Markéta Štreitová
Bi-OB-MI, 3. ročník
Skupina II., 2009/2010
Cytologie a morfologie bakterií – cvičení
Sklíčkové kultury

Téma:
•1) Vlhké komůrky – kultivace na podložním sklíčku
•
•2) Kultivace na krycím sklíčku
•
•3) Pozorování vzdušného (VM) + substrátového (SM) nebo pouze substrátového mycelia (dle rodu)
nokardioformních aktinomycet
•

Nokardioformní aktinomycety, streptomycety
•vytvářejí charakteristické kolonie
•většinou drsný povrch (Rhodococcus někdy lesklý, zejm. z klinických izolátů), vrásčitý,
• s pigmentací
•při kultivaci v tekutém mediu nutná aerace
•kultury vytvářejí shluky (oproti ostatní druhy bakterií: rovnoměrný růst v tekutém mediu).
•
•Mikroorganismy ze cvičení: Nocardia carnea CCM 2756: SM+VM
•                                             Rhodococcus  erythropolis  CCM 277: SM
•                                                 Streptomyces griseus ssp. griseus CCM 3362: slabé
SM+VM
•
•
•

Princip sklíčkových kultur
•Pozorování mycelia nokardioformních aktinomycet
•Hyfy a rozpadající se vlákna se při přenášení na sklíčko většinou poškodí a nemůžeme je sledovat
v původní podobě nárustu
•Kultivace přímo na krycím sklíčku, přes které později preparát pozorujeme
•  → sledování morfologie vláknitých struktur, pozorování celé kolonie v neporušeném stavu
•Sklíčko je zanořeno do agaru v Petriho misce nebo je umístěno na podložní sklíčko s tenkým
agarovým plátkem
•
•Typy sklíčkových kultur: 1) Vlhké komůrky – kultivace na podložním sklíčku
•                                            2) Kultivace na krycím sklíčku
•
•
•
•
•

Nocardia carnea CCM 2756
D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Podlozni_sklo_400x_bez_imerze\Hezké fotky\Nocardia3.jpg
..
D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Podlozni_sklo_400x_bez_imerze\Hezké fotky\Nocardia6.jpg
Vlhká komůrka, médium M8
zv. 400x
D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Podlozni_sklo_400x_bez_imerze\Hezké fotky\Nocardia4.jpg
Větvené substrátové mycelium
Rozhraní substrátového a vzdušného mycelia
Vzdušné mycelium, zv. 200x
Větvení hyf

Nocardia carnea CCM 2756
D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Kryci_sklo_1000x_imerze\Nocardia_VM_i_SM\sm_i_vm.jpg
Tyčky vzniklé po rozpadu vzdušného mycelia
Kultivace na krycím sklíčku, médium M8
1000x, imerze
Vzdušné mycelium

Vlhká komůrka, médium M12
zv. 400x
Rhodococcus erythropolis  CCM 277
D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Podlozni_sklo_400x_bez_imerze\Hezké fotky\Rhodococcus9.jpg
Silně větvené substrátové mycelium
D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Podlozni_sklo_400x_bez_imerze\Hezké fotky\Rhodococcus9.jpg
Rozpad vláken na rozhraní se slabými vzdušnými hyfami
Fragmenty hyf

Rhodococcus erythropolis  CCM 277
.
Kultivace na krycím sklíčku, médium M12
zv. 1000x, imerze
D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Kryci_sklo_1000x_imerze\Rhodococcus_jen_SM\rhodococcus1.jpg D:\Jeff\škola\3.
ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Kryci_sklo_1000x_imerze\Rhodococcus_jen_SM\rhodococcus1.jpg
Fragmenty vzdušného mycelia

•..
Vlhká komůrka, médium M15
zv. 400x
Streptomyces griseus ssp. griseus CCM 3362
D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Podlozni_sklo_400x_bez_imerze\Hezké fotky\streptomyces17.jpg
Řetízky hyf vzdušného mycelia
Vzdušné mycelium
Substrátové mycelium
D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Podlozni_sklo_400x_bez_imerze\Hezké
fotky\streptomyces_vm_podlozni_sklo_400x.jpg D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie
bakterií\cytologie09-k protokolu\09\5_cviceni\Podlozni_sklo_400x_bez_imerze\Hezké
fotky\2streptomyces_vm_podlozni_sklo_400x_3.jpg
Větvící se hyfy vzdušného mycelia

Streptomyces griseus ssp. griseus CCM 3362
Kultivace na krycím sklíčku, médium M12
zv. 1000x
D:\Jeff\škola\3. ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Kryci_sklo_1000x_imerze\Streptomyces_VM_i_SM\4.jpg D:\Jeff\škola\3.
ročník\Cytologie a morfologie bakterií\cytologie09-k
protokolu\09\5_cviceni\Kryci_sklo_1000x_imerze\Streptomyces_VM_i_SM\3.jpg
Rozpad vzdušného mycelia na krátké tyčky až kokotyčky