Bull. Slov. Bot. Spoločn., Bratislava, Supl. 10: 83–86, 2004 Epilitické cyanobaktérie a riasy v podzemnom Mauzóleu Chatam Sófer Epilithic cyanobacteria and algae in subterrean Mausoleum Chatam Sófer BOHUSLAV UHER & ĽUBOMÍR KOVÁČIK Katedra botaniky PríF UK, Révová 39, 811 02 Bratislava 1; uher@fns.uniba.sk The species composition of epilithic cyanobacteria and algae in subterrean Mausoleum Chatam Sofer, was investigated over a period of one year (2002) with samples collected and monospecious cultures cultivated. A total of 28 taxa of cyanobacteria and algae were determined, 109 unialgal strains were obtained. The dominant species within these communities are mainly filamentous forms of cyanobacteria (Nostoc, Leptolyngbya), chlorophytes (Klebsormidium), xanthophytes (Heterococcus) and also unicellular cyanobacteria (Chroococcidiopsis) and chlorophytes (Chlorella, Chlorosarcinopsis). Keywords: algae, biodeterioration, cyanobacteria, Chatam Sofer, subaerial biotopes. Na území Bratislavy sa nachádza niekoľko historických cintorínov (Ondrejský cintorín, Evanjelický cintorín Kozia brána, Cintorín sv. Mikuláša, Neologický židovský cintorín atď.). Čiastkové údaje o cyanobaktériách a riasach z náhrobkov cintorínov uverejnili už skôr Kapusta & Kováčik (2000), Uher (2002), Uher & Kováčik (2002). Chatam Sófer pôsobil v Bratislave v období 1806–1839 ako hlavný rabín a predstavený ješivy (židovskej školy), ktorá tu existovala od 14. storočia až do roku 1939. Kamenná tumba so Sóferovými telesnými ostatkami tvarovo pripomína antický sarkofág. Nachádza sa v betónovej hrobke pred portálom tunela od Dunaja pod úrovňou frekventovanej mestskej komunikácie spolu s ďalšími 23 zachovanými hrobmi a 41 náhrobnými kameňmi starého židovského cintorína, ktorý na tomto mieste bol založený v roku 1670 (Stern 1998). Cieľom výskumu bolo prostredníctvom kultivácie zistiť potenciálnu fykoflóru v podzemnom Mauzóleu Chatam Sófer a zároveň stanoviť, ktoré štádium predstavuje pre daný druh „vegetatívnu bunku“. Materiál a metódy Z hľadiska substrátu ide zväčša o pieskovcové náhrobné kamene. Odber vzoriek bol vykonávaný roku 1998 krátko pred totálnou rekonštrukciou Mauzólea, keď vnútorné priestory betónovej krypty boli osvetľované len v čase čoraz častejších návštev židovských veriacich, teplota vzduchu (1 m nad betónovou podlahou) v tom čase v priebehu roka kolísala v rozpätí 9,8–21 °C a relatívna vlhkosť vzduchu 96–98%. Nevyhnutným predpokladom na štúdium účasti cyanobaktérií a rias v procese biodeteriorizácie kamenných substrátov je využitie laboratórnych kultivácií. Metodiku laboratórneho štúdia cyanobaktérií sme robili podľa práce Ettl (1978). Cyanobaktérie a riasy boli pestované v tekutom a pevnom živnom médiu (s 1,5% agarom), resp. v tzv. bifáze (Davis 1967), pričom sme použili kultivačné médiá Z podľa Zehndera (Staub 1961), BG11 (Rippka et al. 1979) a BBM (Chantanachat & Bold 1962). Spôsob izolácie a kmeňovej kultivácie sme vykonali podľa práce Komárka (1978). Kultúry sme udržiavali pri laboratórnej teplote cca 22 °C a permanentnom žiarivkovom osvetlení 662 l H resp. 2,14 W.m2 (PAR), alebo 10,3 µmol.s-1 .m-2 . Pri mikroskopovaní sme používali mikroskop značky Zeiss pri zväčšeniach (okulár H objektív) 16 H 10, 16 H 40 a 16 H 100 83 (olejová