P11 Klinická mikrobiologie II Dýchací a trávicí infekce, metody detekce orálního biofilmu Bi7170c (podzim 2017) Osnova ● dýchací infekce + úkoly ● trávicí infekce + úkoly ● orální biofilm + úkoly 2/53 Význam respiračních nákaz ● nejběžnější infekce u praktického lékaře (resp. trakt slouží jako výhodný inkubátor) ● obrovský ekonomický dopad (neschopenky, ošetřování člena rodiny) ● vyskytují se v kolektivech, možné epidemie ● ¾ respiračních infekcí vyvolávají viry (u dětí ještě více) – ATB se často zbytečně předepisují/vyžadují 3/53 Lokalizace infekce v respiračním traktu ● podle lokalizace se liší příznaky (smrkání u rhinitid vs. kašel u infekcí DCD), vyšetřování, léčba i závažnost ● infekce: – HCD (plus střední ucho – Eustachova trubice) – DCD – plic – může postihovat více částí současně 4/53 Rozdělení respiračních infekcí HCD a přilehlé orgány ● infekce nosu a nosohltanu ● infekce orofaryngu vč. tonsil ● infekce vedlejších dutin nosních ● infekce středního ucha ● infekce spojivek 5/53 DCD a plíce ● infekce epiglottis ● infekce laryngu a trachey ● infekce bronchů ● infekce bronchiolů ● infekce plic Akutní respirační onemocnění vs. chřipce podobné onemocnění ● ARI – acute respiratory illness (není to chřipka) – většina běžných akutních onemocnění dýchacích cest probíhá jako rhinitidy, faryngitidy nebo smíšené rhinofaryngitidy (záněty nosu a hltanu) ● ILI – influenza-like illness – chřipka sice postihuje spíše DCD – projevuje se suchým kašlem a také celkovými příznaky (schvácenost, horečka) – podobně se projevují tzv. parachřipky 6/53 Normální mikroflóra DC ● dutina nosní bez specifické mikroflóry (přední část – mikroflóra z kůže, zadní část – z hltanu) ● farynx podobný jako dutina ústní: ústní streptokoky a neisserie, nevirulentní kmeny hemofilů aj.; většina bakterií je nekultivovatelná ● DCD a plíce jsou za normálních okolností bez (většího množství) mikrobů ● larynx – jako v farynx, ale menší množství 7/53 Vyšetřování a léčba infekcí nosu a nosohltanu ● vyšetřování je zbytečné ● ani hlenohnisavý sekret není důvodem provádět bakteriologické vyšetření, pokud netrvá delší dobu ● léčba symptomatická (při ucpaném nosu kapky, jinak tekutiny, např. čaj; antipyretikum není příliš vhodné, např. rhinoviry se množí při nižší teplotě) ● antibiotická léčba není indikována ● pouze pokud infekce trvá déle než 10–14 dnů, je vhodné vyšetřit výtěr z nosu (vyhnout se kontaminaci z kůže!) a léčit cíleně antibiotiky dle citlivosti 8/53 Respirační infekce – doporučený postup ČLS JEP „Více než 80 % rhinitid je provázeno změnami na sliznicích dutin, proto toto onemocnění bývá nazýváno také rhinosinusitida. Kašel provází asi 60–80 % rhinosinusitid. Hlenovitá sekrece z nosu se do tří dnů od počátku onemocnění mění v hlenohnisavou, obsahující deskvamované epiteliální buňky a kolonizující bakterie běžně se vyskytující v nose. Tato kvalitativní změna sekrece, která bývá často v ambulantní praxi nesprávně považována za bakteriální komplikaci, zejména provede-li se kultivační vyšetření hlenu nebo výtěru z nosu, však patří k přirozenému průběhu virové rhinosinusitidy.“ 9/53 Vyšetřování a léčba infekcí paranasálních dutin ● léčba sinusitidy pravděpodobného bakteriálního původu by měla být zahájena neprodleně, i bez vyšetření ● lékem volby amoxicilin (např. AMOCLEN), alternativou může být doxycyklin (DOXYBENE), u dětí kotrimoxazol (např. BISEPTOL) ● výtěr z nosu či krku je bezcenný ● jediná možnost je správně provedená punkce či výplach dutin fyziolotgickým roztokem na ORL (ne roztok persterilu, peroxidu či borové vody) – na žádanku nutno uvést, zda jde o čistý punktát, nebo proplach fyziologickým roztokem 10/53 Vyšetřování a