Serologie Aglutinace na nosičích Odečtěte výsledek TPHA (Treponema pallidum hemaglutinačního testu, anglicky někdy též MHA-TP = Microhaemagglutination assay for Treponema pallidum), v němž treponemový antigen povléká erytrocyty a reaguje s protilátkami. Test se používá jako screeningový v diagnostice syfilis. V tomto testu se sérum netitruje a výsledek se stanovuje semikvantitativně na „1 až 3 křížky“. Zakreslete vzhled reakce s různým stupněm pozitivity a negativity. Poté zapište, jsou-li některá séra pozitivní. Pozitivní jsou séra č. Schematická analýza KFR včetně testování antikomplementarity V následujících schématech rozhodněte, ve kterých případech zůstává po první fázi volný komplement (zakroužkujte co platí, škrtněte, co neplatí) a připojte slovní popis výsledku (hemolýza, sedimentace erytrocytů). LAB Ag = laboratorní antigen PATIENT Ig = pacientova protilátka C = komplement Ery = beraní erytrocyt Amb = amboceptor (králičí protilátky proti beraním erytrocytům) ANTICOMPLEMENT = složka způsobující antikomplementaritu séra Popis situace 1. fáze Komplement po 1. fázi 2. fáze Výsledek Popis výsledku Průběh pozitivní KFR volný vázaný Průběh negativní KFR volný vázaný Test antikomplementarity, sérum je antikomplementární volný vázaný* *či zničený Test antikomplementarity, sérum je v pořádku volný vázaný* *či zničený Stanovení komplementfixačních protilátek proti nejčastějším původcům respiračních nákaz, sledování dynamiky protilátek Odečtěte titry KFR u jednotlivých pacientů. Věnujte pozornost kontrolám antikomplementarity séra v prvním důlku. Vlastní KFR začíná od druhého důlku a počáteční ředění je 1:5 s koeficientem 2. Výsledek zakreslete, zapište titr a pokuste se o interpretaci nálezu. Od každého pacienta byly získány dva vzorky (tzv. párové): první odběr proběhl v době akutních příznaků, druhý v rekonvalescenci. První vzorek byl uchován v mrazničce a oba pak byly vyšetřeny paralelně. Sledujte data odběrů – tam, kde se ve zhruba dvoutýdenním časovém odstupu podaří prokázat alespoň čtyřnásobný vzestup titru protilátek, svědčí to pro právě proběhlé akutní onemocnění. ASLO – průkaz antistreptolyzinu Princip: Protilátky brání hemolyzinu (streptolyzin O – antigen) hemolyzovat králičí erytrocyty. Hladina ASLO se zvyšuje po nákazách vyvolaných beta-hemolytickými streptokoky skupiny A (méně často i jiných). Riziko pozdních následků streptokokových nákaz se projeví zvýšením ASLO nad 200 m.j. (mezinárodních jednotek). Na sérologické destičce odečtěte stanovení hladiny ASLO u kontrolního séra a u pacientů. ELISA k průkazu protilátek proti Toxoplasma gondii v séru Průkaz protilátek v třídách IgG, IgM a IgA Při průkazu protilátek zpravidla určujeme přítomnost protilátek třídy IgM (typické u čerstvé infekce) a IgG. Nicméně v některých případech prokazujeme protilátky třídy IgA pro ověření slizniční imunity. U daného typu reakce ELISA počítáme cut off jako průměr negativních kontrol (v důlcích C1 a D1 pro IgG, v důlcích C3 a D3 pro IgG a C5 a D5 pro IgA). Všechny hodnoty absorbance vyšší než 110 % hodnoty cut off (tzv. index pozitivity > 1,1) se považují za pozitivní, všechny hodnoty nižší než 90 % hodnoty cut off (tzv. index pozitivity < 0,9) se považují za negativní. Hodnoty mezi 90 % a 110 % cut off se považují za hraniční. Odečtěte reakci ELISA k průkazu IgG, IgM a IgA protilátek proti Toxoplasma gondii ze séra. Vyhodnoťte pozitivitu / negativitu všech 8 pacientů. Porovnejte s pracovním listem, který vám bude prezentovat učitel. Povšimněte si také výsledků KFR (ta byla provedena paralelně). Doplňte popisky ke schematickému průběhu reakce. U substrátu zapište „substrát – mění barvu“ nebo „substrát – nemění barvu“. Vybarvěte také červeně složku získanou od pacienta (u negativní reakce bude tato složka samozřejmě chybět). IgG Cut off = (C1 + D1) / 2 Cut off = ______________ Pozitivní pacienti: IgM Cut off = (C3 + D3) / 2 Cut off = ______________ Pozitivní pacienti: IgA Cut off = (C5 + D5) / 2 Cut off = ______________ Pozitivní pacienti: