logo-IBA logo-MU © Institut biostatistiky a analýz ÚVOD DO MATEMATICKÉ BIOLOGIE I. (setkání třetí) prof. Ing. Jiří Holčík, CSc. UKB, pav. A29, RECETOX, dv.č.112 holcik@iba.muni.cz levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þKAM SE VZDĚLÁNÍM þV MATEMATICKÉ BIOLOGII ? levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz UPLATNĚNÍ MATEMATICKÝCH (TEORETICKÝCH) BIOLOGŮ þ(podle údajů poskytnutých členy americké Society for Mathematical Biology) oblast procenta vysoké školy a výzkumné instituce biologické vědy a výzkum 51 medicína 22 technika 8 zemědělství 3 tělesná výchova a sport 1 umění 1 státní a privátní laboratoře 6 nemocnice 4 privátní business 3 musea 1 levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz UPLATNĚNÍ MATEMATICKÝCH (TEORETICKÝCH) BIOLOGŮ þ(absolventi oboru Matematická biologie PřF MU) oblast vysoké školy a výzkumné instituce IBA MU, RECETOX PřF, AV ČR (Biofyzikální ústav, CzechGlobe,…), LF MU, … nemocnice privátní business (analytické firmy – např. ADDS s.r.o. Brno, farmaceutické firmy, …) státní správa (např. ÚZIS ČR, odbory ochrany životního prostředí, …) střední školy (musea J) finanční instituce levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þPŘÍBĚH þJOHANNA GREGORA MENDELA http://www.tyden.cz/obrazek/201403/531add0cb62c6/crop-579486-fo00045871.jpg levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þ1. ZÁKON O UNIFORMITĚ HYBRIDŮ (Zákon o uniformitě hybridů F1 generace homozygotů - také 1. Mendelův zákon) þKřížíme-li dominantního homozygota s homozygotem recesivním, jsou jejich potomci F1 generace v sledovaném znaku všichni stejní. Reciproká křížení u jakýchkoliv jedinců F1 generace dávají shodné výsledky. èto znamená, že při křížení červenokvětých se žlutokvětými rostlinami můžeme dostat všechny červené, všechny žluté, výjimečně též například oranžové, ale nikdy ne část žlutých a část červených; èje jedno, zda je dopraven pyl rostliny s kupříkladu červeným květem na rostlinu kvetoucí žlutě nebo naopak. þ2. ZÁKON O ŠTĚPENÍ V POTOMSTVU HYBRIDŮ þPři křížení heterozygotů lze genotypy a fenotypy vzniklých jedinců vyjádřit poměrem malých celých čísel. Vzniká genotypový a fenotypový štěpný poměr. ènapř. 1:2:1, 3:1,... MENDELOVY FENOTYPOVÉ ZÁKONY levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz MENDELOVY GENOTYPOVÉ ZÁKONY þ1. ZÁKON O SAMOSTATNOSTI ALEL þGenotyp je soubor samostatných genů určujících znaky. Každý znak je určen dvojicí samostatných alel. þ þ2. ZÁKON O SEGREGACI ALEL þDvojice samostatných alel se při zrání rozcházejí a do každé gamety přechází jedna z obou alel. þ þ3. ZÁKON O NEZÁVISLÉ KOMBINACI ALEL (Zákon o volné kombinovatelnosti alel s výjimkou genů ve vazbě) þVzájemným křížením polyhybridů (vícenásobných heterozygotních hybridů) vzniká genotypově i fenotypově nejednotné potomstvo s tolika kombinacemi genů, kolik je možných matematických kombinací mezi dvěma matematickými veličinami. þ levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz AUGUSTINIÁNSKÝ KLÁŠTER OPATSTVÍ SV. TOMÁŠE http://www.opatbrno.cz/foto/zahrada.jpg http://www.opatbrno.cz/foto/basilika2.jpg http://www.moravska-galerie.cz/media/796060/MP_2011_499x339.jpg http://commondatastorage.googleapis.com/static.panoramio.com/photos/original/52886525.jpg duchovní správa, misijní, školská a vědecká činnost levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz AUGUSTINIÁNSKÝ KLÁŠTER STARÉ BRNO http://www.opatbrno.cz/foto/zahrada.jpg http://www.opatbrno.cz/foto/basilika2.jpg http://www.moravska-galerie.cz/media/796060/MP_2011_499x339.jpg http://commondatastorage.googleapis.com/static.panoramio.com/photos/original/52886525.jpg duchovní správa, misijní, školská a vědecká činnost levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz AUGUSTINIÁNSKÝ KLÁŠTER STARÉ BRNO B. Vogler, A. Rambousek, A. Alt (učitel matematiky), František Tomaš Bratránek (filozof se zvláštním zájmem o přírodní vědy), J. Lindenthal, G. Mendel (učitel fyziky- drží v ruce fuchsii), V. Šembera, Pavel Křížkovský (hudebník a skladatel), J. B. Vorthey, opat Cyril František Napp (odborník na biblická studia a botaniku), František Matouš Klácel (filozof se zvláštním zájmem o přírodní vědy) Aurelius (Antonín?) Thaler Narozen: 13. června 1796 v Jihlavě Zemřel: 21. června 1843 Aurelius Thaler byl od roku 1824 do roku 1833 profesorem matematky na brněnském filozofickém učilišti. Byl členem řádu Augustiniánů na Starém Brně, kde konal botanické pokusy v klášterní zahradě. Považujeme ho za jednoho z prvních významných moravských botaniků. Je autorem herbáře, který využíval při svém studiu Gregor Mendel. Již od r. 1830 konal v klášterní zahrádce pokusy profesor matematiky Aurelius Thaler (1796–1843), zakladatel klášterního herbáře. Po Thalerově smrti převzal péči o herbář i zahrádku právě Klácel, který ji (1848) zase předal Mendelovi (jemuž také pomáhal v počátcích jeho přírodovědeckých studií). levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz Pametni deska Mendel zakladatel 8. února + 8. března 1865 VERSUCHE ÜBER PFLANZEN-HYBRIDEN levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz VERSUCHE ÜBER PFLANZEN-HYBRIDEN gm-65-f_Stránka_01.jpg þPodnětem k experimentům byla umělá oplodnění okrasných rostlin s cílem získat nové barevné varianty. þ þpokusné práce prováděny v letech 1856 – 1864; þpředcházely jim dva roky (1854 a 1855) přípravných prací věnovaných návrhu pokusů, zkoušení a výběru vhodných odrůd hrachu (kontrola stálosti znaků); levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz EXPERIMENT þVychází z aktivního přístupu ke zkoumání daného objektu. Spočívá na záměrně vyvolaných změnách podmínek existence a funkce daného objektu, které mají přimět zkoumaný objekt projevit se za různých uměle navozených situací. Výchozím předpokladem pro uspořádání experimentu je formulace hypotézy o analyzovaném objektu/ději. Hypotézy i následné experimenty jsou: èvyhledávací (heuristické) – „co se stane, uděláme-li toto?“ èověřovací (verifikační): „opravdu se to stane, když uděláme toto?“ è þnávrh þprovedení þvyhodnocení levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þPokusné rostliny musí být nutně: þkonstantní v rozdílných znacích; þjejich hybridy musí být během kvetení chráněny nebo lehce ochranitelné před působením každého cizího pylu; þhybridy a jejich potomstvo v dalších generacích nesmí trpět žádnou znatelnou poruchou plodnosti. þVÝBĚR EXPERIMENTÁLNÍCH ROSTLIN þCena a význam každého pokusu je podmíněna vhodností pomůcek k němu použitých i účelným jich upotřebením. Ani v tomto případě nemůže být lhostejné, které rostlinné druhy byly voleny za předmět pokusů a jakým způsobem tyto rostliny byly provedeny. Hrách setý (Pisum sativum) PLÁN POKUSU levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þHrách setý (Pisum sativum ?, P.quadratum, P.saccharatum, P.umbellatum) dostatečně vyhovoval stanoveným požadavkům. þHrách velmi dobře roste, v květu má samičí i samčí pohlavní orgány, je tedy možné samoopylení a také se snadno kříží, rychle se reprodukuje, má mnoho semen, které ještě v téže sezoně dozrávají.