Téma P10
Jméno _____________________ Všeobecné lékařství Datum ___. 11. 2012 Strana 1/3
Topic P10: Základy klinické mykologie
K nastudování: Houby 
Z jarního semestru: Mikroskopie, kultivace, antibiotická citlivost, precipitace
Tabulka pro hlavní výsledky úkolů 1 až 3 (k postupnému vyplnění):
Kmen K L M N
Gramovo barvení – Úkol 1
Kultivace
(krevní
agar)
Úkol 2a
Velikost
Barva
Tvar
Profil
Hemolýza
Povrch
Zápach
Úkol 2b: Růst na Sabouraudově
agaru s chloramfenikolem (+/–)
Úkol 2c: růst na chromogenní
půdě
KONEČNÝ ZÁVĚR (dle úkolů
číslo 2c a 3)
Úkol 1: Mikroskopie kmenů bakterií a kvasinek
Obarvěte Gramem dané kultury mikroorganismů. Použijte imerzní mikroskopii (imerzní objektiv 100×
zvětšující). Výsledky zapište do tabulky. Povšimněte si velikostních rozdílů mezi kvasinkami a bakteriemi.
Úkol 2: Kultivace bakterií a kvasinek
a) Kultivace na krevním agaru
Popište kolonie daných kmenů na krevním agaru a zapište do hlavní tabulky. Nezapomeňte popsat zápach.
Všimněte si, že kolonie kvasinek (dle výsledků Úkolu 1) jsou podobné některým bakteriím (zejména G+ kokům,
které dle morfologie kolonií asi budou stafylokoky).
b) Kultivace na Sabouraudově agaru s chloramfenikolem
Zhodnoťte nárůst daných kmenů na selektivním agaru pro kvasinky a plísně (Sabouraudův agar
s chloramfenikolem). Sabouraudův agar sám o sobě není selektivní, ale jeho selektivita je zajištěna přídavkem
širokospektrého antibiotika (chloramfenikol).
c) Kultivace na chromogenní půdě
Chromogenní půdy pro kvasinky umožňují rozlišení nejdůležitějších druhů rodu Candida. Pomocí kontrolních
kmenů se pokuste určit druh kandidy pomocí chromogenní půdy. Jsou-li kolonie bílé (není tedy přítomno žádné
barvivo), znamená to, že kmen touto chromogenní půdou nelze určit.
Úkol 3: Biochemická identifikace kvasinek soupravou Auxacolor
Odečtěte výsledek auxacoloru u kmene, který se nepodařilo identifikovat chromogenní půdou. V tomto případě
se nepočítá kód, nýbrž se výsledek porovnává s tabulkou. (Může se stát, že vyjde více taxonů. V tom případě mějte na
paměti, že např. C. albicans by byla v úkolu 2c) zelená a Rhodotorula by na 2b) měla červený pigment.)
C Neg* Glu** Mal** Sac** Gal** Lac** Raf** Ino**
Cel** Tre** Ado** Mel** Xyl** Ara** Act*** Pox#
Výsledek identifikace:
*normálně modré **žluté pozitivní, modré negativní
***žlutá pozitivní, bezbarvá negativní #hnědé pozitivní, bezbarvé negativní
Téma P10
Jméno _____________________ Všeobecné lékařství Datum ___. 11. 2012 Strana 2/3
Úkol 4: Určení citlivosti na antimikrobiální látky
K léčbě mykotických infekcí nelze použít antibiotika. Musíme použít speciální léky – antimykotika. Ta zase na
druhou stranu nejsou účinná u bakteriálních infekcí.
a) Určení citlivosti na antimykotika.
Odečtěte in vitro citlivost daných kmenů na antimykotika. Do tabulky pište jen kmeny, které jsou alespoň na
něco citlivé, ostatní zapište pod tabulku. Do tabulky zapište plný název antimykotika podle kartičky, pro všechny
testované kmeny vyhodnoťte jako citlivé nebo rezistentní. U amfotericinu B je referenční zóna 10 mm. Pro jiná
antimykotika je to 20 mm, zato však není nezbytné, aby uvnitř zóny nebyly přítomny vůbec žádné kolonie.
Kmen 
Antimykotikum
(celé jméno)
zóny (mm) Interpretace zóny (mm) Interpretace
Kmeny ___ a ____ (tj. kmeny bakterií–kvasinek*) jsou rezistentní na všechny preparáty. *nehodící se škrtněte
b) Určení citlivosti na antibiotika.
Odečtěte in vitro citlivost daných kmenů na antibiotika. Do tabulky pište jen kmeny, které jsou alespoň na něco
citlivé, ostatní zapište pod tabulku. Zapište celé názvy antibiotik a změřte velikost zón. Zapište kmeny jako
citlivé (C) resistentní (R) a dubiózní (D). (Dubiózní jsou ty, které mají velikost zóny právě hraniční.)
Kmen 
Antibiotikum
(celé jméno)
zóny (mm) Interpretace zóny (mm) Interpretace
Kmeny ___ a ____ (tj. kmeny bakterií–kvasinek*) jsou rezistentní na všechny preparáty. *nehodící se škrtněte
Úkol 5: Mikroskopie plísní
Plísně jsou zpravidla
mikroskopovány jinak než
kvasinky. Gramovo barvení se
užívá zřídka. Zpravidla se užívá
nativní preparát, zvětšení
objektivu 10 až 40× ( BEZ
IMERZNÍHO OLEJE!).
Zakreslete a popište předložené
druhy plísní. (Jsou-li k dispozici
více než tři druhy, vyberte tři
z nich.) Nezapomeňte popsat hyfy,
makro a mikrokonidie a další
pozorované objekty. Spojte
popisky s objekty linkami nebo
vyznačte jiným vhodným způsobem, co k čemu patří.
Téma P10
Jméno _____________________ Všeobecné lékařství Datum ___. 11. 2012 Strana 3/3
Úkol 6: Kultivace plísní
Plísně zpravidla vyžadují delší čas k růstu.
Z tohoto důvodu pro kultivaci zpravidla
nepoužíváme Petriho misky, protože by
kultury vyschly a kontaminovaly by se.
Zakreslete kultivační výsledky daných
plísní do obrázku vpravo. (Jsou-li plísně
více než tři, vyberte tři z nich.)
Úkol 7: Nepřímá
diagnostika
aspergilózy
Vyhodnoťte
výsledky precipitace
v agaru pro průkaz
protilátek proti
aspergilóze.
Zakreslete výsledek a označte pozitivní a negativní pacienty.
Úkol 8: Odběr na mykózy
Prohlédněte si video „Odběr materiálu na povrchové mykózy“ a zapište hlavní zásady odběru u kožních mykóz.
Pozor! Na příští praktikum se prosím dohodněte, aby v každém praktiku byl alespoň
jeden dobrovolník, který si ráno nevyčistí zuby (bude si je moci vyčistit hned po
příslušném úkolu, trvalé následky na zubech nezůstávají).
nákres
popis