Environmentální analytická chemie Analytická chemie životního prostředí Laboratorní cvičení 2013 3. úloha: Stanovení BFR ve vzorku domácího prachu Pomůcky: • vzorek domácího prachu z vysavače • jednorázové extrakční patrony • předčištěná vata Extrakce vzorku prachu automatizovanou Soxhletovou extrakcí, zkoncetrování extraktu Pomůcky: • automatický extraktor Büchi B-811 • extrakční nádobka • teflonové varné úštipky • vialky EPA 20 ml, EPA 40 ml, • jednorázové skleněné Pasteurovy pipety • předvážky • ochranné pracovní prostředky – rukavice, brýle, plášť Chemikálie: • dichlormetan Postup práce: • vzorek domácího prachu (cca 1 g) navažte do jednorázové extrakční patrony • v patroně vzorek přikryjte kouskem předextrahované vaty a zatižte malou skleněnou zátkou • do extrakční nádobky nalijte rozpouštědlo (dichlormethan), cca 150 ml, přidejte teflonový varný úštipek • extrahujte programem č. 1 (40 minut horký Soxhlet, 20 minut prokapávání rozpouštědlem) • po ukončení extrakce zkoncentrujte vzorek programem č. 2 na objem menší než 10 ml • převeďte vzorek do vialky 20 ml, původní extrakční nádobku promyjte pár ml dichlormethanu a přidejte k extraktu ve vialce (min. 2x) • odpařte extrakt pod proudem dusíku na objem cca 1-2 ml Čištění extraktu kolonovou chromatografií Pomůcky: • skleněná kolonka, vnitřní průměr 1 cm • vialka o objemu 40 ml • Pasteurova pipeta, vata • 1,8 ml, skleněný insert 250 μl Chemikálie: • čištěný aktivovaný silikagel (aktivace 12 hod při 150°C) • čištěný neaktivovaný silikagel • silikagel modifikovaný kyselinou sírovou (22 ml koncentr. H2SO4 + 50 g aktivovaného silikagelu) • silikagel modifikovaný KOH, bude připravený předem (rozpustit 56 g KOH v 300 ml methanolu v baňce s plochým dnem o objemu 750-500 ml, přidejte míchací tyčinku a na magnetické míchačce míchejte 1-2 hod při 60-70°C, dekantujte, propláchnětě 2x 100 ml methanolu, 1x 100 ml dichlormethanu, usuště v digestoři, rozprostřený na Al folii, poté aktivujte při 200°C po 8 hod) • hexan, dichlormetan Postup práce: • připravte kolonku k separaci : o na dno kolonky vložte smotek vaty o nad něj nasypte asi 1 cm vysoký sloupec čištěného aktivovaného silikagelu a nad tuto vrstvu 2 g KOH silikagelu, poté vrstvu 1 cm aktivovaného silikagelu a na něj vrstvu 3 g čištěného aktivovaného silikagelu modifikovaného kyselinou sírovou, tyčinkou mírně sklepejte o na vrchol sloupce nasypte 1-2 cm vrstvu neaktivovaného silikagelu a opět sklepejte • aplikujte vzorek na kolonu, promyjte původní vialku alespoň 2x 1 ml dichlormethanu, přidejte ke vzorku v koloně • proveďte eluci 40 ml 50% dichlormetanu v hexanu do 40 ml vialky • vzorek zahustěte pod mírným proudem dusíku na cca 100 μl • vzorek převeďte do předem označené vialky s insertem o objemu 250 μl, odpařte na finální objem 40 μl • přidejte 10 μl vnitřního standardu 13C BDE • vialku pečlivě uzavřete a uschovejte v ledničče až do provedení analýzy Stanovení BFR plynovou chromatografií a vyhodnocení GC chromatogramu . Pomůcky: • Plynový chromatograf s vysokorozlišovací hmotnostní detekcí • Přečištěný extrakt vzorku v minivialce