‹#› 1 Cytologie a morfologie bakterií 1.cvičení Jméno: Jakub Hrdý Obor: Obecná biologie Ročník: 3 Datum: 11.,12. 10.2012 Počet stran: 15 Použité zvětšení: 1000x MP7 42-19879495 ‹#› 2 Makrofotografie makroskopické znaky kolonií •Saccharomyces cerevisiae •sektorový tvar •vzhled je těstovitý, krémový, bílý až nažloutlý vroubkovaný okraj •drsný povrch •neprůsvitné •charakteristický zápach •zvětšení: 10x (lupa) DSCN2768 ‹#› 3 Makrofotografie makroskopické znaky kolonií •Lactobacillus casei CCM 7088T •nejsou pozorovatelné jednotlivé kolonie •vzhled – bílý, mléčný,matný, nepravidelný • • • •Streptococcus mutans CCM 7409T -drobné kolonie -na krevním agaru bílý lesklý • nárůst -v tekutém médiu vytváří bílý neprůhledný sediment •zvětšení: 10x (lupa) - • • DSCN2750 Serratia marcescens CCM 303 •okrouhlý tvar, matný hladký povrch •sektorový (vroub.) okraj •knoflíkovitý profil •kašovitá konzistence •kulová transparence •mléčně bílé kolonie s červenými středy • ‹#› 4 Makrofotografie makroskopické znaky kolonií •Bacillus megaterium CCM 2007 •kruhový tvar •hladký okraj •zvýšený profil •hladké, matné, bílé mléčné barvy, neprůsvitné •typický zápach •zvětšení: 10x (lupa) • DSCN2794 ‹#› 5 Preparáty - barvení •Saccharomyces cerevisiae s_cerevisiae_pr 1)Gramovo barvení Použití Gramova barvení na kvasinky je sporné, jelikož se nejedná o bakteriální resp. prokaryotické organismy (odlišné složení stěny), a tak těžko rozlišit, zda jsou G- či G+ (barví se á „pozitivně“) Na druhém snímku lze pozorovat typické pučení s_cerevisiae_puceniii_pr ‹#› 6 Preparáty •Saccharomyces cerevisiae 2) Negativní barvení Stejně jako u Gramova barvení lze opět pozorovat poněkud větší (oproti ostatním pozorovaným bakteriím a archeím) oválné buňky eukaryotního organismu s_cerevisie_pr s_cerevisie_ii_pr ‹#› 7 Preparáty •Streptococcus mutans CCM 7409T • 1) Gramovo barvení – jedná se o G+ kok, řetízky Krevní agar Tekuté médium (kontaminace) streptococcus_mutans_krev_pr steptococcus_mutans_kontaminace_ii_pr ‹#› 8 Preparáty •Streptococcus mutans CCM 7409T • 1) Negativní barvení s_mutans_krev_ii_pr Krevní agar s_mutans_tekute_ii_pr Tekuté médium ‹#› 9 Rod Bacillus •- porovnání tvaru a velikosti buněk Bacillus cereus CCM 2010 - grampozitivní neopouzdřená pohyblivá sporotvorná tyčinka -pozorovatelné spóry (oválná, centrální, nevyklenuje) - Gramovo barvení Fázový kontrast Negativní barvení ‹#› 10 Rod Bacillus •- porovnání tvaru a velikosti buněk Bacillus thuringiensis CCM 19 - grampozitivní neopouzdřená pohyblivá sporotvorná tyčinka -pozorovatelné spóry (oválná, subterminální, neztlušťuje) - Gramovo barvení Fázový kontrast ‹#› 11 Rod Bacillus •- porovnání tvaru a velikosti buněk Bacillus sphaericus CCM 1615 - grampozitivní neopouzdřená pohyblivá sporotvorná tyčinka -pozorovatelné spóry (kulatá, terminální, ztlušťuje) - Gramovo barvení Fázový kontrast Negativní barvení ‹#› 12 b_megaterium_ah Rod Bacillus •- porovnání tvaru a velikosti buněk Bacillus megaterium CCM 2007 - grampozitivní neopouzdřená pohyblivá sporotvorná tyčinka -pozorovatelné spóry (kulatá, subterminální, nezduřuje) - Gramovo barvení Fázový kontrast Negativní barvení ‹#› 13 Mikroskopické techniky •Fázový kontrast •změní posun fáze světelné vlny na změnu amplitudy •tmavé, pro světlo neprostupné objekty se jeví jako světlé, zářící (endospory) •využívá různé rychlosti světla při průchodu objektem ke zvýšení kontrastu •světlé pozadí a tmavé objekty •kolem buněk pozorujeme tzv. „haló“ efekt • • - b_sphaericus_spory Bacillus sphaericus CCM 1615 b_megaterium_48h_spora_terminalni_kulata_ii Bacillus megaterium CCM 2007 ‹#› 14 Mikroskopické techniky •Fázový kontrast • • - Bacillus mycoides CCM 145 b_mycoides_ii ‹#› 15 Mikroskopické techniky •Jasné pole („bright field“) – Gramovo barvení • • - mycobacterium_phlei_micrococcus_ij Mycobacterium phlei CCM 5639, Micrococcus luteus CCM 169 - smíšená kultura streptococcus_mutans_krev_pr Streptococcus mutans CCM 7409T - grampozitivní ser_marcescens_ph Serratia marcescens CCM 303 - gramnegativní