Nativní preparáty, fázový kontrast a Nomarského DIC. Technika sklíčkových kultur. Endospory. Pohyb bakteriální buňky. Protokol 2 Vypracovala: Radka Tihelková Dne: 20.11.2011 Úkoly 1.Průkaz a hodnocení morfologie endospor v nativním preparátu, dokumentace. •2. Pozorování pohybu bakteriální buňky. •3. Příprava sklíčkových kultur. •4. Pozorování vláknitých bakterií řádu Actinomycetales na sklíčkových kulturách, srovnání s pseudomyceliem u kvasinkovitých mikroorganismů. Bi7340 Cytologie a morfologie bakterií - cvičení Endospory –Úkol: Průkaz a hodnocení morfologie endospor v nativním preparátu, dokumentace. –Organismus: Bacillus subtilis CCM 2216 – (médium 10, 30°C, 24h) –Příprava preparátu: 1.Na podložní sklíčko kápneme kapku sterilní vody a do ní kličkou přeneseme malé množství kultury sporulující bakterie ze šikmého agaru. 2.Resuspendujeme, preparát překryjeme krycím sklíčkem a v rozích zakápneme parafinem. 3.Pozorujeme světlém poli a Nomarského DIC. Bi7340 Cytologie a morfologie bakterií - cvičení Bacillus subtilis CCM 2216 •Pozorování ve fázovém kontrastu Bi7340 Cytologie a morfologie bakterií - cvičení b_subtilis1.jpg oválná endospora, uložená subterminálně Bacillus subtilis CCM 2216 •Pozorování v Nomarského DIC Bi7340 Cytologie a morfologie bakterií - cvičení nomar_bsubtilis3.jpg Pohyb bakteriální buňky –Úkol: Pozorování pohybu bakteriální buňky. –Organismus: Bacillus subtilis CCM 2216 – (médium 10, 30°C, 24h) –Příprava preparátu: 1.Stejný postup jako v případě pozorování endospor. –Popis pohybu: –Ve vzorku bylo možné pozorovat swimming motility neboli plavání. –Při pozorování pohybu bakterií bylo důležité odlišit Brownův pohyb od skutečného pohybu způsobeného bakterií. –B. subtilis je pohyblivý díky svým peritrichálním bičíkům. – Bi7340 Cytologie a morfologie bakterií - cvičení Sklíčkové kultury, bakterie řádu Actinomycetales •Úkol: Příprava sklíčkových kultur. Pozorování vláknitých bakterií řádu Actinomycetales na sklíčkových kulturách, srovnání s pseudomyceliem u kvasinkovitých mikroorganismů. •Organismus: •KRYCÍ SKLÍČKO: Nocardia carnea CCM 2756 (8, 30°C, 7 dní) • Saccharomyces cerevisiae (MEA, 30°C, 7 dní) • Str. griseus ssp. griseus CCM 3362 (15, 30°C, 7 dní) •KOMŮRKA: Str. griseus ssp. griseus CCM 3362 (15, 30°C, 7 dní) • Bi7340 Cytologie a morfologie bakterií - cvičení na krycím sklíčku •Nocardia carnea CCM 2756 nocardia.sb.jpg •Saccharomyces cerevisiae Bi7340 Cytologie a morfologie bakterií - cvičení Pozorování ve světlém poli Pozorování ve světlém poli sacchar_kryci.jpg vzdušné mycelium substrátové mycelium (hyfy) pseudomycelium komůrka •Str. griseus ssp. griseus CCM 3362 Bi7340 Cytologie a morfologie bakterií - cvičení •Pozorování v Nomarského DIC streptomyces_griseus1.jpg streptomyces_griseus.jpg řetízek spor vzdušné mycelium substrátové mycelium