Luděk Bláha, PřF MU, RECETOX
www.recetox.cz
Správná laboratorní praxe
- poznámky biologické/toxikologické Část
2 – modely, testy, studie, GMO
• Průmyslové látky,
produkty
• Kosmetická chemie
•Potraviny / krmiva
+ kontakt s potravinami
•POR (pesticidy)
•Biocidy
•Léčiva humánní
•Léčiva veterinární
Chemické látky („bulk“)
nanonanonanonano
REACH
(ECHA)
PPP
(EFSA)
MPs
(EMA)
§§
§§
WFD – povrch.voda
GWD – podzemní v.
WWTP – odpadní v.
Sedimenty
Půda (SD)
Ovzduší
Odpady
SOIL
AIR
WATER
Negativní vlivy
 vliv na zdraví člověka
 vliv na prostředí
Stresory
- Chemické
- Biologické (patogeny, GMO)
- Fyzikální (záření, hluk...)
Dva mechanismy “řízení” (§§)
1. před uvolněním – registrace
2. v prostředí
Část 2 přednášek:
Jak otestovat?
Správná laboratorní praxe
modely – testy - studie
GLP v biologii - úvod
• BIOLOGIE
Experimentální věda
a Praktická biologie/biochemie/mikrobiologie atd.
• Nutnost dodržovat správnou praxi tam, kde jsou výsledky
využity při rozhodování
• Praktická biologie a biochemie
– Léčiva (registrace/povolení, výroba, kontrola, přípravy…)
– Lékařská biologie a biochemie
– Mikrobiologická kvalita (potraviny, pitná voda)
– Průmyslové chemické látky, potravní aditiva, potenciálně
nebezpečné agens (geneticky modifikované organismy) .. a
jejich bezpečnost = toxikologie, ekotoxikologie, biodegradabilita
apod
– Další zákonem dané oblasti ve vztahu k biologii – dodržení
etických požadavků (např. práce se zvířaty/obratlovci, GMO)
GLP v biologii – základní principy a příkladová STUDIE
• V Biologii platí stejné principy jako v
oblasti chemické
– detaily a principy - viz přednášky dr. Vrany
(QA/QC, detailní SOPs, dokumentace …)
• Příklad - „jednoduchá“ STUDIE v režimu GLP
 viz ukázka na přednášce – utajený materiál – nemůže být fyzicky předán
Příklad studie v režimu GLP
• Cíl studie
– Podkladový materiál pro registraci (povolení) využití aspirinu u prasat
• Jeden z dílčích podkladových materiálů (tento příklad)
– farmakokinetik aspirinu prasat po jednorázovém podání prasatům
• Experimentální design
– 8 zvířat (prasat), jednorázová aplikace aspirinu
– odběry krve v definovaných časech (0-144 h)
– sledování hladin metabolitů K. AcSal a vyhodnocení
• Realizace:
– 1) Plán projektu (100 stran + přílohy SOPs)
– 2) Výstup – Zpráva z realizace (detailní dokumentace vč. odchylek)
– Přímá jmenovitá odpovědnost konkrétních osob
Existuje mnoho testovacích systémů …jaké
testy se ale využívají v praxi?
Jak vypadají návody?
Standardizace v biologickém testování
• V odborné literatuře - velké množství experimentálních metod
• Méně metod je standardizovaných a validovaných
• STANDARDIZACE metod
– Standardizace je potřebná a žádoucí i uvnitř laboratoře (viz příklady  SOP ELISA)
– Vyšší úrovně standardizace (akceptovatelné mezinárodně) – snižování nákladů /
omezení opakovaných hodnocení
– Přejímání standardizovaných metod do legislativ
– např. ČR – Vyhl. 433/2004 Sb.