imerzia), na meranie objektov sme používali okulár s mikrometrom. Na determináciu a taxonomické vyhodnotenie kultúr cyanobaktérií a rias sme použili viaceré determinačné kľúče a monografie (Albertano & Kováčik 1994, Andrejeva 1975, Ettl & Gärtner 1995, Geitler 1932, Hindák et al. 1978, Komárek & Anagnostidis 1999, Starmach 1966 a i.). Pri štúdiu sme sa pridržiavali zásad taxonomickej práce ako uvádza Komárek (1978). Taxonomická nomenklatúra je zjednotená podľa práce Marhold & Hindák (1998), skratky autorov botanických mien rastlín sú podľa práce Brummitt & Powell (1992). Výsledky a diskusia V podzemnom Mauzóleu Chatam Sófer sme determinovali celkom 28 taxónov, z čoho je 7 cyanobaktérií, 1 žltozelená riasa a 20 zelených rias. Nasledujúci zoznam obsahuje všetky druhy cyanobaktérií a rias súhrnne za celé obdobie výskumu v podzemnom Mauzóleu Chatam Sófer, s uvedenou frekvenciou kmeňov Kováčik et Uher 1998/ * s poradovým číslom v zátvorke. CYANOBACTERIA/CYANOPHYTA Trieda: Cyanophyceae Rad: Chroococcales Čeľaď: Synechococcaceae Aphanothece pallida (*2) Čeľaď: Xenococcaceae Chroococcidiopsis umbratilis (*5, 72) Rad: Oscillatoriales Čeľaď: Pseudanabaenaceae Leptolyngbya cf. fragilis (*56, 58), Leptolyngbya nostocorum (*77), Leptolyngbya cf. tenuis (*38) Rad: Nostocales Čeľaď: Nostocaceae Nostoc edaphicum (*31, 73, 74, 78, 79, 89, 99, 100, 101, 102), Nostoc microscopicum (*80, 87) HETEROKONTOPHYTA Trieda: Xanthophyceae Rad: Tribonematales Čeľaď: Heterococcaceae Heterococcus brevicellularis (*106, 107) CHLOROPHYTA Trieda: Chlamydophyceae Rad: Chlorococcales Čeľaď: Chlorococcaceae Cystomonas cf. indica (*61, 62), Tetracystis excentrica (*60) Rad: Chlorellales Čeľaď: Characiaceae Kentrosphaera gibberosa (*103) Čeľaď: Chlorellaceae Chlorella vulgaris (*11, 15, 29, 37, 67, 91), Ch. lobophora (*16, 109), Ch. cf. kessleri (*21, 53, 64), Muriella terrestris (*1, 14, 17, 25, 27, 30, 32, 33, 34, 40, 45, 46, 51, 52, 59, 65, 68, 70, 71, 75, 83, 85, 86, 95, 98, 108), M. zofingiensis (*26, 36, 41, 57, 63), M. cf. terrestris 1 (*8), M. cf. terrestris 2 (*92, 104, 105) Čeľaď: Radiococcaceae Gloeocystis cf. vesiculosa (*28) Čeľaď: Oocystaceae Oocytis sp. (*42), O. asymmetrica (*7), O. minuta (*66, 88) 84 Čeľaď: Scenedesmaceae Scenedesmus cf. acutus (*48), S. obliquus (*9, 19) Čeľaď: Chlorosarcinaceae Chlorosarcinopsis pseudominor (*18, 93, 12, 22, 23, 49) Trieda: Charophyceae Rad: Klebsormidiales Čeľaď: Klebsormidiaceae Klebsormidium flaccidum (*3, 4, 20, 50, 72, 84), Stichococcus sp. (*97), S. bacillaris (*69) Poznanie životných cyklov je dôležité pre správnu determináciu mnohých taxónov cyanobaktérií a rias. V študovanom materiáli sme zistili úplný životný cyklus pri druhoch Heterococcus brevicellularis Vicher, Chlorosarcinopsis pseudominor Groover & Bold, Scenedesmus obliquus G. S. West, Oocystis asymmetrica W. & G. S. West sensu Komáromy, Klebsormidium flaccidum (Kütz.) Silva, Mattox & Blackwell a Kentrosphaera gibberosa Vodeničarov et Benderliev. Po prvý raz vôbec sa pozorovalo pohlavné rozmnožovanie izogamiou pri druhu Kentrosphaera gibberosa var. gibberosa, a tvorba zygospór v bifázových kultúrach. Pri druhoch Scenedesmus obliquus (Turp.) Kütz. a Oocystis asymmetrica W. & G. S. West sensu Komáromy, ktoré Komárek a Fott (1983) zaradili