“ þVÝBĚR EXPERIMENTÁLNÍCH ROSTLIN þCena a význam každého pokusu je podmíněna vhodností pomůcek k němu použitých i účelným jich upotřebením. Ani v tomto případě nemůže být lhostejné, které rostlinné druhy byly voleny za předmět pokusů a jakým způsobem tyto rostliny byly provedeny. Zvláštní pozornost byla věnována luskovinám pro zvláštní stavbu jejich květu. Hrách setý (Pisum sativum) PLÁN POKUSU levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz PLÁN POKUSU þTvar semen: þ kulatý/svraštělý þZabarvení dělohy: þ žluté/zelené þTvar lusku: þ hladký/přiškrcený þBarva lusku: þ žlutá/zelená þBarva květu(slupky semene): pleiotropie þ bílá/fialová (bílá/ šedá až šedohnědá) þ þUmístění květu a lusku na stonku: þ podél stonku/na vrcholu stonku þVelikost stonku: þ dlouhý (6-7 stop)/krátký (0,75–1,5 stopy) þ Soubor:Mendel sedm znaku cs.png znaky dominantní, resp. recesivní levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz PLÁN POKUSU þPři vytváření metodiky pokusu bylo vytvořeno hybridizační schéma, které je založeno na křížení více generací rostlin hrachu. þPro kontrolu nad rozmnožováním hrachů, musel být oboupohlavní květ kastrován tak, aby existovala skupina rostlin se samičími a skupina rostlin se samčími pohlavními orgány. KONTROLNÍ SKUPINA vrostliny byly pěstovány na záhonech; včást v květináčích byla umístěna v době kvetení ve skleníku; levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz PLÁN POKUSU þMendel pracoval s velkým počtem rostlin včetně všech potomků (sledoval přes 28 tisíc rostlin, podrobně vyšetřoval cirka 10 tisíc rostlin). þVýsledky podrobil STATISTICKÉ ANALÝZE. þSvou hypotézu definoval pomocí MATEMATICKÉHO MODELU tak, aby získal konkrétní odpověď. þ(Experiment nejdříve vyhledávací, poté verifikační.) þ þTento postup v té době využívaný ve fyzice či chemii v biologii použil jako PRVNÍ. þ!!! !!! þ levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz VÝSLEDKY – MONOHYBRIDNÍ KŘÍŽENÍ 1. GENERACE HYBRIDŮ þPo oddělení čistých linií byly provedeny série křížení mezi rostlinami, kteří se lišily pouze v jednom znaku (a to pro všechny znaky). þ„V této generaci vystupují vedle dominantních znaků také recesivní v celé své jedinečnosti, a sice v jasném, vyloženě průměrném poměru 3 : 1.“ 1. znak – tvar semene z 253 rostlin 7324 semen. 5474 kulatých, 1850 hranatých tj. poměr 2,96 : 1 2. znak – barva dělohy z 258 rostlin 8023 semen. 6022 žlutých, 2001 zelených tj. poměr 3,01 : 1 3. znak – barva slupky semene z 929 rostlin mělo 705 fialové květy/šedohnědou slupku a 224 bílé květy a slupku semene tj. poměr 3,15 : 1 levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz VÝSLEDKY – MONOHYBRIDNÍ KŘÍŽENÍ 1. GENERACE HYBRIDŮ þPo oddělení čistých linií byly provedeny série křížení mezi rostlinami, kteří se lišily pouze v jednom znaku (a to pro všechny znaky). þ„V této generaci vystupují vedle dominantních znaků také recesivní v celé své jedinečnosti, a sice v jasném, vyloženě průměrném poměru 3 : 1.