• Metody testování toxicity : vychází z OECD guidelines
(viz příklad: zákon ! - Příklad - PDF str. 16 – Akutní toxicita)
• Standardizační agentury
OECD.org (! Velký význam – viz úvod do GLP/chemie)
ISO.org (spíše Evropský dopad)
ASTM.org (USA)
Metody - standardizace
Standardní operační postup - příklad 1
• Ukázka SOP – ELISA stanovení toxinu microcystinu
 viz příklad ve studijních materiálech
• Struktura SOP
– Název
– Autor
– Určení a cíl
– Princip
– Rušivé vlivy a omezení metody
– Bezpečnost při práci a toxikologické údaje
– Odpady a jejich likvidace
– Normativní odkazy
– Chemikálie a spotřební materiál
– Vzorky
– Přístroje
– Kalibrace před zkouškou
– Vlastní postup
– Kontrola kvality
– Výstup – protokol / výpočet
– Poznámky doplňky
Standardní operační postup - příklad 2
Cvičení:
V laboratoři SZÚ
pravidelně vyšetřují
obsah toxických kovů v
černém čaji.
Připravte SOP č. 1 pro
přípravu černého čaje,
ve kterém budou
následně analyzovány
těžké kovy ...
www.oecd.org
5 hlavních sekcí OECD GUIDELINES
v rámci každé „standardizované postupy“
Section 1: Physical Chemical Properties
Section 2: Effects on Biotic Systems (> 30 postupů)
Section 3: Degradation and Accumulation (cca 10 postupů)
Section 4: Health Effects (> 80 postupů)
Section 5: Special Activities
OECD GUIDELINES – Testing of chemicals
http://www.oecd.org
Příklady – OECD Guidelines – sekce „2“ Effects on biotic systems
(> 30 návodů)
Příklady – OECD Guidelines – sekce „3“
Příklady – OECD Guidelines – sekce „4“
– Toxicita pro člověka (> 90 postupů - příklady dole)
- Standardní postupy - akutní, chronická, reprod. toxicita
• Chemické látky (průmyslové)
– legislativa REACH
– v ČR zákon o chemických látkách
– při registracích je třeba předložit
• informace (např. o toxicitě) získané s využitím předepsaných zkoušek
– Viz vyhláška 443 / 2004 Sb. (studijní materiály)
• zkoušky musí být provedeny v režimu SLP
Zákony a testování toxicity v ČR
Biologické modely
1 - Využití obratlovců in vivo
• Existuje mnoho přístupů v biologii
(některé jsou předepsány při hodnocení „bezpečnosti“
– viz předchozí diskuze – léčiva, bezpečnost chemických látek …)
• Biologické modely
– Obratlovci
• in vivo (zvířata)
• ex vivo (orgány zvířat)
• in vitro (buňky, buněčné linie)
– Bezobratlí
– Rostliny, řasy …
– Bakterie
MODELY v biologii
Význam využití zvířat (obratlovců, savců / pokusných zvířat)
• Unikátní 3D prostorové uspořádání
• Fyziologické a Farmako(Toxo)kinetické procesy
(podobné s člověkem)
• Lze pozorovat komplexní účinky (podobné s člověkem)
• Mnoho látek má více mechanismů toxického efektu
• Z těchto (a dalších) důvodů je stále třeba provádět
zkoušky in vivo
– Účinnost léčiv (vč. Vedlejších účinků)
– Bezpečnost kosmetických přípravků
– Toxicita chemických látek pro člověka
Užívání pokusných zvířat v EU (2011)
reporting členských států (viz také studijní materiály)
Využití zvířat (=obratlovců): etické aspekty
• Nutnost regulace – zákonný rámec
– Zákon na ochranu zvířat proti týrání 246/1992
– Vyhláška 311/1997 (o využití pokusných
zvířat)
• Odpovědný úřad
– Ministerstvo zemědělství
a jeho Ústřední komise pro ochranu zvířat
www.eAGRI.cz (také www.mze.cz)
• Zákon 246/1992 a Vyhláška 311/1997
– CO je zvíře z hlediska zákona?