do rodu Ecdysichlamys na základe typu materských bunkových stien, sme dospeli k záverom, že bunkové steny sú často po prasknutí dlho s dcérskymi bunkami, pričom netvoria puzdro okolo vegetatívnych buniek. Tento diakritický znak je stabilný pre týchto zástupcov z dvoch odlišných rodov, čo vyplýva z funkčnej adaptácie na terestrické podmienky. Podobný morfologicky prejav majú aj na agarom spevnenom médiu BBM alebo v bifázových kultúrach, ale v roztoku BBM už je prejav výrazne odlišný a S. obliquus vytvára cenóbiá, ktoré sa netvoria pri druhu O. asymmetrica. Na základe štúdia cyanobaktérií a rias a doplňujúcich štúdií môžeme zhodnotiť potenciálne biodeteriorizačné riziká pre kamenné náhrobky v synergickom pôsobení environmentálnych faktorov (najmä vlhkosti a teploty) za významné. V tomto čiastkovom výskume sme potvrdili, že všetky determinované taxóny sú pôvodne terestrické (resp. subaerické) a že pôda býva najčastejším zdrojom “infekcie” kameňa ako vhodného substrátu pre mikroorganizmy . Pri porovnaní s inými biodeteriorizačnými štúdiami, sme opakovane potvrdili výskyt zástupcov z rodov Aphanothece, Chroococcidiopsis, Leptolyngbya, Nostoc, Chlorosarcinopsis, Muriella, Chlorella, Stichococcus, Scenedesmus, Oocystis a Klebsormidium aj na tejto lokalite (cf. Anagnostidis et al. 1992, Andrejeva 1973, Asencio & Aboal 2000, Grilli Ciaola et al. 1987, Kapusta & Kováčik 2000, Lee & Eggleston 1989, Leitao et al. 1996, Mannino 1991, Ortega-Calvo et al. 1991, OrtegaCalvo et al. 1993, Schlichting Jr. 1975, Tomaselli et al. 1982). Poďakovanie Výskum bol riešený v rámci projektu Grantovej agentúry VEGA č. 1/9114/02 a Grantu pre doktorandov PRIF UK 10/2002 s názvom „Ultraštrukturálne aspekty ataku cyanobaktérií a rias v procese biodeteriorizácie stavebných kameňov kultúrneho významu v Bratislave“. Autori ďakujú Prof. RNDr. Františkovi Hindákovi, DrSc. za kritické pripomienky k determinovaným taxónom cyanobaktérií a rias. 85 Literatúra Albertano P. & Kováčik Ľ., 1994: Is the genus Leptolyngbya (Cyanophyta) a homogenous taxon? – Algol. Stud., 75: 37–51. Anagnostidis K., Gehrmann C. K., Gross M., Krumbein W. E., Lisi S., Pantazidou A., Urzi C. & Zagari M., 1992: Biodeteration of marbles of the Parthenon and Propylaea, Acropolis, Athens associated organisms, decay and treatment suggestions. – In: Decrouez D., Chamay J. & Zezza F. (eds.), The conservation of monuments in the Mediterranean Basin, Proc. 2-nd Int. Symp., Genéve, 19.-21.11. 1991. Musée d'Art et d'Histoire Naturelle, Genéve, pp. 305–325. Andrejeva V.M., 1975: Novije vidy Chlorella Beijer. – Bot. Ž., 63: 441–460. Asencio A.D. & Aboal M., 2000: A contribution to knowledge of chasmoendolithic algae in cave-like environments. – Algol. Stud., 98: 133–151. Brummitt, R.K. & Powell, C.E. (eds), 1992: Authors of plant names. Royal Botanic Garden, Kew, pp. 1–732. Davis J.S., 1967: A technique for long term maintenance of alga cultures. – Transac. Illinois St. Acad. Sci., 60: 1–109. Ettl H., 1978: Metódy laboratórneho štúdia rias. – In: Hindák, F. (ed.), Sladkovodné riasy. SPN, Bratislava, pp. 163–185. Ettl H. & Gärtner G., 1995: Syllabus der Boden-, Luft- und Flechtenalgen. Gustav Fischer Verlag, Stuttgart, Jena, New York. Garty J., 1990: Influence of epilithic microorganisms on the surface temperature of building walls. – Can. J. Bot., 68: 1349–1353. Geitler L., 1932: Cyanophyceae. – In: Rabenhorst, L.