Patogenní kvasinky Kvasinkové patogeny Candida Cryptococcus Malassezia Trichosporon Rhodotorula Hansenula Torulopsis Geotrichum Saccharomyces > 70 90 % onemocnaní kvasinkami jsou kandidózy > poTet druhuj působících jako etiologické agens a úTastnících se patologických procesuj u Tlovaka, se zvypuje > Vatpina kvasinkových druhuj je nepatogenní, patogenními se stávají v podmínkách poruch imunitní odpovadi Ppehled onemocnaní způsobených patogenními houbami Asperqillosis (Asperqillus sp. Blastomycosis (Blastomyces s Candidiasis (Invasive) (Candida s Coccidioidomycosis Cryptococcosis (Cryptococcus s Histoplasmosis (Histoplasma caps1 Mucormycosis (Mucor1 Paracoccidioidomycosis _ Sporotrichosis (Soorothrix schenckii n=n > Mykózy: • primární • oportunní (u imunokompromitovaných pacientuj" AIDS, leukémie, diabetes, popáleniny, terapie kortiko-steroidy, imunosupresivy) • Systémové " plíce, játra, srdce, mozek, slezina • Lokální" kuie, ústní dutina, vagina aj > forma a závainost infekce závisí na: -infekTním agens (druh, mnoiství) - způsobu a brána infekce - stavu imunitního systému hostitele > endogenní infekce (autoinfekce) zdrojem jsou komenzálové Tlovaka " pp porupení homeostázy, vnímavosti a rezistence > povrchové mykózy " nakailivé Nakteré mykózy mají charakteristickou geografickou distribuci: Coccidioidomycosis: jihozápad USA a severní Mexiko Histoplasmosis: jiiní oblasti USA Blastomycosis: USA a Afrika Paracoccidioidomycosis: Jiiní Amerika Sporotrichosis: Stpední Amerika, Mexiko Diagnostika: > kombinace klinického pozorování a laboratorního vypetpení > Laboratorní vypetpení: • mikroskopický prukaz • kultivaTní prukaz • sérologické metody Mikroskopický prukaz povrchové mykózy - pupinky kme, Tásti nehtu) sepkrab kptice s vlasovými kopnky a koiními pu pi nami kandidóza " starý sliznic systémové infekce " vzorky tkání z více míst ppmá mikroskopie: - ve vlhkých preparátech po natrávení tkána 10-20% hydroxidem draselným - infekce sliznic " Gramovo barvení - morfologie bunak histologické vypetpení kultivace - vatpina kvasinek snadno kultivovatelná - Sabouraudm/ agar (glukóza, sladinový agar, hydrolyzát kaseinu + chloramfenikol nebo amikacin + vankomycin) - Czapek " Doksuv agar - souTasna pp 25 " 30°C a 37°C - doba kultivace 1 " 5 dmu - kvapení cuknu a dalpí biochemické testy (identifikaTní soupravy) auxanogram " test na asimilaci cukruja dusíkatých látek (zdroj C) zymogram cuknu test na zkvapování sérologie Průkaz specifických protilátek: (protilátková odpovabl slabá) - ELISA Antimykotika: kvasinky - eukaryontní buKky " bainá antibakteriální antibiotika jsou neúTinná TerTové struktury antimykotik: bunaTná stana plasmatická membrána cytoskelet Antimykotika " toxický úTinek na hostitele) An antifungal agent is a drug that selectively eliminates fungal pathogens from a host with minimal toxicity to the host. Polyene Antifungal Drugs Amphotericin, nystatin, and pimaricin interact with sterols in the cell membrane (ergosterol in fungi, cholesterol in humans) to form channels through which small molecules leak from the inside of the fungal cell to the outside. Azole Antifungal Drugs Fluconazole, itraconazole, and ketoconazole inhibit cytochrome P450-dependent enzymes (particularly C14-demethylase) involved in the biosynthesis of ergosterol, which is required for fungal cell membrane structure and function. Allylamine and Morpholine Antifungal Drugs _ Allylamines (naftifine, terbinafine) inhibit ergosterol biosynthesis at the level of squalene epoxidase. The morpholine drug, amorolfine, inhibits the same pathway at a later step. Antimetabolite Antifungal Drugs 5-Fluorocytosine acts as an inhibitor of both DNA and RNA synthesis via the intracytoplasmic conversion of 5-fluorocytosine to 5-fluorouracil. - Ppklady antimykotik - perorálna: ketokonazol, terbinafin - parenterálna: amfotericin B, mikonazolů (malá vstpebatelnost z trávicího ústrojí) - parenterálna i perorálna: flukonazol, itrakonazol, flucytozinů azolové deriváty a) 2-nitroimidazoly: klotrimazol mikonazol ketokonazol b) triazoly: itrakonazol (kandidózy, kryptokokózy) flukonazol (perorálna " kryptokoková meningitida - existuje primární i získaná rezistence kazolovým slouTeninám kyselina benzoová (Whitfieldova mast) " povrchové mykózy polyeny toxické, ukládají se v nova tvopeném keratin u nystatin (kandidózy) ^^^^ amfotericin B (kandidózy, kryptokokózy griseofulvin " proti dermatofytum imidazoly kyselina nalidixová fluoropyrimidiny kandicidin dalpí