Příprava krevního séra z lidské krve


Teorie:

Krevní sérum se získává z krve ke kvantitativnímu a kvalitativnímu stanovení různých látek
nacházejících se v séru a charakterizujících současný zdravotní stav jedince (např. stanovení
imunoglobulinů, C-reaktivního proteinu, složek komplementu, proteinů akutní fáze, autoprotilátek
proti vlastním tkáním, protilátek proti mikroorganismům, hormonů atd).


Úkol:

Příprava lidského séra z krve pro další zpracování ke kvantitativnímu a kvalitativnímu stanovení
různých látek.


Pomůcky:

Ajatin - desinfekce, rukavice, sterilní bodce, mikropipety a špičky, eppendorfky, štítky,
popisovač, centrifuga


Postup práce:

Šetrně a v rukavicích odebereme sterilně krev z prstu do eppendorfky, označíme štítkem a dáme do
ledničky do druhého dne. Další den opatrně pomocí špachtličky odlepíme krevní koláč z epiny, pak
stočíme na centrifuze do 1500 otáček/min asi 5 - 10 minut, odebereme žlutavou tekutinu (tj. sérum,
vyloučené na povrch vzniklého krevného koláče a krevní sraženiny), dáme do další eppendorfky,
označíme štítkem a zamrazíme pro použití na další cvičení.


         Krevní diferenciál leukocytů

Úkol: zjištění krevního diferenciálu u lidské a myší krve


Pomůcky: krevní roztěr, mikroskop, objektiv pro pozorování pod imerzí, olej nebo glycerol


Provedení: podle schematu prohlížíme krevní nátěr a zjištěné počty leukocytů zapisujeme do tabulky.
Po zapsání 100 leukocytů sečteme jednotlivé sloupce a zjistíme tak procentuální zastoupení
jednotlivých druhů leukocytů. V preparátu krevního roztěru se nachází následující krevní elementy:
červené (erytrocyty) a bílé (leukocyty) krvinky, a krevní destičky (trombocyty).

Leukocyty dělíme na granulocyty (neutrofil, eozinofil, bazofil) a agranulocyty (monocyt, lymfocyt).

U zdravého jedince by měl být výsledek následující:

          leukocyty


tyčka (prekurzor neutrofilu)

                                   1-2 %

neutrofil

                                 55-60 %

eozinofil

                                   2-3 %

bazofil

                                   0,5 %

monocyt

                                   5-7 %

lymfocyt

                                 30-40 %

Zjištěné počty buněk se zapisují do speciální tabulky (viz dále).

  neutrofil

                                                  tyčka

                                                       lymfocyt

                                                               monocyt

                                                                      eosinofil

                                                                               bazofil

                                                                                      neznámý

                                                                                             suma








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             100





  neutrofil



                                                  tyčka



                                                       lymfocyt



                                                               monocyt



                                                                      eosinofil



                                                                               bazofil


                                                                                      Neznámý


                                                                                             Suma









                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             10








                                                                                             50



         Počítání bílých krvinek se provádí posunováním zorných polí podle tohoto obrázku

Krevní diferenciál se stanovuje při běžném vyšetření zdravotního stavu  člověka. Změny v počtu
bílých krvinek totiž mohou předznamenávat  řadu krevních a jiných chorob, pro které jsou tyto
změny typické.