Köhlerovo osvětlení
Bi7170c (podzim 2015)
Osnova
●
princip Köhlerova osvětlení
●
praktický postup
2/10
Köhlerův princip osvětlení
●
standardní postup nastavení optimálního osvětlení
– osvětlení vysoké kvality
– homogenní
– s větším kontrastem
– sníženým množstvím rozptýleného světla
– i když není zdroj osvětlení dokonalý
●
roviny v nichž vzniká obraz preparátu jsou
dostatečně vzdálené od rovin s rušivými elementy
(vlákno žárovky, povrchové plochy optických elementů
s nečistotami)
3/10
Špatné vs. dobré nastavení
4/10
Postup
●
zapnout mikroskop, vložit vzorek a zaostřit při zcela
otevřené aperturní i polní cloně
●
upravit intenzitu zdroje světla
●
zavřít polní clonu
●
zaostřit kondenzorovou čočku tak, aby byla polní
clona ostrá (bude vidět modrý a červený lem, zaostřit
mezi, popř. blíže k modré)
5/10
Postup (2)
●
pomocí centrovacích šroubů vycentrujeme
kondenzorovou čočku tak, aby byla polní clona ve
středu zorného pole
●
otevřeme polní clonu těsně za zorné pole (snižuje
přesvětlení, tj. pozitivně se projeví na kontrastu)
●
nastavíme aperturní clonu (většinou ¾ NA objektivu)
●
změna objektivu a/nebo vzorku vyžaduje nové nastavení
6/10
Nastavení aperturní clony
●
kompromis
– kontrast spolu s hloubkou ostrosti
– rozlišení a barevné podání
●
přesvícení (ztráta detailů, mnoho rozptýleného světla)
●
optimum: vyšší rozlišení / nižší kontrast
●
vysoký kontrast / nižší rozlišení („přeclonění“)
7/10
Špatné vs. dobré nastavení
8/10
Špatné vs. dobré nastavení
9/10
Pracovní postup
●
zaostřit na vzorek při zcela otevřených clonách
●
upravit intenzitu zdroje světla
●
zavřít polní clonu
●
zaostřit kondenzorovou čočku na polní clonu
●
vycentrovat kondenzorovou čočku
●
otevřít polní clonu těsně za zorné pole
●
nastavit aperturní clonu
10/10