MIKROSKOPICKÉ HOUBY – CVIČENÍ III.


1.         Izolace kvasinek stěrem z dutiny ústní

Materiál: stěr z dutiny ústní

Pomůcky: sterilní vatový tampon, tekuté médium (GPYA - Glucose Peptone Yeast Extract Agar),
termostat na 30 °C

Pracovní postup:

1.      Sterilním vatovým tamponem provedeme krouživým pohybem stěry z dutiny ústní.

2.      Malíkem pravé ruky otevřeme zkumavku, vsuneme dovnitř vatový tampón a vymyjeme v tekutém
médiu (v případě šikmého agaru tampón vymyjeme v kondenzované vodě na dně zkumavky a tampónem
"kreslíme" hádka odspodu nahoru na plochu média).

3.      Kultivujeme ve tmě, při teplotě 30 °C po dobu 24 - 48 hodin.

4.      V případě zákalu v tekutém médiu zhotovíme preparát barvený podle Grama (úloha č.3).


2.         Identifikace vláknitých hub řádu Mucorales

Materiál: Petriho miska s kulturou

Hodnocení:

                   I.            znaky makroskopické, které určíme z charakteru růstu


                II.            znaky mikroskopické, které zjistíme pomocí nativního preparátů


Výsledky :   popíšeme veškeré mikroskopické znaky mikromycety. Současně popíšeme i makroskopické
morfologické znaky (zápis provedeme do přiloženého identifikačního protokolu)


Závěr: provedeme identifikaci do rodu


3.         Příprava čisté kultury - Penicillium

Materiál: Petriho misky z izolací

Pomůcky: preparační jehla, Petriho miska s MEA, termostat na 25 °C

Pracovní postup:

1.      Preparační jehlou přeneseme část mycelia do středu nové Petriho misky s MEA.

2.      Kultivujeme 7 dnů při teplotě 25 °C.

4.         Mikroskopie

Říše: FUNGI

Oddělení: ASCOMYCOTA


- vegetativní stélku tvoří přehrádkované mycelium nebo pučivé buňky či pseudomycelium

- tvorba sept je centripetální, začíná u stěny hyf a pokračuje ke středu kde ponechá volný pór


Základní typy konidiogeneze (vzniku konidií):

1. Thalická: již předem vytvořené buňky hyf se rozdělí přehrádkami a rozpadnou se na jednotlivé
části. K formování definitivního tvaru dochází po oddělení.


a) Thalicko - arthrická: arthrokonidie


b) Holothalická: thalokonidie (thalokonidiemi jsou v jistém smyslu i chlamydospory - tlustostěnné
přetrvávající buňky vznikající na myceliu)


Preparát č.1: Geotrichum candidum CCM 8228 – arthrokonidie v rozpadajících se řetízcích

Fungi, Ascomycota, Saccharomycotina, Saccharomycetes, Saccharomycetidae, Saccharomycetales,
Dipodascaceae, Geotrichum



Preparát č.2: Microsporum gypseum  CCM 8342 – thalokonidie (makrokonidie a mikrokonidie)

Fungi, Ascomycota, Pezizomycotina, Eurotiomycetes, Eurotiomycetidae, Onygenales, Arthrodermataceae,
Microsporum


Record #7863


2. Blastická: konidie se formuje dříve než je oddělena přepážkou od konidiogenní buňky



Holoblastická - účast všech vrstev buněčné stěny


Preparát č.4: Beauveria bassiana CCM F-295 - sympodiální proliferace konidiogenní buňky

Fungi, Ascomycota, Pezizomycotina, Sordariomycetes, Hypocreomycetidae, Hypocreales,
Cordycipitaceae, Beauveria