‹#› 1 BIOCHEMIE II - SEMINÁŘ Mgr. Pavel Bouchal, Ph.D. Ústav biochemie PřF MU e-mail: bouchal@chemi.muni.cz Tel. 54949 3251, 3252 Kamenice 5, budova A5, místnost 208, 212 Konzultace: po dohodě ‹#› 2 1.Úvod: Přehled aerobního metabolismu 2.Metabolismus bílkovin a aminokyselin, močovinový cyklus a metabolismus dusíku. Biosyntéza aminokyselin. 3.Nukleové kyseliny II: Replikace, transkripce, translace a proteosyntéza. Základy molekulární biologie 4.Test 1 5.Metabolismus a biosyntéza sacharidů: Glykolýza, glukoneogeneze, Coriho cyklus, pentosový cyklus 6.Metabolismus a biosyntéza lipidů: b-oxidace a biosyntéza mastných kyselin, fosfolipasy 7.Test 2 8.Citrátový cyklus 9.Respirační řetězec 10.Fotosyntéza 11.Bioenergetika redoxních reakcí 12.Test 3 •Opravné termíny zápočtu 1. PROGRAM SEMINÁŘE ‹#› 3 –Skripta Seminar 2.rtf Skripta Cvičení z biochemie, V. Mikeš –(IS: Studijní materiály/Učební materiály) –Biochemie II – seminář www.ppt LITERATURA •Účast ve výuce: max. 1 neomluvená absence (více absencí: jen nemoc – lékařské potvrzení, řeší se individuálně) •Testy (3), min. 50% z celkového počtu bodů => zápočet v řádném termínu •Souhrnný test z učiva celého semestru => zápočet v 1. (2.) opravném termínu PODMÍNKY ZÍSKÁNÍ ZÁPOČTU metabolismus souhrn PŘEHLED AEROBNÍHO METABOLISMU 3 ‹#› 5 NAD ‹#› 6 FAD cAMP Biochemie II-seminář Metabolismus bílkovin a aminokyselin met aa1 METABOLISMUS AMINOKYSELIN 15 Biochemie II-seminář Metabolismus bílkovin a aminokyselin met aa METABOLISMUS AMINOKYSELIN (II) 16 moccykl MOČOVINOVÝ CYKLUS 17 ‹#› 11 PRIMÁRNÍ STRUKTURA NUKLEOVÝCH KYSELIN NK primstr1 NK primstr2 G ‹#› 12 •Provede se štěpení před: •G (DMS/DT) •G+A (H+/DT) •C (hydrazin, 5M NaCl) •C+T (hydrazin) • •Příklad: • 5´ 3´ •32P-TGTAGGAGCT • •Štěpení před G (DMS/DT) vede ke vzniku fragmentů: •32P-TGTAGGAGCT •32P-TGTAGGAGCT •32P-TGTAGGAGCT •32P-TGTAGGAGCT • •K jiným souborům fragmentů povedou štěpení před G+A, před C a před C+T. • • • • • MAXAM-GILBERTOVA METODA SEKVENOVÁNÍ NUKLEOVÝCH KYSELIN ‹#› 13 MAXAM-GILBERTOVA METODA SEKVENOVÁNÍ NUKLEOVÝCH KYSELIN DETEKCE FRAGMENTŮ SEPAROVANÝCH ELEKTROFORÉZOU NA FOSFOIMAGERU (detekce radioaktivity - vizualizovány jsou pouze 32P značené fragmenty) G+A G C+T C ________________________________ start ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ ____ Biochemie II-seminář ‹#› Biochemie nukleových kyselin 14 umax29 Biochemie II-seminář ‹#› Biochemie nukleových kyselin 15 umax30 Biochemie II-seminář Biochemie nukleových kyselin GENETICKÝ KÓD mRNA U PROKARYOT Biochemie II-seminář Metabolismus a biosyntéza sacharidů glykolýza souhrn GLYKOLÝZA – VARIANTY A BILANCE 4 Biochemie II-seminář Metabolismus a biosyntéza sacharidů hexokinasa glukosa-6-fosfát fruktosa-6-fosfát fruktosa-1,6-bisfosfát dihydroxyaceton- fosfát glyceraldehyd- fosfát 1,3-bisfosfoglycerát 3-fosfoglycerát 2-fosfoglycerát pyruvát fosfoenolpyruvát C2H5OH + CO2 CO2 + H2O + ATP fosfofruktokinasa aldolasa # glyceraldehydfosfátdehydrogenasa fosfoglycerátkinasa fosfoglycerátmutasa enolasa pyruvátkinasa glukosafosfát isomerasa anaerobní glykolýza, mléčné kvašení aerobní oxidace laktát DH GLYKOLÝZA – PRŮBĚH anaerobní alkoholové kvašení #=triosafosfátisomerasa 5 Biochemie II-seminář Metabolismus a biosyntéza sacharidů glyko vs glukoneo GLYKOLÝZA vs. GLUKONEOGENEZE 6 Biochemie II-seminář Metabolismus a biosyntéza sacharidů Coriho CORIHO CYKLUS 7 pentosovy PENTOSOVÝ CYKLUS 8 CH3-CO-COO- pyruvát CoA + NAD+ CO2 + NADH oxidační dekarboxylace citrát- synthasa akonitasa isocitrát DH α-oxoglutarát DH sukcinyl CoA synthetasa sukcinát DH fumarát DH malát DH pyruvát DH KREBSŮV CYKLUS 9 ‹#› 23 GLYOXYLÁTOVÁ DRÁHA glyoxylat_dr Biochemie II-seminář Metabolismus a biosyntéza lipidů cholesterol ŽLUČOVÉ KYSELINY A CHOLESTEROL zluc kys 10 Biochemie II-seminář Metabolismus a biosyntéza lipidů betaoxidace β-OXIDACE MASTNÝCH KYSELIN 11 Biochemie II-seminář Metabolismus a biosyntéza lipidů biosynt mk BIOSYNTÉZA MASTNÝCH KYSELIN 12 Biochemie II-seminář Metabolismus a biosyntéza lipidů betaox vs biosynt mk ROZDÍLY MEZI β-OXIDACÍ A BIOSYNTÉZOU MASTNÝCH KYSELIN 13 Biochemie II-seminář Metabolismus a biosyntéza lipidů fosfolipasy ŠTĚPĚNÍ FOSFOLIPIDŮ: FOSFOLIPASY 14 Biochemie II-seminář Respirační řetězec mal asp kyv TRANSPORT ELEKTRONŮ DO MITOCHONDRIÁLNÍ MATRIX Biochemie II-seminář Respirační řetězec resp řet3 Tvorba ATP probíhá za katalýzy ATPasy díky gradientu [H+], vytvořenému komplexy I,IV a CoQ RESPIRAČNÍ ŘETĚZEC 18 Biochemie II-seminář Respirační řetězec resp řet2 RESPIRAČNÍ ŘETĚZEC 19 Biochemie II-seminář Respirační řetězec resp řet4 RESPIRAČNÍ ŘETĚZEC 20 Biochemie II-seminář Respirační řetězec ATPasa H+ RESPIRAČNÍ ŘETĚZEC – TVORBA ATP ADP + Pi ATP 21 Biochemie II-seminář Fotosyntéza fotosynt1 FOTOSYNTÉZA: 1. SVĚTELNÁ FÁZE PS 680 PS 680* PS 700 PS 700* chloroplast 22 Biochemie II-seminář Fotosyntéza Calvinuv FOTOSYNTÉZA: 2. TEMNOSTNÍ FÁZE= CALVINŮV CYKLUS (tvorba glukosy) (->glukosa…) 23