobné translokace
Nevýhody:
- lze sledovat jen oblast, k níž máme sondu
- nutný je fluorescenční mikroskop
- preparát není trvalý („zháší")
Karyotyp člověka
Hlavní zásady klasifikace lidských chromozomů:
1960 - Denverská konference - člověk má 23 párů chromozomů
č. 1 až 22 = autozomy č. 23 = gonozomy
1963 - Londýnská konference - rozdělení chromozomů do 7 skupin dle morfometriky
A - chromozomy č. 1 -3 B - chromozomy č. 4 a 5 C - chromozomy č. 6-12, X D - chromozomy č. 13-15 E - chromozomy č. 16-18 F - chromozomy č. 19 a 20 G - chromozomy č. 21, 22 a Y
1967 - konference v Chicagu - rozdělení aberací
1971 - konference v Paříží - zásady pro identifikaci naproužkovaných chromozomů
Karyotvp člověka
Sestavení karvotypu
Princip: na základě morfologie a proužkování chromozomy podle idiogramu uspořádáme do 7 skupin
Idiogram lidských chromozomů
Karyotyp člověka
Sestavení karvotypu
Princip: na základě morfologie a proužkování chromozomy podle idiogramu uspořádáme do 7 skupin
Postup:
- odběr periferní krve
- kultivace lymfocytů z periferní krve - indukce z G0 do G1 fáze buněčného cyklu pomocí
speciálního kultivačního média
- mitóza při 32 QC po dobu 72 hodin
- působení kolchicinem - zastavení mitózy, synchronizace buněk
- hypotonizace a fixace chromozomů
- barvení
Vyznám:
- určení pohlaví
- stanovení změn ve struktuře a počtu chromozomů
Př.:
zdravý muž - zápis: 46, XY Chronická myeloidní leukémie - Ph-chromozom
- translokace mezi chr. 9 a 22 - 46, XY t(9;22)
Klinefelterův syndrom - 47, XXY Turnérův syndrom - 45, XO Downův syndrom - 47, XY 21 + Pataův syndrom - 47, XX 13+
Sestavení karyotypu
Doma vyzkoušejte na internetu:
http://learn.qenetics.utah.edu/content/beqin/traits/karvotvpe/
Sestavení karvotypu
Karyotyp člověka
.1 L L L Li
*4 !Í  "í ^
8 8 10 11
y.     a a
1S 20 21 22
Vyfotografované chromozomy barvené G-pruhováním.
1) Rozstříhejte chromozomy a přiřaďte je k sesterským homologum
2) Určete - pohlaví jedince
- zda-li je jedinec zdravý a nebo zda některý chromozom chybí či přebývá