(ed.), Kryptogamen Flora 14. Akademische Verlags-Gesellschaft, Leipzig, pp 1–1196. Grilli Ciaola M., Forni C. & Albertano P., 1987: Characterization of the algal flora growing on ancient Roman frescoes. – Phycologia, 26: 387–390. Hindák F. (ed.), 1978: Sladkovodné riasy. SPN, Bratislava. Chantanachat S. & Bold H.C., 1962: Phycological studies II. Some algae from arid soils. –Texas Publ., 6218: 1–74. Kapusta M. & Kováčik Ľ., 2000: Epilitická fykoflóra vybraných antropogénnych objektov mesta Bratislavy. – Bull. Slov. Bot. Spoločn., 22: 15–22. Komárek J. & Anagnostidis K., 1999: Cyanoprokaryota 1. Teil. Chroococcales. – In: Ettl, H., Gärtner, G., Heinig, H. & Mollenhauer, D. (eds), Süβwasserflora von Mitteleuropa, Bd.19/1. Gustav Fischer Jena, Stuttgart, Lübeck, Ulm, pp.1–548 Lee T.F. & Eggleston P.M., 1989: Airborne algae and cyanobacteria. – Grana, 28: 63–66. Leitão M.T., Santos M.F., Sérgio C., Ormonde J. & Carvalho C.M., 1996: Plantas criptogámicas na atmosfera de coimbra, Portugal. – Anales Jardin Bot. de Madrid, 54:30–36. Marhold K. & Hindák F., 1998: Zoznam vyšších a nižších rastlín Slovenska (CD-ROM). Veda, Bratislava. Ortega-Calvo M., Hernandez-Marine M. & Saiz -Jimenez C., 1991: Biodeterioration of Building Materials by Cyanobacteria and Algae. – International Biodeterioration, 28: 165–185. Ortega-Calvo J.J., Hernandez-Marine M. & Saiz-Jimenez C., 1993: Cyanobacteria and algae on historic buildings and monuments. Recent Adv. – Biodeter. and Biodegr., 1: 173–203. Rippka R., Deruelles J., Waterbury J.W., Herdman M. & Stanier R.G., 1979: Genetic assignments, strain histories and properties of pure cultures of cyanobacteria. – J. Gen. Microbiol., 11: 1–61. Schlichting H.E. Jr., 1975: Some subaerial algae from Ireland. – Br. Phycol. J. 10: 257-261. Staub R., 1961: Ernährungsphysiologisch-autökologische Untersuchungen an der planktischen Blaualge Oscillatoria rubescens DC. – Schweiz. Z. Hydrol., 23: 82–198. Starmach K., 1966: Cyanophyta - Sinice, Glaucophyta - Glaukofity. – In: Starmach, K. (ed.), Flora Słodkovodna Polski. Paňstwowe Wydawnictwo Naukowe, Warszawa, 2: 1–808. Stern T., 1998: Beth Olam - Dom večnosti. Židovské cintoríny na Slovensku. – Pamiatky a múzeá, 1: 33–38. Tomaselli L., Margheri M.C. & Florenzano G., 1982: Indagine sperimentale sul ruolo dei cianobatteri e delle microalghe nel deterioramento di monumenti ed affreschi. – In: Proc. 3rd Int.Congress on Deterioration and Preservation of Stones. Universita degli Studi, Instituto di Chimica Industriale, Venice, Padova, pp. 313–325. Uher B., 2002: Úloha cyanobaktérií a rias v procese biodeteriorizácie stavebného kameňa kultúrneho významu. – In: Zborník abstraktov prác diplomantov a doktorandov, Študentská vedecká konferencia, Bratislava, 11.–12. 4. 2002. PriF UK, Bratislava, pp. 41. Uher B. & Kováčik Ľ., 2002: Epilithic green algae from the tombstone in historic cemetery in Bratislava, Slovakia. – In: Hindák F. (ed.), Programme & Abstracts. – Biology and Taxonomy of Green Algae IV, International Symposium, Congress Center of the Slovak Academy of Sciences, Smolenice-Castle, Slovakia, June 24.–28, 2002. SAV, Bratislava, pp.87. 86