léčba infekcí středního ucha ● léčba má smysl, pokud jde o skutečně prokázaný zánět (bolest, zarudnutí, horečka) a nereaguje na protizánětlivou léčbu – aspirin, ibuprofen (protibolestivý, protihorečnatý a protizánětlivý účinek) – paracetamol (protibolestivý a protihorečnatý účinek) ● lékem volby je amoxicilin (např. AMOCLEN), alternativou může být kotrimoxazol ● vyšetřovat výtěr ze zvukovodu má smysl pouze po provedené paracentéze (propíchnutí bubínku), jinak vyšetřit hnisavou tekutinu, která je při paracentéze odebrána 11/53 Vyšetřování a léčba infekcí z krku ● vždy by měl být proveden výtěr z krku (tonsil) k ověření bakteriálního původu a určení původce ● pro zrychlení vyšetřit CRP (fyziol. <2–8 mg/l) – bakteriální infekce nad 40–60 mg/l – virové infekce pod 40 mg/l ● léčba by měla být cílená: – u angín způsobených Streptococcus pyogenes (naprostá většina) je lékem volby V-penicilin – makrolidy pouze u alergických pacientů ● možná serologie EB viru a CMV (vyloučení infekční mononukleózy a cytomegalovirózy) 12/53 Vyšetřování a léčba infekcí laryngu a trachey ● není co vyšetřit, mikrobiologické vyšetření se tedy až na výjimky (chronické stavy) neprovádí ● dělat např. výtěr z krku je nesmyslné, protože v krku jsou úplně jiné bakterie. ● léčba je jen symptomatická, ATB nejsou indikována prakticky za žádných okolností 13/53 Vyšetřování a léčba zánětů bronchů a bronchiolů ● základem klinické vyšetření, které prokáže rozvoj kašle s vykašláváním, bez nálezu na plicní tkáni (podle rentgenu a klinického vyšetření) ● laboratorní vyšetřování většinou zbytečné ● při vykašlávání hnisu se zasílá sputum (pravděpodobná sekundární bakteriální infekce), vyšetřit CRP ● dále je možno poslat krev na serologické vyšetření protilátek proti mykoplasmatům a chlamydiím ● léčba ATB je většinou zbytečná (u mykoplasmat a chlamydií tetracykliny nebo makrolidy) ● v poslední se znovu objevuje pertusse (stěr z nosohltanu; erytromycin, roxithromycin) 14/53 Akutní zhoršení chronické bronchitidy ● charakteristika: – zhoršením kašle – zvýšenou expektorací a změnou charakteru sputa i jeho barvy – zhoršením dušnosti ● původci do 40 % viry ● bakteriální původci nejčastěji H. influenzae, S. pneumoniae, M. catarrhalis, S. aureus ● rutinní ATB léčba pacientů se nedoporučuje ● podání ATB má prokazatelný účinek pouze pokud jsou u pacientů přítomny současně všechny tři příznaky 15/53 Mikrobiologické vyšetřování infekcí plic ● klasické komunitní pneumonie: – krev na hemokultivaci (hemokultura) – sputum – mikroskopické a základní kultivační vyšetření – sputum – kultivační průkaz Legionella pneumophila – moč – průkaz antigenu Legionella pneumophila ● atypické pneumonie: – krev – sérologické vyšetření (průkaz protilátek) – hemokultura a sputum na bakteriologii (pro jistotu) – virologické vyšetření (sérologie, přímý průkaz) – sputum – přímý průkaz původce (EIA, PCR) ● speciální případy: TBC (sputum na TBC), plicní aspergilóza (kultivace BAL, antigeny v krvi, sérologie) 16/53 Odběr vzorků na vyšetření z dýchacích cest ● bakteriologie: – výtěry – (z krku, tonzil, nosu apod.), vždy na tamponu v transportní půdě (např. Amiesově), popsat odkud je výtěr – sputum, tracheální aspirát či bronchoalveolární laváž, případně také různé endotracheální kanyly a podobné vzorky u bronchitid a pneumonií – požadavek na vyšetření TBC musí být na žádance – hemokulturu u pneumonií – moč na legionelový antigen ● mykologie na kvasinky: – výtěr na tamponu v soupravě FungiQuick (Amies) 17/53 Odběr vzorků na vyšetření z dýchacích cest (2) ● viroví původci se většinou nevyšetřují ● je-li třeba je vyšetřit: – výplachy z nosohltanu a bronchoalveolární laváže speciálním médiem – krev na serologii respiračních virů (protilátky se vytvoří až za týden či dva po propuknutí nemoci!) ● pro virus chřipky se používá výtěr ze zadní stěny faryngu do speciálního transportního média 18/53 Výtěr z krku – technika ● tampon na tyčince v transportním mediu podle Amiese ● způsob odběru: – tampon se zavede za pomoci špachtle za patrové oblouky, aniž by došlo k dotyku se sliznicí dutiny ústní – válivým pohybem se razantně setře povrch obou tonsil a patrových oblouků tak, aby se do tamponu nasálo dostatečné množství slizničního sekretu – současně se provede výtěr ze zadní stěny faryngu. – tampon se opatrně vyjme, aby se zabránilo jeho kontaminaci, a vloží se do transportního média ● transport: do 2 hodin při pokojové teplotě ● uchovávání: do 24 hodin při pokojové teplotě (na kapavku neuchovávat a zaslat okamžitě) 19/53 Výtěr z nosohltanu (pertussis-like syndrome, podezření na pertussi) ● B. pertussis, H. influenzae, S. pneumoniae ● tampon na drátu; bordetely nutno ihned naočkovat na speciální kultivační půdu, jinak Amies ● způsob odběru: – koncová část (asi 3 až 4 cm) tamponu na drátě se ohne o hranu odběrové zkumavky do úhlu 90° – zavede se ústní dutinou za patrové oblouky k zadní stěně nasopharyngu, aniž by došlo k dotyku se sliznicí dutiny ústní nebo tonsil – krouživým, vějířovitým pohybem se provede stěr z faryngeální sliznice (tamponem vzhůru) – možný i pernasální přístup (po spodině dutiny nosní) ● transport: do 2 hodin (pokojová teplota, neuchovávat)20/53 Odběr sputa ● sterilní průhledný kontejner z umělé hmoty se šroubovacím víčkem ● způsob odběru: – odběr se provádí vždy za dohledu sestry nebo lékaře – pacient si vypláchne ústa a vykloktá vodou, kvůli omezení kontaminace ústními bakteriemi (výjimka odběr na BK, možná přítomnost atypických mykobakterií ve vodě z vodovodu) – pacient zhluboka zakašle tak, aby vykašlal sekret z DCD, nikoliv sliny či sekret z nosohltanu – sputum se zachytí do sterilního kontejneru (nejméně 1 ml) ● transport: do 2 hodin při pokojové teplotě ● uchovávání: do 24 hodin při chladničkové teplotě 21/53 Možná vyšetření u plicních infekcí ● základem je klinické vyšetření a rentgen ● klasické × atypické pneumonie (chudý fyzikální, rozsáhlý rentgenový nález; jiné spektrum původců) ● u klasických pneumonií má smysl správně odebrané sputum, případně (zejména u septického průběhu) krev na hemokultivaci ● u atypických pneumonií sérologie mykoplasmat a chlamydií (případně v rámci „sérologie respiračních virů“). ● u nemocničních pneumonií i vyšetření na legionely (sputum na kultivačního vyšetření, vyšetření moče na legionelový antigen, případně sérologie) 22/53 Žádanka o vyšetření ● kromě vyplnění obvyklých polí (jméno, číslo pojištěnce…) je důležité pole požadavku, co má být vyšetřeno → ● příklady formulací na žádance: – výtěr z krku na bakteriologii – punktát čelní dutiny na bakteriologii + kvasinky – krev na serologii původců atypických pneumonií – sputum na bakteriologii – sputum na TBC (kultivace + PCR) – hemokultura č. II z periferie – BAL na Pneumocystis jirovecii 23/53 Žádanka o vyšetření (2) ● na průvodku je nutno uvést, o jaký vzorek jde, jaké vyšetření je požadováno a další podstatné údaje ● mikrobiolog má právo odmítnout špatně odebraný vzorek sputa (nehnisavý, neobsahuje leukocyty, jen epitelie jsou to sliny!)