“ 4. znak – tvar lusků z 1181 rostlin mělo 882 hladké lusky, 299 zaškrcené tj. poměr 2,95 : 1 5. znak – barva lusku z 580 rostlin mělo 428 lusky zelené, 152 žluté tj. poměr 2,82 : 1 6. znak – postavení květů z 858 rostlin mělo 651 květy v úžlabích a 207 na konci osy tj. poměr 3,14 : 1 7. znak – délka osy z 1064 rostlin mělo 787 dlouhou a 277 krátkou osu tj. poměr 2,84 : 1 levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz VÝSLEDKY – MONOHYBRIDNÍ KŘÍŽENÍ 2. GENERACE HYBRIDŮ þ1. znak – tvar semene þz 565 rostlin vypěstovaných z kulatých semen 1.generace 193 jen kulatá semena, 372 kulatá i hranatá v poměru 3:1, poměr počtu hybridů ku kmenové formě þtj. poměr 1,93 : 1 þ2. znak – barva dělohy þz 519 rostlin ze semen se žlutými dělohami 166 pouze žlutých, 353 žlutých i zelených cca v poměru 3:1 þtj. poměr 2,13 : 1 þ… þprůměrný poměr 2:1 þ5. znak – barva lusku þpotomci 40 rostlin měli jen zelené lusky, potomci 60 zelené i žluté þtj. poměr 1,5 : 1 þpokus zopakován s poměrem 65 : 35, þtj. 1,9 : 1 levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz ELIMINACE KŘÍŽENCŮ þkříženci tíhnou k návratu ke svým kmenovým formám (Gärtner, Kölreuter) þpředpokládejme stejnou plodnost (vzorově 4 semena), platí poměr členění potomků 1:2:1 generace A Aa a A Aa a 1 1 2 1 1 2 1 2 6 4 6 3 2 3 3 28 8 28 7 2 7 4 120 16 120 15 2 15 5 496 32 496 31 2 31 n 2n -1 2 2n -1 normalizovaný poměr levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz ELIMINACE KŘÍŽENCŮ generace A Aa a A Aa a 1 1 2 1 1 2 1 2 6 4 6 3 2 3 3 28 8 28 7 2 7 4 120 16 120 15 2 15 5 496 32 496 31 2 31 n 2n -1 2 2n -1 normalizovaný poměr levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þ1. pokus þAB mateřská rostlina ab otcovská rostlina þA kulaté semeno a hranaté semeno þB žlutá děloha b zelená děloha þod 15 rostlin získáno 556 semen, z nichž þ315 kulatých a žlutých; þ101 hranatých a žlutých; þ108 kulatých a zelených; þ32 hranatých a zelených. þVšechna byla znovu vyseta. z kulatých žlutých jich 11 nevzešlo a 3 rostliny nedospěly do dospělosti. VÝSLEDKY – MULTIHYBRIDNÍ KŘÍŽENÍ levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þ1. pokus þz kulatých žlutých jich 11 nevzešlo a 3 rostliny nedospěly do dospělosti; z ostatních þ38 kulatá žlutá semena ……………………………………………………… AB þ65 kulatá žlutá a zelená ……………………………………………………… ABb þ60 kulatá žlutá a hranatá zelená ………………………………………… AaB þ138 kulatá žlutá a zelená, hranatá žlutá a zelená ……………… AaBb þz hranatých žlutých dalo úrodu 96, z nichž þ28 mělo hranatá žlutá semena …………………………………………… aB þ68 hranatá žlutá a zelená …………………………………………………… aBb þze 108 kulatých zelených dalo úrodu 102, z toho þ35 kulatá zelená ………………………………………………………………… Ab þ67 kulatá a hranatá zelená ………………………………………………… Aab þhranatá zelená semena dala 30 rostlin s týmiž semeny ……………………………………………………………………………………. ab þ VÝSLEDKY – MULTIHYBRIDNÍ KŘÍŽENÍ levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þ1. pokus þ9 forem s následujícími četnostmi þ38 rostlin ………………………… AB þ35 rostlin ………………………… Ab þ28 rostlin ………………………… aB þ30 rostlin ………………………… ab prům = 33 þ65 rostlin ………………………… Abb þ68 rostlin ………………………… aBb þ60 rostlin ………………………… AaB þ67 rostlin ………………………… Aab prům = 65 þ138 rostlin ……………………… AaBb prům = 138 ? þ(A+2Aa+a)(B+2Bb+b)= þ= AB+Ab+aB+ab+2ABb+2aBb+2AaB+2Aab+4AaBb þ þ þ þ þ þ þ VÝSLEDKY – MULTIHYBRIDNÍ KŘÍŽENÍ levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þ1. pokus þ9 forem s následujícími četnostmi þ38 rostlin ………………………… AB þ35 rostlin ………………………… Ab þ28 rostlin ………………………… aB þ30 rostlin ………………………… ab prům = 33 þ65 rostlin ………………………… Abb þ68 rostlin ………………………… aBb þ60 rostlin ………………………… AaB þ67 rostlin ………………………… Aab prům = 65 þ138 rostlin ……………………… AaBb prům = 138 ? þ(A+2Aa+a)(B+2Bb+b)= þ= AB+Ab+aB+ab+2ABb+2aBb+2AaB+2Aab+4AaBb þ þ þ þ þ þ þ VÝSLEDKY – MULTIHYBRIDNÍ KŘÍŽENÍ levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þ2. pokus þABC mateřská rostlina abc otcovská rostlina þA kulaté semeno a hranaté semeno þB žlutá děloha b zelená děloha þC slupka šedohnědá c slupka bílá þod 24 hybridů získáno 687 semen, z nichž dozrálo 639 rostlin VÝSLEDKY – MULTIHYBRIDNÍ KŘÍŽENÍ levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þ2. pokus þ27 forem s následujícími četnostmi þ8 rostlin ABC 22 rostlin ABCc 45 rostlin ABbCc þ14 rostlin Abc 17 rostlin AbCc 36 rostlin aBbCc þ9 rostlin AbC 25 rostlin aBCc 38 rostlin AaBCc þ11 rostlin Abc 20 rostlin abCc 40 rostlin AabCc þ8 rostlin aBC 15 rostlin ABbC 49 rostlin AaBbC þ10 rostlin aBc 18 rostlin ABbc 48 rostlin AaBbc þ10 rostlin abC 19 rostlin aBbC þ7 rostlin abc 24 rostlin aBbc þ 14 rostlin AaBC 78 rostlin AaBbCc þ10:19:43:78 18 rostlin AaBc þ10:20:40:80 20 rostlin AabC þ 16 rostlin Aabc þ(A+2Aa+a)(B+2Bb+b)(C+2Cc+c)= þ=BC+ABc+AbC+Abc+aBC+aBc+abC+abc+2(ABCc+AbCc+aBCc+abCc+ABbC+ABbc+aBbC+aBbc+AaBC+AaBc+AabC+Aabc)+4(A BbCc+aBbCc+AaBCc+AabCc+AaBbC+AaBbc)+8AaBbCc þ þ þ þ þ þ þ VÝSLEDKY – MULTIHYBRIDNÍ KŘÍŽENÍ levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz POHLAVNÍ BUŇKY HYBRIDŮ þAB mateřská rostlina þA tvar kulatý þB žlutá děloha þab otcovská rostlina þa tvar hranatý þb zelená děloha oplození 1.hybrid pylem AB 2.hybrid “ ab 3.AB “ hybridu 4.Ab “ hybridu levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz POHLAVNÍ BUŇKY HYBRIDŮ þPylové buňky þ þVaječné buňky þA A a a þ þA A a a þ levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz OHLASY þpřednáška vyšla tiskem 1866 v periodiku Přírodozkumného spolku s pracemi za rok 1865 þrozeslána na přes 130 institucí v Evropě i zámoří (výměna publikací Spolku) þMendel 40 separátů rozeslal se svými osobními korekturami významným odborníkům v oboru hybridizace (dr. Carl W. von Nägeli, Mnichov) þpozitivní recenze obou přednášek v brněnských novinách Neuigkeiten (-Z.- prof.Zawadski) þ „… Pozoruhodná byla číselná vyhodnocení zaměřená na výskyt rozdílných znaků hybridů a jejich vztahu ke kmenovým druhům. … Živá účast auditoria potvrdila šťastnou volbu přednášky a její velmi uspokojivé provedení.“ levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz OHLASY þWilhelm O.Focke (1834 – 1922) þDie Pflanzen-Mischlinge, Ein Beitrag zur Biologie der Gewächse (1881) þ„Mendel se domnívá, že našel konstantní číselné poměry mezi typy kříženců.“ þ1900 þHugo de Vries (Amsterdam) þCarl Correns (Tübingen) þErich von Tschermak (Wien) þ1901 - William Bateson – první překlad Mendelovy publikace do angličtiny þBateson,W.: Mendel’s Principles of Heredity. Oxford Univ.Press, 1913 levy-panel-IBA-se-zavojem logo-IBA-transparent logo-MU © Institut biostatistiky a analýz þZA DVA TÝDNY NA SHLEDANOU