Sylabus botanické mikrotechniky Bi1301

                                 0/2 (J. Dubová)       podzim 2013

1.          19.9.2013 Úvod do praktika: náplň cvičení, doporučená literatura, organizace,
bezpečnost práce. Vývoj stavby mikroskopů (Janssenovi, Galileo, Anthonj van Leeuwenhoek, Zeiss,
Reichert, Laboval 3, Biolar, Meopta Bi, Olympus CX31, Olympus BX-51), Köhlerův princip, Abbeův
kondenzor, pankratický kondenzor, desatero světelné mikroskopie.

2.          26.9.2013 Metody studia neprůhledných objektů: mikroskopie v dopadajícím světle,
mikroreliéfová metoda pro studium stavby krycích pletiv (epidermální buňky, svěrací buňky průduchů,
vedlejší buňky, klasifikace průduchů podle různých kritérií, trichomy).

3.          3.10.2013 Metody projasňování rostlinného materiálu a jejich aplikace v rostlinné
embryologii (vývoj samičího gametofytu a embrya) nebo při studiu vývoje cévních svazků ve vývojové
biologii, šikmé osvětlení, rozlišovací schopnost, numerická apertura.

4.          10.10.2013 Rychlé cytologické metody: Roztlaky a roztěry, typy barviv pro jaderné
barvení roztlakových preparátů (acetokarmín, laktopropionový orcein), kořenová čepička,
předpůsobení pro karyologická studia (mitotické jedy).

5.          17.10.2013 Interferenční kontrasty: fázový kontrast, stavba fázového kondenzoru a
fázových objektivů, pozorování živých (fázových) objektů, Nomarského diferenciální interferenční
kontrast (DIC).

6.          24.10.2013 Samčí gametofyt: Typy pylových zrn, barvení pylových zrn, struktura stěny
pylového zrna, metody určování životaschopnosti pylu, klíčení pylových zrn.

7.          31.10.2013 Histologické techniky: fixace, fixační látky a fixační směsi, jejich
vlastnosti a použití, odvodňování, zalévání do parafínu a do pryskyřice, typy mikrotomů, krájení na
mikrotomu a ultramikrotomu, žehlení a lepení řezů, odparafínování řezů.

8.          7.11.2013 Histologické techniky: Barvení řezů: typy metod (histologické a histochemické
barvení) a barviva užívaná v botanické mikroskopické technice - klasifikace a příklady použití.

9.          14.11.2013 Dokumentace mikroskopických objektů: Kreslení, kreslící přístroje,
mikrofotografie analogová a digitální, mikrokinematografie, videozáznam.

10.       21.11.2013 Měření a počítání mikroskopických objektů: mikrometrický okulár,
mikrometrobjektivní měřítko, programy analýzy obrazu.

11.      28.11.2013 Fluorescenční mikroskopie: (Olympus BX51), autofluorescence, primární a
sekundární fluorescence (použití např. pro sledování změn vývoje pylu, uspořádání cytoskeletu v
průběhu buněčného cyklu apod.), fluorochromy, imunohistochemie, GMO – GFP (použití pro sledování
exprese genů).

12.      6.12.2013 Závěrečný test, kontrola protokolů, zápočet.


Doporučená literatura

1.      Bózner A. et al.: Cytológia.- Osveta, 1986.

2.      Braune W., Leman A., Taubert H.: Pflanzenanatomisches Praktikum I.,II., Gustav Fischer,
Jena, 1983, 1982.

3.      Erdelská O.: Embryológia krytosemenných rastlín.- Veda, Bratislava, 1981.

4.      Jásik J.: Praktikum z cytológie rastlín.- Skriptum UKom., Bratislava,1995.

5.      Kiernan J.: Histological and histochemical methods. Theory and practise, Pergamon Press,
1979.

6.      Knoz J., Opravilová V.: Základy mikroskopické techniky.- Skriptum MU, Brno, 1992.

7.      Lojda Z. et al.: Enzyme histochemistry. A laboratory manual.- Springer Berlin  etc.,1979.

8.      Němec B. et al.: Botanická mikrotechnika.- ČSAV, Praha, 1962.

9.      Pazourek J.: Pracujeme s mikroskopem.- SNTL Praha, 1961.

10.  Pazourková Z.: Botanická mikrotechnika.- Skriptum UK, Praha, 1986.

11.  Votrubová O.: Anatomie rostlin -Skriptum UK Praha, 1996.

12.  Michalová K. et al.: Vybrané metody studia chromozómů. -  Skriptum UK Praha, 1989.

13.  Wedzony M.: Mikroskopia fluorescencyjna dla botanikow. – PAN, Krakov, 1996.

14.  Pluta M.: Mikroskopia optyczna. – PWN, Varšava, 1982.