→ ● kultivace TBC několik týdnů, stejně tak některých hub ● u virologie a průkazů antigenů závisí rychlost vyšetření hlavně na organizaci práce (tradiční kultivace vs. shell vial culture) 24/53 Úkol 1: Vyhledávání respiračních patogenů 1) očkováno tamponem 2) očkováno kličkou 3) stafylokoková čára 4) disk BH (bacitracin pro hemofily) 5) disk V+K (vankomycin a kolistin pro meningokoky) na celé naočkované ploše pátráme po hemolytických streptokocích (bezbarvé) a po stafylokocích (spíše bílé či zlatavé) 25/53 Úkol 1: Vyhledávání respiračních patogenů (2) bacitracinový disk může být umístěn buďto na stafylokokovou čáru, nebo cca 1 cm od ní, používají se oba způsoby 26/53 v těchto místech hledáme hemofily Úkol 1: Vyhledávání respiračních patogenů (3) ● běžná orofaryngeální flóra: – ústní streptokoky (našedlé téměř bezbarvé drobné kolonie s viridací) – ústní neisserie (drobné velice slabě nažloutlé kolonie bez hemolýzy) ● patogeny: – hemolytické streptokoky a S. aureus (drobné bezbarvé kolonie, resp. trochu větší bílé; hemolýza) – hemofily (okolo disku s bacitracinem – ve vyšší koncentraci než v bacitracinovém testu – k odclonění běžné flóry) – meningokoky (okolo disku se směsí vankomycinu s kolistinem) 27/53 Úkol 2: Vyšetření u akutní bronchopneumonie – sputum ● KA – krevní agar ● EA – Endův agar; alternativně také MacConkeyho agar ● (NaCl – KA s 10 % NaCl, selektivní pro stafylokoky; používá se u některých jiných respiračních vzorků např. tracheální aspiráty, bronchoalveolární laváže) 28/53 Úkol 2: Vyšetření sputa: diagnostické schéma ● Den 0: mikroskopie (Gramovo barvení) ● Den 1: – výsledek primokultivace vzorku na KA a EA – je-li přítomna jen běžná flóra, EA se vyhodí a KA se prodlužuje do dalšího dne – případný patogen se určuje a testuje se jeho citlivost; je-li ho málo, dělá se jeho izolace (křížový roztěr pro získání čistého kmene) 29/53 Úkol 2: Vyšetření sputa: diagnostické schéma (2) ● Den 2: – prohlížení prodloužených kultivací z předešlého dne – expedice negativních výsledků – expedice většiny pozitivních výsledků, je-li bližší určení hotovo a test citlivosti uspokojivý – není-li hotovo bližší určení, nebo je-li hotova teprve izolace pokračuje se další den ● Den 3: expedice většiny zbylých pozitivních výsledků (rezistentní, špatně určitelné, z izolací) ● Den 4: výjimečně expedice posledních výsledků 30/53 Úkol 2: Vyšetření sputa: možné nálezy ● běžná flóra: v DCD bežně není, ale při průchodu HCD vždy dochází ke kontaminaci ústními streptokoky a neisseriemi ● patogeny: – pneumokoky, pyogenní streptokoky, hemofily (klasické pneumonie) – původci atypických pneumonií většinou nejsou kultivovatelní – nejčastější nález: S. aureus (lékem volby oxacilin, popř. některý cefalosporin I. gen.) 31/53 Úkol 3: Výtěr z krku: diagnostické schéma ● Den 0: pouze nasazení kultivací (bez mikroskopie) ● Den 1: – výsledek primokultivace vzorku na KA a EA – NaCl se zde nepoužívá – KA s běžnou flórou prodlužují ● Den 2: expedice všech negativních a většiny pozitivních výsledků ● Den 3: expedice téměř všech zbylých pozitivních výsledků 32/53 Úkol 3: Výtěr z krku: možné nálezy ● běžná flóra: – ústní streptokoky a neisserie; – hemofily (hlavně H. parainfluenzae), – za normální se považuje i malé množství aureů, pneumokoků, meningokoků, moraxel apod. – další součásti běžné flóry (anaeroby, spirochety) se při běžné kultivaci neodhalí ● patogeny: – pyogenní streptokoky, arkanobakteria – často se nenajde nic a původ je virový (EB viry a jiné) – nejčastější nález: S. pyogenes (lékem volby penicilin V, u alergických pacientů makrolidy) 33/53 Úkol 4: Vhodné vzorky u různých respiračních chorob rhinitis žádné vzorky – žádné vyšetřování sinusitis pouze správě odebraný vzorek hnisu ze sinusů, nebo výplach sinusů; NE výtěr z krku nebo z nosu faryngitis nutný výtěr z krku (a test CRP) chřipka výtěr ze zadní stěny nasofaryngu pomocí speciálního transportního média bronchitis zpravidla se nevyšetřuje; sputum, je-li dostupné, nebo srážlivá krev na sérologii akutní pneumonie (hnisavá expektorace) sputum, hemokultura subakutní pneumonie (suchý kašel) sérologie původců atypických pneumonií plicní aspergilóza kultivace BALu, detekce antigenů v krvi, detekce protilátek 34/53 Význam infekcí trávicích cest ● často přenášeny kontaminovanými potravinami a vodou ● ekonomické ztráty nejen při infekci, ale i při kontaktu s infekcí ● pro jejich předcházení je zásadní hygiena v potravinářských výrobnách a provozovnách a ochrana vodních zdrojů ● důležitá je také osobní hygiena vč. dutiny ústní ● v léčbě jen výjimečné použití antibiotik (proto se neprovádí testy citlivosti na ATB) 35/53 Rozdělení trávicích infekcí ● infekce v dutině ústní a slinných žláz ● infekce hltanu – viz respirační infekce ● infekce jícnu – velice vzácné, většinou sekundární při původně neinfekční nemoci ● infekce žaludku (spíše spolupůsobení žaludečních mikrobů u některých chorob) ● infekce tenkého střeva (enteritidy) ● infekce tlustého střeva (kolitidy) – často infekce obou částí (enterokolitidy) ● infekce jater, žlučníku a slinivky břišní 36/53 Normální mikroflóra trávicích cest ● rty: přechod kožní a ústní flóry ● ústní dutina: – ústní streptokoky a neisserie – hemofily (hlavně H. parainfluenzae) – za normální se považuje i malé množství aureů, pneumokoků, meningokoků, moraxel apod. – další součásti běžné flóry (anaeroby, spirochety) se při běžné kultivaci neodhalí ● jícen a žaludek normálně bez většího množství mikrobů ● tenké a tlusté střevo: enterobakterie, enterokoky, kvasinky, někdy i nepatogenní améby, 1 kg anaerobů ● řiť: přechod střeva a kůže 37/53 Odběr stolice (úkol č. 6) bakterie v Amiesově transportní půdě kvasinky nejlépe v půdě FungiQuick (Amies) viry vzorek velikosti lískového oříšku; má-li být provedena izolace viru, nutno chladit, sterilní paraziti vzorek velikosti lískového oříšku, nemusí být sterilní; označit cestovatelskou anamnézu, zpravidla tři vzorky roupi Grahamova metoda – perianální otisk na speciální lepicí pásku, mikroskopie toxin Clostridium difficile viz paraziti otravy bakteriálním toxinem zvratky, zbytky jídel 38/53 Odběr stolice na bakteriologii ● pacient stojí (klečí) a opírá se o ruce (lokty) nebo leží ● odběrový tampon se opatrně zavede za anální svěrač, opatrnou rotací se setře povrch sliznice a krypt ● při správném odběru stolice makroskopicky zřetelná na povrchu tamponu ● tampon se zanoří hluboko do media ● uchovávání a transport při pokojové teplotě, lepší doručit vzorek ihned ● na žádanku uvést adresu pacienta (nález obligátního patogena tj. salmonela, shigela, kampylobakter, yersinie, povinně hlášen na územně příslušné pracoviště hygieny; oslovení pacienta hygienou) 39/53 Odběr kusové stolice ● kontejner s lopatkou ● pacient odebere po defekaci kousek stolice velikosti lískového ořechu, ne menší ● stolici neodebírat z povrchu, mohlo dojít ke kontaminaci ● u parazitů nutno vyšetřit několikrát za sebou, zpravidla tři dny po sobě ● lze uchovat v lednici, ale nesmí zmrznout; izolace virů nutno uchovávat při 0 °C ● vyšetření na lamblie: lépe doručit materiál do laboratoře čerstvý; vhodné domluvit s laboratoří čas odběru 40/53 Odběr kusové stolice na parazity ● důležité uvedení tzv. cestovatelské anamnézy, tedy nejen „návrat ze zahraničí“, ale také přesně které oblasti pacient navštívil ● pokud je ve stolici přítomen makroskopicky přítomen celý parazit (např. škrkavka), lze poslat přímo tohoto parazita ve zkumavce ● pozor, často pacienti tvrdí, že si ve WC míse našli parazita, ale ve skutečnosti jim do mísy živočich (třeba žížala) spadl např. z okenního parapetu apod. ● někdy je přesvědčení o přítomnosti parazita ve střevě součástí psychiatrické diagnózy pacienta 41/53 