- 1. blok - Morfologie prokaryotické buňky a morfologie bakterií Lucie Zátopková 2.seminární skupina Cytologie a morfologie bakterií Použité kultury nSerratia marcescens CCM 303 nArthrobacter crystallopoietes CCM 2386 qkultura kultivovaná 24 hodin qkultura kultivovaná 7 dní nLactobacillus brevis CCM 3805T nPaenibacillus polymyxa CCM 1459 n nHaloarcula hispanica CCM 3601T Použité metody barvení nGramovo barvení nnátěr bakteriální kultury nfixace plamenem nkrystalová violeť 30s noplach vodou nLugolův roztok 30s noplach vodou nodbarvení etanolem 20s noplach vodou ndobarvení safraninem 1min noplach vodu, osušení nnegativní barvení nigrosinem nrozmíchání kličky bakteriální kultury v kapce vody npřidání kapky nigrosinu nzamíchání nrozetření suspenze pomocí druhého krycího sklíčka po ploše sklíčka nusušení na vzduchu nneprovádí se fixace! n Serratia marcescens CCM 303 nG- n ntyčka n nčerveně n pigmentující n kolonie n nstáří kultury: n 24h Serratia marcescens CCM 303 5 nSerratia marcescens CCM 303 nmetoda pozorování v jasném poli nGramovo barvení → G- tyčky, jednotlivě Serratia_marcescens_CCM_303 nSerratia marcescens CCM 303 nmetoda pozorování v jasném poli nnegativní barvení nigrosinem Serratia_marcescens_negat tyčka Arthrobacter crystallopoietes CCM 2386 nG+ n nrůstový cyklus n - střídání tyček n a koků qstárnutím ndochází ke nzkracování n nstáří kultur: q24h a 7dní n n Arthrobacter crystalopoietes CCM 2386 1 nArthrobacter crystallopoietes CCM 2386 nmetoda pozorování v jasném poli nGramovo barvení → G+ nkultura kultivovaná 24 hodin → tyčky Artrobacter_crystallopoietes_CCM_2386_24h typické dvojice tyček do tvaru V nArthrobacter crystallopoietes CCM 2386 nmetoda pozorování v jasném poli nGramovo barvení → G+ nkultura kultivovaná 7 dní → koky Artrobacter_crystallopoietes_CCM_2386_7dni koky tvořící dvojice či shluky nArthrobacter crystallopoietes CCM 2386 nmetoda pozorování v jasném poli nnegativní barvení nigrosinem nkultura – 7 dní Artrobacter_crystallopoeites_CCM_2386_24h_neg kokovité buňky Lactobacillus brevis CCM 3805T nG+ n nkrátké tyčky n nstáří kultury: q24h n Lactobacillus brevis CCM 3805T 2 nLactobacillus brevis CCM 3805T nmetoda pozorování v jasném poli nGramovo barvení → důsledkem stáří kultury došlo k gramvariabilnímu obarvení Lactobacillus_brevis G± tyčky Paenibacillus polymyxa CCM 1459 nG+ n ntyčky n nstáří kultury: 5dní Paenibacillus polymyxa CCM 1459 2 Paenibacillus polymyxa CCM 1459 1 nPaenibacillus polymyxa CCM 1459 nmetoda pozorování v jasném poli nGramovo barvení – preparát 2x opakován, vždy ale vyšel jako G-, správně má být G+ Paenibacillus_polymyxa_imerze tyčka spóra nPaenibacillus polymyxa CCM 1459 nmetoda pozorování v jasném poli nnegativní barvení nigrosinem Paenibacillus_polymyxa_neg tyčka Haloarcula hispanica CCM 3601T nArchaea nbarví se jako G- nextrémně pleomorfní tyčky, až nepravidelné disky nstáří kultury: téměř q14 dní nmédium s vysokým obsahem NaCl Haloarcula hispanica CCM 3601T 4 Haloarcula hispanica CCM 3601T 5 nHaloarcula hispanica CCM 3601T nmetoda pozorování v jasném poli nGramovo barvení – obarvení jako G- Haloarcula_hispanica pleomorfní buňky Použitá přístrojová technika nbadatelský mikroskop qOlympus BX 50 RGB nvideokamera Hitaschi nsystém analýzy obrazu qLUCIA G 4.61 n nstudentské mikroskopy nbinokulární lupy ndigitální fotoaparát Dodatek: nu bakterie Lactobacillus brevis nebylo z časových důvodů provedeno negativní barvení n nkultura Haloarcula hispanica v týdnu přípravy preparátů dostatečně nevyrostla, proto byl preparát připraven následující týden dodatečně a bylo provedeno jen Gramovo barvení