Další gramnegativní
koky a tyčinky
P06
Neisserie
 Aerobní G- koky ve dvojicích (tvar
kávového zrna), intracelulární, růstově
náročné
 Nevyskytují se ve volné přírodě, ale na
sliznicích respiračního a genitálního traktu
lidí
 Původce kapavky, člověk je jediným hostitelem
 Citlivý na světlo a chlad, na vyschnutí
 Přenos pouze přímým kontaktem (pohlavním
stykem)
 Kapavka se projevuje jako zánět uretry, u žen
také cervixu;
popř. perinatální přenos (novorozenecká
keratokonjunktivitida)
 Projevuje se hnisavým výtokem, u žen často
asymptomatická
Neiserria gonorrhoeae (gonokok)
Gonokoky
-rostou jen na
čokoládovém agaru
-Intraleukocytární
koky
Neisseria meningitidis
 Meningokok
 13 séroskupin (podle
polysacharidu pouzdra),
u nás nejčastěji A,B,C
 Přenos kapénkovou cestouinfekce
faryngu, odtud se šíří hematogenně. Od
nosičství až po smrtelné meningitidy a septický
šok
 Týká se tzv. klonálních kmenů.
 Jiné kmeny jsou ale docela nevinné a udává se, že
asi deset procent populace má meningokoka v
krku.
Invazivní meningokoková onemocnění
(Meningokoková meningitida, sepse)
 K invazivní infekci dojde pouze pokud je kmen vysoce
virulentní (specifické klony mikroba) a hostitelský
organismus je vnímavý
 Meningokok se přenáší těsným kontaktem. Invazivní
infekci napomáhá narušení sliznice, např. i kouřením
či předchozí virovou infekcí.
 Infekce propukne často tehdy,
když je tělo oslabeno neúměrnou
fyzickou námahou po předchozí
inaktivitě
Meningokoková meningitida je
celosvětově velmi závažnou nákazou
„Meningitis belt“, kde se hodně vyskytuje
meningokoková meningitis
Neisserie-rozdělení
In vivo In vitro
Gonokok Nejchoulostivější,
přenos jen
sexuální
Nejchoulostivější,
roste jen na
čokoládovém agaru
Meningokok Méně choulostivý,
přenos na krátké
vzdálenosti i
kapénkami
Méně choulostivý, jeli
krevní agar
obohacen, může na
něm růst
Tzv. „ústní“
neisserie
Nejméně
choulostivé
Roste i na chudém
krevním agaru
Moraxella (Branhamella) catarrhalis
• Gramnegativní koky, dvojice
• Tento organismus bývá přítomen u zdravých
osob v malém množství ve faryngu
• V čisté kultuře způsobuje sinusitidy, otitis
media, faryngitidy a podobně.
• Její původní jméno Branhamella je odvozeno od
Sáry Branhamové, jedné z prvních žen-
badatelek.
Moraxella catarrhalis
http://www.medicine.uiowa.edu
http://www.uni-ulm.de
„Další gramnegativní bakterie“
 Není to žádná skupina, natož čeleď. Jsou to
ale všechno poměrně vzácnější bakterie,
zpravidla nerostoucí na Endově agaru,
některé z nich rostoucí na agaru krevním, a
způsobující různé nemoci.
 Legionella, Bordetella, Brucella a
Francisella
Legionella pneumophila
● G- štíhlé tyčinky
● V teplých vodách (parazité améb)- 30 – 40 °C
● Bakterie má často rezervoár ve vodovodech,
klimatizaci, vodotrysky atd.
● Inhalační cestou se dostává do těla. Nebezpečí pro
pacienty se sníženou imunitou, seniory
● Legionářská nemoc je těžší variantou nemoci (horečka,
průjem, slabost, bolesti hlavy, na hrudi, neproduktivní
kašel)
● Existuje ještě mírnější varianta, Pontiacká horečka (bez
postižení plic)
Rod Bordetella
 B. pertussis a B. parapertussis
jsou lidské patogeny, způsobují
černý kašel
 Černý kašel je vzácný díky
očkování (katarální, paroxysmální a
rekonvalescenční stádium)
 B. bronchiseptica zřídka způsobuje různé
patologické stavy u člověka
a (primárně) u zvířat
http://www.dsf.health.state.pa.us
Rod Brucella
 Je to původce zoonóz,
přenosné i na člověka
 Brucella abortus je kraví
patogen, způsobujíc potraty skotu. U lidí
způsobuje Bangovu nemoc (horečka,
orgánová postižení atd.)
 Dalšími brucelami jsou Brucella suis z prasat,
Brucella mellitensis z ovcí a koz a Brucella
canis ze psů
Rod Francisella
 Nejdůležitějším druhem je F. tularensis
 Způsobuje tularemii – „zaječí mor“
 Cirkuluje v přírodě mezi vnímavými
hlodavci, rezervoárem a přenašeči jsou klíšťata
 Různé způsoby infekce člověka (podle typu
přenosu)
 Tento organismus může napadat rány, ale také je
možné jej vdechnout, což vede k zápalům plic,
transmisivně (klíšťaty) či kontaminovanou
vodou
microbes.historique.net
www.infektionsnetz.at
http://www.antropozoonosi.it (4×)
Neisserie a moraxely – diferenciální
diagnostika I.
 Gramovo barvení: G – (diplo)koky (intracelulární)
 Oxidáza: pozitivní
 Růst na různých půdách rozliší
 gonokoky (rostou jen na čokoládovém agaru),
 meningokoky (rostou na bohatších krevních, ale
samozřejmě i na čokoládových agarech)
 ústní neisserie (rostou na chudém i bohatém
krevním agaru i na čokoládovém agaru)
 M. catarrhalis (růst jako u ústních neisserií)
Neisserie a moraxely – diferenciální
diagnostika II.
