Speciální metody analýzy mikroorganizmů II doc. RNDr. Milan Bartoš, Ph.D. Přírodovědecká fakulta MU, 2017 Bartos.Milan@atlas.cz Obsah přednášky I 1)Repetitorium metod analýzy mikroorganismů. Metody kultivační, metody nekultivační. 2)Amplifikační metody v molekulární diagnostice mikroorganismů. Amplifikace cílové sekvence DNA, amplifikace sondy a signálu neseného sondou. 3)PCR v reálném čase. Detekce amplifikačních produktů v reálném čase. TaqMan sondy, hybridizační sondy, vlásenkové sondy a molekulární majáčky. 4)Enzymy používané při manipulaci s nukleovými kyselinami. Restrikční mapy. Detekce polymorfismů v genomech. Molekulárně typizační metody v mikrobiologii. DNA fingerprinty. Analýza proteinů a proteinové fingerprinty. 5)Způsoby provedení hybridizace. Hybridizace v roztoku a na pevné fázi. Fluorescentní in situ hybridizace. Využití metod hybridizace v analýze mikroorganismů. Obsah přednášky II 7)Mikročipy, jejich konstrukce a jejich použití v mikrobiologii. 8)Různé způsoby sekvenování nukleových kyselin a analýza DNA sekvencí. 9)Techniky rekombinantní DNA a jejich význam při studiu mikroorganismů. 10)Příprava rekombinantních DNA molekul pro diagnostické účely. Sondy NK, jejich charakterizace a použití. Značení a způsoby detekce sond. 11)Analýza mikrobiálních komunit – metagenomika. 12)Validace laboratorních mikrobiologických metod. Akreditace laboratoří. Doporučená literatura 1)Persing et al. (2016): Molecular Microbiology: Diagnostic Principles and Practice, 3rd edition MCj03701400000[1] 3) Šmarda et al. (2005): Metody molekulární biologie, MU Brno 4) Rolfs et al. (1992): PCR: Clinical Diagnostics and Research, Sringer-Verlag Berlin 5) www.farmakogenomika.cz 1) 1) 2) Brown (2007): Klonování genů a analýza DNA. Univerzita Palackého v Olomouci (1. české vydání, překlad 5. vydání) Kde najdete studijní materiály? Pokud toto čtete, tak jste je našli MCAN00610_0000[1] Podmínky ke zkoušce •Písemný test, zisk alespoň 60% bodů •Ústní rozprava Ptejte se mne na přednáškách, u zkoušky se budu ptát já! A sledujte novinky ! •www.osel.cz logo_osel •http://www.plospathogens.org/home.action http://www.the-scientist.com/ tslogo