• OBRATLOVEC kromě embryí a plodů
– Typy zvířat: laboratorní / pokusné (další)
– KDO smí zvířata využívat
• Vyžaduje se registrace na ÚKOZ (MZe)
• Další důležité potřeby
– Školení osob
– Etické komise jednotlivých pracovišť
– JAK lze experimenty realizovat (dodržování pravidel GLP)
• Zdůvodnění využití zvířat (musí být schváleno etickou komisí)
• Projekt pokusu, protokol pokusu, evidence
Využití zvířat =obratlovců
• Kdy lze využít pokusná zvířata?
– výroba, vývoj, kontrola kvality, nezávadnosti a účinnosti
léčiv, biopreparátů, potravin a event. jiných výrobků
– studium nemocí, prevence, diagnostika, léčení
– studium fyziologických procesů
– ochrana životního prostředí
– výuka na SŠ a VŠ
• Zákon také stanoví - kdy se zkoušení vyžaduje
– OCHRANA ČLOVĚKA a HOSP. ZVÍŘAT
– Potraviny, zemědělské látky
– Kontrola léčiv
– Výroba léčiv - farmakologické preklinické studie
– Farmakokinetika
– Nežádoucí účinky
Využití zvířat =obratlovců
Bezpečnost chemických látek pro člověka
Testování toxicity in vivo
• Každá látka je toxická, záleží jen na DÁVCE a DOBĚ PODÁNÍ (expozice)
– Krátkodobá (akutní) expozice
-> akutní rychlé účinky (smrt)
– Dlouhodobá (chronická) expozice
-> subletální efekty (nemoci, nádory, imunotoxicita, reprodukční toxicita …)
• Hodnocení a srovnání toxicity:
– nejč. LD50 (letální dávka 50) – dávka (zpravidla akutní), která s největší
pravděpodobností způsobí smrt 50% exponovaných jedinců (vyjádření jako
koncentrace – např. mg/kg živé váhy)
LD50 je hodnota odvozená (modelovaná) z testování křivky více dávek vs toxicita (ve skutečnosti není možné
otestovat právě dávku, která způsobí smrt právě 50% zvířat)
– NOEL – No Observed Effect Level – nejvyšší dávka (hladina), která byla použita
v konkrétním testu toxicity a při které nebyly pozorovány (škodlivé) účinky
Pro stanovení limitů (např. TDI/ADI) se využívá NOEL z testů chronické toxicity
– další parametry „bezpečnosti“ – např. TDI –tolerovatelný denní příjem (např.
mg/kg živé váhy/den)
Které látky jsou toxické?
Velice častý test test
- Přesné dávkování
- Sledování letality
a akutních projevů 24-48h
AKUTNÍ TOXICITA
perorální aplikace - potkan
Srovnej - příklady – studijní materiály
• OECD STANDARD (TG 423)
•Vyhl. 443/2004 – metoda B.1 (str. 16-31)
Třídy akutní toxicity (podle zákona o chemických látkách)
• Vyšetření specifických efektů při dlouhodobém (opakovaném) podávání
• Dávky pro testování se odvozují z akutní toxicity nebo podle obvyklého
podávání (např. léčiva)
• Délka studie závisí na „předpokládaném“ schématu podávání látky
• př. Léčivo
předpokládané podávání délka studie
• 1-2 d/wk 2 wks
• 1,2,3 ...7 d 4 wks
• Opak 1-30 d 4 months
• Opak > 30 d 6 months
• Složitý design a řada požadavků
– Zvířata (více druhů, stáří, pohlaví…), počty ve skupině
– Vyhodnocení - pitva (definované úkony), statistika …
• Ekonomická náročnost , etické problémy  potřeba GLP
Chronická a reprodukční toxicita
• Zjišťuje se vliv na
– sexuální chování zvířat
– prenatální mortalitu
– fetální abnormality & poškození během života
• Experimenty
– změny fertility, vliv na F a M gamety (poměry narozených F a M);
toxicita pro embrya a féty, změny gravidity ovlivňující fety, vliv na
růst a vývoj dělohy a placenty, porod, postnatální vývoj a laktaci
matky, vliv na potomstvo (schopnost učení)
• Složitý design a náročné vyhodnocení
– Viz příklad – OECD 416 “Two-Generation Reproduction Toxicity
Study”
Chronická a reprodukční toxicita
Příklad OECD 416
Viz další strana
Příklad OECD 416 – zoom F0 generace/expozice
Příklad OECD 416 – sbírané výsledky
• - food consumption, and water consumption if
available, food efficiency (body weight gain per
• gram of food consumed), and test material
consumption for P and F1 animals, except for the
• period of cohabitation
• and for at least the last third of lactation.
