Stanovení počtu a viability buněk


Princip detekce:

Princip měření je založen na základě integrity plasmatické membrány buněk při průchodu elektrickým
polem.


Připravená buněčná linie byla kultivována na 40 mm kultivačních miskách v inkubátoru při teplotě
…….., vlhkosti 95% a ….. CO[2.] Počet buněk a jejich viabilita byly stanoveny pomocí přístroje
CASY.

Vzorky:

Buněčná linie: ………….

Ovlivněná:………….

Čas: ………


Postup:

1.      Popsat zkumavky pro sběr vzorků.

2.      Sebrat medium do příslušných zkumavek.

3.      Přidat 1 ml PBS/EDTA do každé misky, sebrat do zkumavky.

4.      Přidat trypsin (500 ml, cca 3 min při 37°C).

5.      Neutralizace trypsinu pomocí média ze zkumavek.

6.      Oplach misek 1ml PBS.

7.      Propipetovat a odkápnout 20 ml suspenze buněk do kyvetky s 10 ml hemasolu.

8.      Otáčením kyvetu promíchat.

9.      Spočítat kyvetu na počítači částic CASY v příslušném programu pro naši buněčnou linii.

10.  Výsledky zapsat do tabulky

Výsledky:

                                           buněčná linie

                                              vzorek

                                      počet živých buněk / ml

                                     celkový počet buněk / ml

                                         počet debris / ml

                                             viabilita

                                             agregace
















buněčná linie

                                                           vzorek

                                                                                         počet živých buněk celkem