Odběr na roupy (Grahamova metoda) ● odběr ráno bez omytí (samičky roupů přes noc nakladou vajíčka do perianálních řas) ● před odběrem průhlednou (!) lepicí pásku opatrně odlepit z podložního skla, přiložit na anální otvor a řasy v jeho okolí ● stisknout hýždě proti sobě, pak zase rozevřít ● pásku opatrně přemístit zpátky na sklo ● u dospělých (bolestivost kvůli ochlupení) se použije odběr stolice (menší výtěžnost), případně se použije tzv. Schüffnerova tyčinka (skleněná tyčinka na konci rozšířená do kuličky) 42/53 Diagnostika původců trávicích infekcí ● mikroskopie nemá praktický význam ● kultivace se provádí na různých půdách (výběr závisí na stáří pacienta a diagnóze, u cestovatelů případně přidáváme i méně obvyklé půdy), ● nalezené patogeny jsou identifikovány – viz dále ● přímý průkaz toxinů A a B (C. difficile) jako antigenu (průkaz toxinu je důležitější než samotný nález klostridia) ● dg. virových původců: většinou průkaz antigenu, případně virové nukleové kyseliny ● dg. parazitárních a houbových původců: viz minulá cvičení 43/53 Den 0 (přijatá stolice) Negativní výsledek za 48h Pozitivní za 72h a déle selenit24 h 48 h identifikace Endo EndoXLD MAL MCs KA NaClCCDACIN +72 h 42°C28°C *Není-li uvedeno jinak, kultivace probíhá při 37°C Selenit, XLD, MAL (salmonely) CIN (yersinie) CCDA (kampylobaktery) NaCl (stafylokoky) MCs (některé STEC) Endo (různé enterobakterie) KA (další bakterie) vždy jen někdy 44/53 Úkol 5: Vyšetření stolice: diagnostické schéma Úkol 5: Vyšetření stolice: identifikace bakterie ● bakterie kultivujeme na různých půdách, na kterých mají charakteristický vzhled ● dále identifikujeme, zpravidla biochemickými testy (přinejmenším Hajnova půda – salmonela tu má typický červeno-černý vzhled; stejný vzhled má sice i proteus, ten by se ale projevil plazivým růstem na agarech) ● někdy antigenní analýza (salmonely, E. coli) ● antigeny S. Enteritidis: O: 1, 9, 12 H: g, m 45/53 Úkol 5: Vyšetření stolice: interpretace vyšetření ● primární patogeny (salmonely, shigely, yersinie, kampylobaktery) ● podmíněné patogeny; u některých podmíněných patogenů třeba bližšího určení (především u E. coli, tj. EPEC, STEC, EAEC atd.) ● interpretace v kontextu klinických příznaků (při masivním nálezu tzv. nepatogenních améb, např. Entamoeba coli, a zároveň výrazných potížích může být vhodné přeléčení) ● infekce C. difficile: důležité, zda je pozitivní klostridiový toxin (samotný nález klostridiového antigenu nebo kultivační nález klostridia mnoho neznamená) 46/53 Orální biofilm ● houbovitá struktura s kanálky ● časní kolonizátoři: – S. sanguinis, – S. mutans, – S. mitis ● pozdní kolonizátoři: – Actinomyces, – Veillonella, – Neisseria, – Fusobacterium 47/53Rosan B., Lamont R.J. (2000) Microbes Infect. 2:1599–1607 Orální biofilm (2) 48/53 Orální biofilm (3) 49/53Rosan B., Lamont R.J. (2000) Microbes Infect. 2:1599–1607 Orální biofilm (3) 50/53 Gramovo barvení Alciánová modř Foto: V. Holá Úkol 7: Mikroskopie biofilmu Úkol 8: Vliv čištění zubů ● úkol 7: zakreslete sledované útvary ● úkol 8: po obarvení biofilmu zapište, kde se nachází nejvíce biofilmu 51/53Foto: V. Holá Úkol 9: Vliv přítomnosti sacharidů na dynamiku růstu biofilmu ● vyplňte přibližný průměr hodnot absorbance do tabulky a sestrojte prostorový graf; učiňte závěr o množství přidané glukózy a růstu biofilmu S. mutans 52/53 Po tomto cvičení byste měli umět: ● vysvětlit diagnostické postupy u respiračních a trávicích infekcí, vč. správného odběru materiálu ● rozhodnout o vhodnosti použití ATB v konkrétních případech, znát lék volby pro nejběžnější patogeny ● popsat strukturu orálního biofilmu ● zhodnotit vliv sacharidů na růst orálního biofilmu 53/53