 INAC test (proužkový test podobný
oxidázovému) – pozitivní u Moraxella
catarrhalis
 Komplexní biochemický test
(NEISSERIAtest) se používá hlavně
k vzájemnému rozlišení ústních neisserií
 Antigenní analýza (určení seroskupiny
meningokoků u invazivních infekcí)
„Další G- bakterie“ – charakteristika
 Mikroskopie: G – tyčinky, často krátké
 Kultivace: zpravidla speciální půdy (BG pro bordetely,
BCYE pro legionely atd).
 Biochemická identifikace: některé znaky mohou být
využity
 Antigenní analýza: někdy užitečná
 Nepřímé metody se využívají, nejspíš u tularémie
 Diferenciální diagnostika tu neprobíhá algoritmicky.
Zpravidla jsou vzorky zasílány na vyšetření přímo s
podezřením na legionelózu, dávivý kašel, Bangovu
chorobu apod.
Úkol 1a: Prohlédnutí nátěrů
kapavky
Všimněte si
gramnegativních
diplokoků tvaru
kávového zrna, zejména
intracelulárních.
Intracelulární uložení je
jejich typickou vlastností.
Poněkud se liší vzhled preparátů
od muže a od ženy


www.medmicro.info
Úkol 1b: barvení kultur podle
Grama
 Kmeny máte obarvené, nemusíte je barvit.
Sklíčka po prohlédnutí nevyhazujte, nechte je
pro další skupiny.
 Máte kmeny K, L, M, N, P. Jeden z nich není
G – kok: který to je?
Úkol 2: Kultivace
 Popište kolonie
gramnegativních koků
na různých půdách, a
hlavně si všimněte, jestli
tam vůbec rostou.
 „chudý“ KA, „bohatý“ KA
a čokoládový agar
www.schoolwork.de
Foto O. Z.
Úkoly 3: Základní biochemické
testy
 Rychlé testy s diagnostickými proužky velmi
usnadňují diagnostiku
 Neisserie jsou oxidáza pozitivní, moraxely také,
ale mohou mít opožděnou reakci
 Moraxely se poznají podle pozitivního INAC
testu U INAC testu se postupuje jako u oxidázy,
ale proužek je nutno zvlhčit a je nutno pět minut
počkat. Zbarvení je modrozelené.
Úkol 4 – druhové určení
neisserií
 K druhovému určení neisserií se používají
biochemické testy, u nás zpravidla NEISSERIAtest
 Poměrně málo biochemicky aktivní jsou obě
patogenní neisserie: gonokok štěpí jen glukózu,
meningokok jen glukózu a maltózu.
Úkol 5 – testy antibiotické
citlivosti
 Antibiotická citlivost se u patogenních neisserií
určuje na půdách, na kterých jsou schopny
růst, tj. nikoli na MH agaru
 Lékem volby u meningokoka je stále klasický
penicilin. Ten se osvědčuje i u gonokoka.
Nicméně rezistence nejsou vyloučeny! Další
možností jsou makrolidy, chinolony či
ceftriaxon.
Tabulka zón citlivosti – MEN
Antibiotikum Zkratka Referenční zóna
Penicilin P S ≥ 47 R < 26
Cefuroxim CXM S ≥ 31 R < 25
Azithromycin AZM S ≥ 25 R < 25
Tetracyklin TE S ≥ 38 R < 30
Cefotaxim CTX S ≥ 31 R < 31
Ciprofloxacin CIP S ≥ 41 R < 28
Úkol 6 – antigenní analýza
 Prohlédněte si na bočním stole umístěnou
soupravu na aglutinaci mozkomíšního moku
a zapište, které patogeny je schopna zachytit.
U meningokoků si povšimněte, které seroskupiny
odhalí.
Antigeny detekované při
antigenní analýze likvoru
 Neisseria meningitidis A
 Neisseria meningitidis B teenageři, batolata
 Neisseria meningitidis C
 N. meningitidis Y/W135
 Haemophilus influenzae b batolata (dříve)
 Streptococcus pneumoniae senioři
 Streptococcus agalactiae novorozenci
Zeleně vždy uvedena věková skupina, u které je
daná infekce nejtypičtější
Úkol 7: Diagnostika bordetel,
brucel, legionel a francisel
 K jejich diagnostice se používají speciální
půdy nebo nepřímá diagnostika (průkaz
protilátek)
 Různorodé úkoly 7a až 7d jsou věnovány
každý jednomu z rodů.
7a – Postup očkování na BG agar
Tento zvláštní
způsob se používá
proto, že
zkušenost ukázala,
že zvyšuje záchyt
bordetel.
1) Naočkování
středového pole do
kapky penicilinu
2) Spirála směrem
k.okraji
3) Radiální paprsky
7b – BCYE agar pro legionelly
http://medecinepharmacie.univ-fcomte.fr
Buffered
Charcoal
Yeast
Extract
7c Diagnostika rodu Francisella:
Odečítání titru
 Spočítá se titr, tedy
nejvyšší ředění
s pozitivní reakcí
www.medmicro.info
1:10 1:20 atd.
Jakýkoli titr (tj. všechny
případy, kde je nějaký titr)
považujte za pozitivní!
K+
1
2
3
7d Diagnostika protilátek proti
brucelóze
 Diagnostika Bangovy choroby byla
provedena nepřímým průkazem
 ELISA ve třídách IgG i IgM
 Zapište výsledky do tabulky a vymyslete u
každého pacienta konečný závěr