• - absorption data (if available);
• - body weight data for P and F1 animals selected
for mating;
• - litter and pup weight data;
• - body weight at sacrifice and absolute and relative
organ weight data for the parental animals;
• - nature, severity and duration of clinical
observations (whether reversible or not);
• - time of death during the study or whether animals
survived to termination;
• - toxic response data by sex and dose, including
indices of mating, fertility, gestation, birth,
• viability, and lactation; the report should indicate the
numbers used in calculating these
• indices.
• - toxic or other effects on reproduction, offspring,
postnatal growth, etc.;
• - necropsy findings;
• detailed description of all histopathological findings;
• number of P and F1 females cycling normally and cycle
length;
• - total cauda epididymal sperm number, percent
progressively motile sperm, percent
• morphologically normal sperm, and percent of sperm
with each identified abnormality;
• - time-to-mating, including the number of days until
mating
• - gestation length;
• - number of implantations, corpora lutea, litter size
• - number of live births and post-implantation loss;
• - number of pups with grossly visible abnormalities, if
determined the number of runts should
• be reported;
• - data on physical landmarks in pups and other
postnatal developmental data; physical
• landmarks evaluated should be justified;
• - data on functional observations in pups and adults, as
applicable;
• - statistical treatment of results, where appropriate.
• Discussion of results.
• Conclusions, including NOAEL values for maternal
and offspring effects
• Mutagenní a genotoxické látky – zpravidla považovány za
karcinogenní
– Rakovina – velký problém pro západní civilizaci
– Oproti jiným toxickým látkám - karcinogeny jsou považovány za
„bezprahově působící“
• Neexistuje bezpečná dávka (i jedna molekula může vyvolat efekt)
• Experimentální průkaz karcinogenity – nejnáročnější studie
(celoživotní expozice, stovky zvířat v experimentu …)
– POZOR - ne vždy však existují korelace výsledků - zvíře vs. člověk
(!)
• Řada klasifikačních schémat chemických látek
– Pro karcinogeny WHO (Světová zdravotnická organizace) a její
IARC - International Agency for Research of Cancer
Hodnocení KARCINOGENITY
http://www.iarc.fr
• Group 1: The agent (mixture) is carcinogenic to humans.
(2015 – přidány “uzeniny”)
• Group 2
– Group 2A: The agent (mixture) is probably carcinogenic to humans.
– Group 2B: The agent (mixture) is possibly carcinogenic to humans.
(2015 – přidáno “červené maso”)
• Group 3: The agent (mixture or exposure circumstance) is
not classifiable as to its carcinogenicity to humans.
• Group 4: The agent (mixture) is probably not
carcinogenic to humans.
