Nativní preparáty a sklíčkové kultury Vytvořila : Petra Szelcsányiová Osnova: •Teorie- endospora, pohyb bakteriální buňky, sklíčkové metody • •Zástupci: -Bacillus circulans CCM 2048 -Yarrowia lipolityca W1 -Nocardia carnea CCM 2756 -Streptomyces griseus subs. griseus CCM 3362 • •dokumentace - • • Teorie: •Endospora: -klidové stádium buňky -odpověď na vnější podmínky prostředí -je odolná k UV záření, vyšším teplotám, atd… -typická pro zástupce rodu Clostridium, Bacillus, Paenibacillus a další… • •Pohyb bakteriální buňky: -pomocí bičíků- plavání -plazivý pohyb kolonií -trhavý, skákavý pohyb -klouzavý pohyb - Sklíčkové metody: •1)Kultivace na krycím sklíčku: •- Sterilní pinzetou vložíme do silnější vrstvy agaru krycí sklíčko pod úhlem 45° •- Vyžíhanou kličkou odebereme vzorek a naočkujeme podélně podle sklíčka •2) Kultivace na podložním sklíčku- komůrka: -Do Petriho misky vložíme podložní sklíčko, které umístíme na korálky -Na Podložní sklíčko umístíme tenkou vrstvu agaru (zatuhlého) a naočkujeme sterilní kličkou kulturu -Přikryjeme krycím sklíčkem a na dno Petriho misky napipetujeme trochu destilované vody cir- faz cir - nom Bacillus circulans CCM 2048 – fázový kontrast Bacillus circulans CCM 2048 – Nomarského kontrast kultivační médium: 10 teplota kultivace: 30°C - terminálně uložené endospory vyklenující buňku yar 1 yar Yarow Yarrowia lipolityca W1 – Nomarského kontrast -komůrka Yarrowia lipolityca W1 –Nomarského kontrast - komůrka kultivační médium: MEA teplota kultivace: 30°C Obrázky: Vlevo- substrátové mycelium detail Vpravo nahoře- vzdušné mycelium Vpravo dole- substrátové mycelium Yarrowia lipolityca W1 –Nomarského kontrast - komůrka yar- sklicko 2 yar- sklicko yarow-sklic Yarrowia lipolityca W1 – jasné pole sklíčko Yarrowia lipolityca W1 – jasné pole sklíčko Yarrowia lipolityca W1 – jasné pole- sklíčko kultivační médium: MEA teplota kultivace: 30°C Obrázky: Vlevo- část substrátového mycelia Vpravo- vzdušné mycelium N nocardia vzdušné mycelium Nocardia carnea CCM 2756- jasné pole- komůrka Nocardia carnea CCM 2756- Nomarského kontrast - sklíčko kultivační médium: 8 teplota kultivace: 30°C ← vzdušné mycelium s s Streptomyces griseus subs. griseus CCM 3362 – Nomarského kontrast- komůrka Streptomyces griseus subs. griseus CCM 3362 – Nomarského kontrast- komůrka kultivační médium: 15 teplota kultivace: 30°C vzdušné mycelium → ← substrátové mycelium Streptomyces griseus sklíčka2 • Streptomyces griseus subs. griseus CCM 3362 jasné pole- sklíčko kultivační médium: 15 teplota kultivace: 30°C vzdušné mycelium → Dokumentace: •Morfologie buněk a endospor: •Pro pozorování preparátů v jasném poli, fázového a Nomarského kontrastu jsme použili badatelský mikroskop Olympus BX 50 RGB s videokamerou Hitaschi •zpracování a analýza obrazu v programu LUCIA G 4.61 •