Vliv teploty na fosfatázovou aktivitu
acetonového prášku
- HEP do 100 ml Tris-HCl (cca 20 mg?)
- 14 zkumavek ke každé teplotě (37, 40, 45, 50, 55oC): 0,6ml TrisHCl+1ml HEP
+1 zk. – kontrola (10 min.)
- přidat 0,2 ml PNPP (2mg/ml)
- inkubovat 0, 1, 2, 3, 4, 5, 10 min – zastavit 2ml 1M NaOH
- měřit intenzitu zbarvení na Spekolu 20 (400nm)
μgPNP/mgHEP
T (min)
55
50
45
40
30
Z exponenciální části křivky
maximální aktivitu fosfatázy
aktivita/min
oC