Cvičení 1

                                         Detekce bakterií

                                         Počítání bakterií

                                             Preparáty

                                              LUCIA G

                                             Makrofoto



Makroskopické znaky

-         Morfologie kolonií

-         Makrofoto

-         Rozeznání kontaminace

-         Očkování křížového roztěru čisté a smíšené kultury


Mikroskopické techniky a preparáty

1)     Techniky – fázový Nomarského kontrast, jasné pole

2)     Preparáty – Negativní barvení, Gramovo – čistá a smíšená kultura


Preparáty

– zviditelnění buňky, pomoc při identifikaci – morfologie buňky a typ buněčné stěny (Gram,
acidorezistence, Giemsa..), sporulace…


a) Mikroskopie v jasném poli (barvené preparáty – nejčastěji Gramovo a negativní barvení)


b) Morfologie buňky  a shluků, porovnávání velikosti buněk (prokaryota X eukaryota; bacily mezi
sebou)


Použité bakteriální kmeny – od každého jedna miska:


I)                   V rámci jednoho rodu,

a)      G+ tyčky různé tvary, bacily 48h kultivace se sporami:


Bacillus thuringiensis CCM 19  (G+ tyčky)

Bacillus sphaericus CCM 1615 (G+ tyčky)

Bacillus mycoides CCM 145 (G+ tyčky)

Bacillus cereus CCM 2010 (G+ tyčky)

Bacillus megaterium CCM 2007 (G+ tyčky)

Bacillus subtilis CCM 2216 (G+ tyčky)

Lactobacillus curvatus CCM 7558T – zakřivené

Lactobacillus rhamnosus CCM 1825T – typické tyčky

Lactobacillus casei subsp. casei CCM 7088T - zakřivené

Lactobacillus brevis CCM 3805T – krátké tyčky

Lactobacillus delbrueckii ssp.delbrueckii

b)      pokud bacilární – hledáme spory, fázový kontrast



II) větvení buněk

Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCM 7190T – pro tento pokus se bude kultivovat ve
vysokém sloupci M6 media – lze pozorovat větvení

Streptomyces griseus ssp. griseus CCM 2386 – vlákna, G+

Nocardia carnea CCM 2756 – krátká rozpadavá vlákna

III) Archaea:

Haloarcula hispanica CCM 3601T

Haloferax mediterranei CCM 3361T


IV) eukaryota

Saccharomyces cerevisiae – kvasinka, eukaryotní buňka, pro fázový kontrast

Yarrowia lipolytica


V) G- tyčky

Serratia marcescens CCM 303(G- tyčka)

Escherichia coli CCM 3954


VI) G+ koky nebo krátké tyčky

Azotobacter vinelandii CCM 289 (slizovité kolonie, pouzdra)

Leuconostoc mesenteroides CCM 1803 (slizovité kolonie, pouzdra)

Sporosarcina ureae CCM 860 – G+ tetrády

Micrococcus luteus CCM 169 -  G+ koky














Všímáme si: tvar buněk, vyklenutí (způsobeno sporami?? vyklenují centrálně  či terminálně?) poměru
šířky a délky buněk


Co ovlivňuje vzhled buněk v preparátu:  stáří kultury?? živná půda?? zvětšení??