Sylabus botanické mikrotechniky Bi1301

                                 0/2 (J. Dubová)       podzim 2012

1.           20.9.2012 Úvod do praktika: náplň cvičení, doporučená literatura, organizace,
bezpečnost práce. Vývoj stavby mikroskopů (Zeiss, Laboval 3, Biolar, Meopta Bi, Olympus CX31,
Olympus BX-51), Köhlerův princip, Abbeův kondenzor, pankratický kondenzor.

2.           27.9.2012 Metody studia neprůhledných objektů: mikroskopie v dopadajícím světle,
mikroreliéfová metoda pro studium stavby krycích pletiv (epidermální buňky, svěrací buňky průduchů,
vedlejší buňky, klasifikace průduchů podle různých kritérií, trichomy).

3.           4.10.2012 Metody projasňování rostlinného materiálu a jejich aplikace v rostlinné
embryologii (vývoj samičího gametofytu a embrya) nebo při studiu vývoje cévních svazků ve vývojové
biologii, šikmé osvětlení, rozlišovací schopnost, numerická apertura.

4.           11.10.2012 Rychlé cytologické metody: Roztlaky a roztěry, typy barviv pro jaderné
barvení roztlakových preparátů (acetokarmín, laktopropionový orcein), kořenová čepička,
předpůsobení pro karyologická studia (mitotické jedy).

5.           18.10.2012 Interferenční kontrasty: fázový kontrast, stavba fázového kondenzoru a
fázových objektivů, pozorování živých (fázových) objektů, Nomarského diferenciální interferenční
kontrast (DIC).

6.           25.10.2012 Samčí gametofyt: Typy pylových zrn, barvení pylových zrn, struktura stěny
pylového zrna, metody určování životaschopnosti pylu, klíčení pylových zrn.

7.           1.11.2012 Histologické techniky: fixace, fixační látky a fixační směsi, jejich
vlastnosti a použití, odvodňování, zalévání do parafínu a do pryskyřice, typy mikrotomů, řezání na
mikrotomu a ultramikrotomu, žehlení a lepení řezů, odparafínování řezů.

8.           8.11.2012 Histologické techniky: Barvení řezů: typy metod (histologické a
histochemické barvení) a barviva užívaná v botanické mikroskopické technice - klasifikace a
příklady použití.

9.           15.11.2012 Fluorescenční mikroskopie: (Olympus BX51), autofluorescence, primární a
sekundární fluorescence (použití např. pro sledování změn vývoje pylu, uspořádání cytoskeletu v
průběhu buněčného cyklu apod.), fluorochromy, imunohistochemie.

10.       22.11.2012 Dokumentace mikroskopických objektů: Kreslení, kreslící přístroje,
mikrofotografie analogová a digitální, mikrokinematografie, videozáznam.

11.       29.11.2012 Měření mikroskopických objektů: mikrometrický okulár, mikrometrobjektivní
měřítko, analýza obrazu.

12.       6.12.2012 Kryostatové techniky: fixace, kryoprotekce, řezání na zmrazovacím mikrotomu,
vybrané histochemické reakce, histochemie enzymů, imunohistochemie.

13.       13.12.2012 Závěrečný test, kontrola protokolů.

14.       20.12.2011 Zápočet


Doporučená literatura

1.       Bózner A. et al.: Cytológia.- Osveta, 1986.

2.       Braune W., Leman A., Taubert H.: Pflanzenanatomisches Praktikum I.,II., Gustav Fischer,
Jena, 1983, 1982.

3.       Erdelská O.: Embryológia krytosemenných rastlín.- Veda, Bratislava, 1981.

4.       Jásik J.: Praktikum z cytológie rastlín.- Skriptum UKom., Bratislava,1995.

5.       Kiernan J.: Histological and histochemical methods. Theory and practise, Pergamon Press,
1979.

6.       Knoz J., Opravilová V.: Základy mikroskopické techniky.- Skriptum MU, Brno, 1992.

7.       Lojda Z. et al.: Enzyme histochemistry. A laboratory manual.- Springer Berlin  etc.,1979.

8.       Němec B. et al.: Botanická mikrotechnika.- ČSAV, Praha, 1962.

9.       Pazourek J.: Pracujeme s mikroskopem.- SNTL Praha, 1961.

10.   Pazourková Z.: Botanická mikrotechnika.- Skriptum UK, Praha, 1986.

11.   Votrubová O.: Anatomie rostlin -Skriptum UK Praha, 1996.

12.   Michalová K. et al.: Vybrané metody studia chromozómů. -  Skriptum UK Praha, 1989.