1
Časový plán
Pokročilé biofyzikální přístupy v experimentální biologii
Úterý Středa Čtvrtek
Úvod
organizace kurzu
Fluorescenční mikroskopie
přednáška
Anisotropie fluorescence
přednáška
9-13
1.Měření spektrálních charakteristik
proteinů a DNA návod
Skupina A
Nanophotemeter
2.Stanovení koncentrace proteinů
Bradfordové metodou návod
Skupina B
Spektrofotometr
záměna skupin A a B na stanovištích 1 a 2
5. Příprava mikroskopických
preparátů pro lokalizaci buněčných
organel in vitro a v živých buňkách
(každá dvojice připraví vlastní
preparát)
návod
6. Sledování připravených preparátů
v živých buňkách za použití
fluorescenční mikroskopie
Skupina A, B
9. Příprava fluorescenčně
značeného proteinu
Skupiny A, B společně
návod
10. Předvedení měření anizotropie
fluorescence
Skupiny A, B společně
oběd záměna skupin záměna skupin záměna skupin
14-17
3. Vliv pH a teploty na spektrální
vlastnosti fluorescenčních sond návod
Skupina C (3 účastníci)
Fluorimetr Fmax4
4. Fluorescenční stanovení
koncentrace DNA návod
Skupina D (3 účastníci)
SpectroVis
záměna skupin C a D na stanovištích 3 a 4
7. Měření vlastní fluorescence
aminokyselin a proteinů
Skupina C
návod
8. Stanovení koncentrace
DNA a proteinu za použití
komerčně dostupných kitů
návod
Skupina D
Záměna skupin C a D na stanovištích 11 a 12
11. Vizualizace makromolekul při
horizontální elektroforetické
separaci (EMSA)
návod
12. Agarosová elektroforéza
sledovaná v reálném čase
13. Demonstrace funkce a
experimentálního využití
fluorescenčního skeneru
Skupiny C, D společně