Média s vodou nemísitelná Barvení trvalých preparátů KANADSKÝ BALSÁM • nejpoužívanější • Abies balsamea, A. canadensis • vysoký index lomu 1,535 • dobře konzervuje • neodbarvuje • rozpustný v xylenu, benzenu, toluenu • s vodou - bílý zákal • s alkoholem - olejovité kapky • suší se v termostatu při 40°C • hustý se ředí xylenem DAMMARA • polofosilní pryskyřice stromů r. Dammara, Austrálie, Nový Zéland • vlastnosti a zacházení stejné jako KB • EUKITT - syntetická pryskyřice před montováním do kanadského balsámu -vzestupná alkoholová řada pro odvodnění a projasnění základní rada 70%-96%-100% alk. - karbol-xylen, xylen, KB hřebíčkový olej 3:1, 1:1, 1:3, KB Bioclear - netoxická náhrada xylenu doba odvodnění od 5 minut do půl hodiny podle velikosti objektů pokud špatně odvodníme, objekt se mléčně zakalí a je neprůhledný opakovat odvodnění 100% alk. můžeme vynechat základní řadu můžeme modifikovat podle vlastních potřeb zkrácená cesta fenol-alkohol • pro objekty s malým množstvím měkkých tkání -ústní ústrojí hmyzu úkol 1. nebarvený objekt - preparát z klíštěte obecného Ixodes ricinus, fixovaného v 70% alkoholu vzestupná alkoholová řada do Petriho misek 70% alk (5min.) - 96% alk.(10 min) - Karbol-xylen (5 minut) -xylen (5 minut)- pak rychle přeneseme odvodněný a projasněný objekt do kanadského balsámu Barvení kyselá barviva - plasma (eosin) zásaditá - jádro (hematoxylin, karmín) neutrální (Giemsa) /. i..i-„ v "-i- ^ přírodní barviva živočišná: Dactylopius coccus (nopálovec karmínový) = karmín rostlinná: Hematoxylon campechianum (kampeška čínská) = hematoxylin (fialová barva, vypírání ve vodovodní vodě); lišejníky orcein umělá (anilinová) - eosin • progresivní barvení - barvíme do žádaného stupně • regresivní - přebarvíme, diferencujeme • in toto - celý bloček před řezáním • sukcedánní - přenos do několika barevných roztoků • simultánní - několika barvivy současně • otrochromatické - stejná barva jako roztok • metáchromatické - jedna barva různé složky tkáně barevně odlišně • difůzní - stejná intenzita i odstín • elektivní - různá intenzita • barvení v mikrovlnné troubě 2. barvíme motolice železitým acetokarmínem -regresivní způsob barvení (přebytečné barvivo se odstraní diferenciací v kyselém alkoholu) • 5 petriho misek • kyselý alkohol -70% - 96% - karbol-xylen, xylen do odbarvení 5 min 15 5 5 Úkol č. 1 Úkol č. 2 Ixodes ricinus (klíště obecné) • 70% (5')-96% (10')- • karbol-xylen (5') - xylen (5')-KB • nebarveny objekt samice ^ j samec <— nymfa přísavky ^j1 ^^^1 ^^^1 ^^^1 ^K^l ^E^l ^^^2 Brandesův orgán motolice • Hysteromorpha triloba • barveno železitým acetokarmínem • regresivní barveni • kyselý alkohol (do odbarvení) - 70% (5 min) -96% (10 min)-karbol-xylen (5 min)- xylen (5 min) - KB strigeidní motolice - 1.MH = šnek - 2. MH = ryba - D H = rybožravý pták (pelikán, kormorán Úkol č. 1 Úkol č. 2 Ixodes ricinus (klíště obecné) • 70% (5')-96% (10')- • karbol-xylen (5') - xylen (5')-KB • nebarveny objekt motolice • Lutztrema sp. • barveno železitým acetokarmínem • regresivní barveni • kyselý alkohol (do odbarvení) - 70% (5 min) -96% (10 min)-karbol-xylen (5 min)- xylen (5 min) - KB Distomní motolice firma Merck • Montovací média - nevodná • Entellan (index lomu n=1,5) obsahuje toluen 1.07961 • Entellan new (index lomu n=1,49-1,5) obsahuje xylen • Kanadský balzám (index lomu n=1,515-1,530) • Kanadský balzám roztok v xylenu (2+1) (index lomu n=1,515-1,530) • Merckoglas (index lomu n=1,50-1,51) obsahuje toluen • Merckoglas new (index lomu n=1,5) (kapalné krycí sklo) • Neo-Glass (index lomu n=1,5) montovací médium pro aplikaci s EM-sprayerem a Neo-Clearem • Neo-Mount (index lomu n=1,44) montovací médium po použití Neo-Clearu