PROJASŇOVÁNÍ ROSTLINNÉHO MATERIÁLU
Princip metody:
Pomocí projasňovacího média se zprůhlední obsah buněk a je pak možné při zaostření na
určitou rovinu prohlédnout buňky tzv. optického řezu. Materiál tedy není nutno řezat.
Metody se často využívá v rostlinné embryologii nebo ve šlechtitelství při studiu vývoje
embrya.
Pomůcky:
Mikroskop, preparační souprava.
Materiál:
Plody kokošky pastuší tobolky (Capsella bursa-pastoris L.)
Fixační směsi:
Carnoyova fixáž (ethylalkohol : ledová kyselina octová 3 :1) nebo
FAA (35% formaldehyd + ledová kys. octová + 70% ethylalkohol 5 + 5 + 90 dílů)
Projasňovací média:
nasycený roztok chloralhydrátu (8 dílů chloralhydrátu a 3 díly destilované vody) nebo
5% roztok KOH
Postup:
1) Rostlinný materiál fixujeme ve fixační směsi 2 hodiny.
2) Fixované objekty propereme v etanolu (jeho koncentrace odpovídá koncentraci
etanolu ve fixační směsi). V 70% etanolu je možné nafixovaný materiál i uchovávat
po delší dobu. Pokud chceme sledovat ukládání chlorofylu v buňkách embrya, fixaci
vynecháme.
3) Na podložním skle vypreparujeme z šešulek různé velikosti mladá semena,
zakápneme několika kapkami projasňovacího média a asi po hodině můžeme
pozorovat obsah zárodečného vaku.
Výsledky:
Vyhledáme vhodnou optickou rovinu a schematicky zakreslíme tvar mladého embrya a jeho
uložení v semeni. Snažíme se najít různé vývojové fáze embrya.
Literatura:
1. Braune W., Leman, A., Taubert H. Pflanzenanatomisches Praktikum II. 2. vyd. Jena:
VEB Gustav Fischer Verlag, 1982. 426 s. ISBN 261 700-36-82.
2. Lux A., Erdelská O. et al. Praktikum z anatómie a embryológie rastlín, Univerzita
Komenského Bratislava, 1998. 136 s. ISBN 80-223-1229-0.
3. Opravilová, V., Knoz, J. Základy mikroskopické techniky. Brno: Masarykova univerzita,
Vyd. 1. 1992.
Příklad obrazu projasněného semene kokošky s torpédovitým embryem
bazální buňka suspenzoru vlastní embryo
suspenzor osemení (testa)