IARC klasifikace
Group 1 (Carcinogenic to humans) Group 2A (Probably carcinogenic)
Příklad
Karcinogenita cytostatických (protinádorových) léčiv
Risk / Benefit analýza  i přes vysoká rizika: využití carcinogenů jako léčiva
Biologické modely
2 – Alternativy k in vivo testům s obratlovci
Alternativy k testům s obratlovci
• Obratlovci in vivo (celá zvířata)
– Řada etických a praktických (finančních) limitací
• Náhrada in vivo experimentů
koncept "3R"
– Reduction (Snižování),
– Refinement (Zmírňování),
– Replacement (Nahrazování)
 Alternativní metody
– ex vivo (orgány zvířat)
– in vitro (buňky, buněčné linie, enzymy …)
Výhody alternativních metod
• snižování počtů zvířat
• mechanistické metody (poznání biochemických principů – např.
"dioxinová" toxicita, „inhibice acetylcholinesterázy“ u pesticidů)
• rychlejší, levnější, možnost hodnocení více vzorků
Testování toxicity – alternativy k in vivo experimentům s obratlovci
• Snaha o snižování počtů zvířat (nahrazování testů in vivo)
Alternativní přístupy v toxikologii
• ex vivo (orgány zvířat)
• in vitro (buňky, buněčné linie, enzymy …)
• in silico
• Cílem je naplnění principu 3R
• Reduction – Refinement – Replacement
• Dosažení 3R: nové přístupy v legislativě a v praxi
– Omezování počtů zvířat v in vivo testování
– Zlepšování vypovídací hodnoty testů podle nových poznatků
– Nahrazování in vivo testů alternativami (in vitro, QSAR)
• Uplatňování 3R je obecnou politikou
• Musí být reflektováno při tvorbě nových zákonů
– Je zohledněno např. v REACH
– EU financuje aktivity validací alternativních metod pro regulační toxikologii atd.
Příklad – „Reduction“
Pro málo toxické látky - není třeba testovat a hledat LD50 (min 30 zvířat)
Nově se uplatňuje „Stupňový“ (Tiered) přístup
• Mezinárodní agentury pro validaci alternativních postupů
• Sledují principy „3R“
– ICVAM (USA)
– EU: https://eurl-ecvam.jrc.ec.europa.eu/
• The European Union Reference Laboratory for alternatives to animal
testing (EURL-ECVAM)
• Časopis ATLA (Alternatives to Laboratory Animals)
• Poskytují (zdarma ke stažení) kompletní návody na validované postupy
(ověřené), které splňují 3R.
• Jejich využití standardizačními agenturami (OECD) je jen částečné
– proto nejsou často užívány v praxi průmyslem
Alternativní metody testování toxicity
http://ecvam-dbalm.jrc.ec.europa.eu/beta/
http://iccvam.niehs.nih.gov/
Seriozní projekty podpory alternativních metod
TOXIKOLOGIE - http://alttox.org
Seriozní projekty podpory alternativních metod
EKOTOXIKOLOGIE - http://www.euroecotox.eu
Seriozní projekty podpory alternativních metod
EKOTOXIKOLOGIE – databáze testů
http://projects.cba.muni.cz/euroecotox/
Alternativy 1 – in vitro metody
Př: ECVAM - validovaná in vitro technika hodnocení embryotoxicity
Alternativy 2 – EMBRYONÁLNÍ testy(není považováno za in vivo)
CHEST test
(Chick Embryotoxicity Screening Test)
- Injekce testované látky do vyvíjejícího
se vajíčka
 Hodnocení malformací
Alternativy 3 – in silico modely a QSAR
• Využití informací o biologické aktivitě (toxicitě) u existujících látek 
predikce pro neprostudované chemikálie
• Mnoho různých přístupů (matematické, statistické …)
• Příklad: OECD QSAR Toolbox www.qsartoolbox.org
Bezpečnost chemických látek pro prostředí
EKOTOXIKOLOGIE
Rovnováha ekosystému a význam potravních sítí
• Věda s řadou aplikací, jejímž cílem je racionálně chránit EKOSYSTÉM,
populace a společenstva organismů
(na rozdíl o toxikologie – předmětem je ochrana jednoho druhu = člověk)
• Ekosystém – složitá struktura a funkce bioty
