16. Isotopy 1. Aktivita vzorku ^35S byla měřena GM-počitačem během 15 dnů: Čas (dny): 0 1 2 3 4 5 10 15 Imp/min. 4280 4245 4212 4179 4146 4113 3952 3798 Určete t[1/2] a k! 2. Obsah kyseliny palmitové ve směsi byl analyzován isotopovým ředěním tak, že ke vzorku byla přidána kys. palmitová obsahující 21,5 % ^2H. Po isolaci byla kys. palmitová analysována hmotnostní spektroskopií. 2 paralelní pokusy daly následující výsledky: Navážka směsi mastných kyselin, g 14,641 14,135 Přídavek značené kys. palmitové, g 0,2163 0,175 Obsah ^2H v isolované kys. palmitové, % 1,28 1,18 Vypočtěte množství kys. palmitové ve směsi mastných kyselin (rozdíly v M[r] lze zanedbat)! 3. Buňky T. utilis rostly na (1-^14C)-glukose. Z jejich bílkovinné frakce byl vyisolován Phe a odbourán a) ninhydrinem na CO[2] (+amin) b) maganistanem na kys. benzoovou, která pak byla dekarboxylována na benzen Jednotlivé sloučeniny pak byly spáleny na CO[2], jehož aktivita byla změřena a činila: Látka aktivita CO[2] (imp.min^-1.μmol^-1) (1-^14C)-glukosa v mediu 340 Phe 220 CO[2] (ninhydrin) 10 kys. benzoová 280 benzen 170 Vypočtěte specifickou aktivitu každého C v postranním řetězci Phe a navrhněte možný původ těchto uhlíků! 4. Králíku byly injikovány do žíly 2 ml 2% (v/o) roztoku serového albuminu značeného ^131I. V odebíraných vzorcích séra byly nalezeny následující aktivity pro jednotlivé časy: Čas, dny 2 4 8 13 18 22 Aktivita, x 1000 imp./min 3588 2548 1271 608,7 257,2 136,2 Poločas rozpadu ^131I je 8,04 dne. Vypočtěte korigované aktivity vzorků a určete poločas života albuminu! 5. E. coli rostla na H^14COO^-. Celková bílkovina byla hydrolyzována a isolovány jednotlivé aminokyseliny. Ty byly odbourány jednak ninhydrinem nebo enzymově a byla stanovena aktivita produktů – CO[2] ev. močoviny. Hodnoty (imp./min/μmol CO[2]) udává tabulka: AK CO[2] (ninhydrin) CO[2] (dekarb b-Asp) močovina (arginasa) ______________________________________________________________________ Ala, Ser 0 Asp 187 375 530 ns Glu 149 752 ns ns Arg 256 739 ns 800 Pro 152 750 ns ns _______________________________________________________________________ Uveďte všechny možné metabolické vztahy, které lze z těchto výsledů odvodit. Jsou v souladu s názorem, že HCOOH se využívá teprve po přeměně na CO[2]? (Co lze usoudit o mechanizmu působení akonitasy?)