látky toxické vuJi kvasinkám: jodid draselný, kyselina boritá, bazická barviva kombinace antimykotik: Povrchové mykózy Povrchová kandidóza: - postrčení kuie, nehtuj sliznic úst a pochvy (infekce sliznic " KnouTnivkax) - 80 " 90% Candida albicans, zbývající pp'pady dal pí druhy (C. tropicalis, C. kr u sei, C. parapsilosis, C. glabrataú ) - 20% lidské populace " C. albicans souTást komensální flóry pokoiky a sliznic ^^m-^^^T - výskyt závisí na stavu organismu " bakteriální Ti virová infekce, tahotenství, aj 25°C 37°C 37°C Hypha Hyphe Pseudohyphae Pseudohyphes Identifikace: - Sabourauduv glukózový agar " kvasinková fáze (oválné buKky, 3-8 =m), kolonie za 1-2 dny pp 25°C - in vivo " smas kvasinkových bunak, pseudomycelia a pravého mycelia - po obarvení dle Grama: grampozitivní oválné puTící buKky Candida albicans ~ tvorba charakteristických klíTkuj (po 90 "120 minutách inkubace v séru pp 37°C) - dal pí identifikace: soupravy, testy fermentace a utilizace cukruja zdrojujdusíku LéTení: - lokální terapie nystatinem, amfotericinem B, mikonazolem 1= - vaginální kandidóza " azolové deriváty, azolové popevní Típky u recidivujících pppaduj infekce sliznic: - nejTastajpí povrchové kandidózy - na sliznici ohraniTené bílé skvrny, mohou splývat a vytvápet pseudomembrány (tvarohový vzhled) - infekce dutiny ústní: - bukální sliznice, tvrdé patro, okolí bílých skvrn zarudlé = - kojenci, staré osoby, osoby se sníxenou imunitou (AIDS) - umalý chrup " infekce pod protézou infekce kure a nehtui - v tpslech, mezi prsty, v podpainí jamce, pod prsy (v místech vlhké zapápky) - postiiení nehtu a nehtového luika " pp Tastém máTení rukou (opetpovatelky, myTky nádobí) Mykotické plaky na zubech Pm/odce: vatpinou Candida albicans, souvislost se stravovacími návyk Pityriasis versicolor - chronická infekce způsobená lipofilní Malassezia furfur - odbarvené skvrny na kuii M. furfur - bainý komenzál na kuii, vatpina infekcí je endogenní - vyiaduje k růstu lipidy; monopolárna puTící (jediný rod) - oválné lahvovité buKky, velikost 2-3 x 4-6 =m5 pp pityriasis versicolor kvasinko vité buKky s krátkými hyfami - kultivace " speciální pudy s Tweenem nebo lipidy (37°C) - podílí se na tvorba lupuja seboroické dermatitída Systémové mykózy Kryptokokóza: - způsobuje Cryptococcus neoformans vytvápející hladké lesklé kolonie, kolem bunak silné pouzdro - onemocnaní CNS a plic - sporadicky po celém svata, nejTastajpí u pacientLus AIDS (u 10%) - prostfBdí " alkalické substráty bohaté na dusík PrLikaz mikroskopicky: v mozkomípním moku a dalpím klinickém materiálu - kulovité buKky 2" 10 =m s mukopolysacharidovým pouzdrem (ai 60 % izolátu) " po smípení mozkomípního moku s tupí se pouzdro jeví jako jasný dvorec kolem bunak kultivace: - na Sabouradova agaru pp 25"30°C a 37°C za 2-3 dny - smetanová bílé ai ilutohnadé mukózní kolonie (neopouzdpené kmeny " suché) Wt - netvop pseudomycelium ani mycelium - nefermentuje cukry, silná produkce ureázy, asimilace inozitolu Blastoschizomyces capitatus (d p ve Tríchosporon capitatum) -diseminované infekce - oslabení neutropeniTtí pacienti se zhoubnými lymfomy - asimilace pouze glukózy a galaktózy Geotrichum candidum - infekce u diabetiku) imunosuprimovaných osob cerevisiae - sepse a plicní infekce 6 původce vaginálních mykóz (8,5 %) Rhodotorula - barevné kolonie (oraniové, Tervené) - neasimiluje inositol Dimorfní houby vláknitá fáze - vatpinou saprofytická (pronik ppes kuii a sliznice) kvasinková fáze - infekTní (hluboké infekce tkání a orgánu) - kvasinkový rust podporují bohatá j pí pudy (krevní agar) a teplota 35"37°C - tvorba hyf " teplota 25"30°C Dimorfní patogenní kvasinky Furigijs In vítr o (25° C) tnvivo(37öC) Blastomyces ^^^^^^^ Mold C^^^ CocCidioides "^^^ ^ ^^^^^ Spherule Histópíäsm? Mold C^y^ YeaSt Paracoccidioides ^ __M0 Sporothrix C^X^ Blastomykóza, kokcidiomykba, sporotrichóza etc. Sporothrix schenckii buKky ve fázovém kontrastu " hyfy a konídie Sporothrix schenckii studie bunak freeze fracture technikou Sporothrix schenckii studie bunak freeze-fracture technikod Candida albicans štúdium vlivu antibiotika nystatinu na morfológii plasmatické membrány Rasi 1 I pH Genová kontrola morfogeneze u C. albicans 17 \ 4± Tecl J . Vfiřlfit T T T PS&udOMypfßö Natura Reviews I Gonetlcä Role Ca++ v morfogenezi Candida albicans Localized Ca2+-channel activation caused by localized changes in membrane potential or membrane stretch, results in calcium influx that directs polarized growth Blastomyces dermatitis