• Nutná je ochrana všech stupňů (trofické úrovně)
– Producenti (řasy, rostliny …)
– Konzumenti různých řádů (bezobratlí, obratlovci)
– Dekompozitoři / destruenti (mikroorganismy)
• Nelze otestovat účinky na všechny druhy
– existují „modely“ = zástupci významných skupin (trofických stupňů)
• Hodnocení ekotoxicity – podobné principy jako toxikologie
– LC50 (letální koncentrace 50), EC50 (efektivní koncentrace 50 – např. reprodukční toxicita)
- NOEC – bezpečná hladina („no observed effect concentration“)
EKOTOXIKOLOGIE - úvod
STANDARDIZOVANÉ
TESTY
(např. Vyžadované pro REACH)
Řasové testy toxicity
Řasy
Selenastrum capricornutum
Scenendesmus subcapitatus
Sc. quadricauda
Chlorella vulgaris
Příklady modelů hodnocení – Ekotoxikologické biotesty
Producenti
- ve vodě
- v půdním prostředí
Toxicita pro rostliny (terestrický ekosystém)
Využívají se zástupci dvou velkých skupin:
•jednoděložných (např. ječmen)
•dvouděložných (např. salát, hořčice, bob)
Daphnia magna
Artemia salina
Ceriodaphnia dubia
Gammarus Chironomus riparius
Konzumenti – bezobratlí – vodní prostředí
Živorodka duhová (Paví očko)
Poecilia reticulata Zebřička - Danio rerio
(syn. Brachydanio rerio)
Karas (zlatá forma) Střevle - Pimephales promelas
Pstruh
Konzumenti – obratlovci – vodní prostředí (ryby)
Experimentální uspořádání
testování ekotoxicity ve vodním prostředí
Alternativní testy (k testům s obratlovci) v ekotoxikologii
EMBRYONÁLNÍ testy
- Také v ekotoxikologii se aplikují principy 3R –
snaha o nahrazování testů s dospělými
obratlovci (ryby, obojživelníci).
- Alternativní testy v ekotoxikologii:
- ZFET Zebrafish Embryotoxicity Test
(validace dle OECD a ISO)
– FETAX Frog Embryo Teratogenesis Assay Xenopus
(alternativa testů teratogenity, validace v USA - ASTM )
ZFET
- Zebřička, zebrafish (Danio rerio)
-Obecně velmi významný modelový biologický organismus (!)
- Indukce páření rozsvícením (fotoperioda)
- Experimenty s vajíčky až embryi - vyhodnocení kulení, přežívání, malformací
- do 4 dnů: ryby se vyživují z vaječného vaku
FETAX test
- Hormonální stimulace žab X. laevis
 vajíčka
- Expozice oplozených vajíček
- 96 hodin kompletní vývoj embrya
Příklad – vliv herbicidu – paraquat
Kontrolní embryo Malformace páteře
• Snadná kultivace, krátký generační čas, jednoduché
uspořádání (jediná membrána), jednoduchý genetický aparát
• Využití při testování „bezpečnosti“ látek (i jiných vzorků –
extrakty z potravin …)
– rychlé (skreeningové) testy akutní toxicity
• MICROTOX
– Testy na genotoxicitu - sledování poškození DNA
• Amesův test
BAKTERIE – významný model v hodnocení chemikálií
TEST AKUTNÍ TOXICITY – MICROTOX
- mořská luminiscenční bakteri Vibrio fisheri
- krátkodobá expozice testované látce (5-30 min)
- sledování změn přirozené luminiscence – odpovídá toxicitě
- uspořádání:
* kyvety (zkumavky), stanovení v luminometru
* mikrodestičkové
Amesův test
Test na reverzní mutace se Salmonella typhimurium
- Původní kmen neroste na živném médiu
- Látka vyvolá (reverzní) mutaci -> bakterie rostou
Využití ekotoxikologických modelů
1 (v praxi nejdůležitější)
Prospektivní testování látek
 odvozování limitů
(průmyslové chemikálie, POR, léčiva…)
2 (méně časté)
Testování kontaminovaných vzorků
Např. vytěžené sedimenty z rybníků
Významná toxicita
 nelze použít na půdu jako hnojivo
Příklad toxicita sedimentů
pro klíčení hořčice
Regulace
Geneticky Modifikovaných Organismů (GMO)
• Zákon 153/2000
• Vyhlášky 372, 373, 374/2000 MŽP
• Definice:
– Organismus
• biologická jednotka (buněčná nebo nebuněčná)
schopná rozmnožování nebo přenosu dědič.
materiálu včetně virů
– GMO
• organismus (kromě člověka) změněný gen.
modifikací
GMO v ČR
• Co je Genetická modifikace: ?
– rekombinantní techniky vytvářející nové kombinace DNA - vložení
nového úseku jakýmkoliv způsobem do NK, plazmidu, vektoru ...
– techniky zavádějící dědičný materiál připravený mimo
organismus do organismu (mikroinjekce, mikroenkapsulace ...)
– techniky buněčné fúze, hybridizace buněk (!produkce
monoklonálních protilátek)
• Co není Genetická modifikace?
– oplození in vitro
– bakteriální konjugace a všechny podobné přirozené procesy
– indukce polyploidie a haploidie
– mutageneze
– křížení
Zákon o GMO
• Předběžná opatrnost
– stále málo prostudováno
– neznáme možné důsledky vnášení do prostředí,
například:
• přímé nebo nepřímé škodlivé působení na člověka, zvířata,
rostliny
» onemocnění (GM bakterie)
» alergizace, toxicita
• vliv na dynamiku populací a genetickou rozmanitost
• omezení možnosti léčby (rezistence vůči ATB)
• účinky na biogeochemické procesy (fixace dusíku, koloběh
uhlíku ...)
Proč regulovat GMO?
Příklad
– GM kukuřice s geny pro „Bt“ toxin z Bacillus thuringiensis
- Toxiny působí proti škůdcům
? NEGATIVNÍ působení Bt z opadaných listů na biotu v půdě/vodě ?
• Hlavní orgán: Ministerstvo ŽP, které registruje:
– seznamy uživatelů (právnické osoby)
– seznamy GMO
• pro uzavřené nakládání
• pro vnášení do prostředí (experimentální hodnocení v
prostředí)
• pro vnášení do oběhu (povoleno pro obchodování)
• Další orgány
– ČIŽP, celní orgány, orgány veterinární správy, ÚKZÚZ,
SZÚ, ÚSKVBL, ČZPI
Regulace GMO v ČR
• REGISTRACE
– Registrovaný uživatel je v seznamu vedeném MŽP
– Složitá forma žádosti - řada požadavků
• př. přesná definice genetické změny pro účely identifikace...
• popis pracoviště, havarijní plány
– Pověřené osoby (vzdělání, praxe ...)
– Odborný poradce
• Před zápisem do seznamu je nutné provedení
analýzy rizika a kategorizace konkrétního GMO
– popis náležitostí je ve vyhlášce
Povinnosti uživatele GMO
• Po provedení analýzy rizika se GMO zařadí do kategorie
– A - bez rizika nebo s min. rizikem škodlivého působení
– B - riziko, které může být odstraněno obecně známými
opatřeními
– C - riziko, které může být odstraněno jen zvláštními náročnými
zásahy
– D - riziko, které zanechává trvalé následky a nemůže být zcela
odstraněno
• Podle kategorie rizika je nutno zabezpečit provoz zařízení
– vybavení
– provozní řád (režim SLP)
• identifikace, osoby, seznam a popis pracovních postupů, výčet GMO
a jejich počet, zásady vedení evidence o provádění sanitace,
hygiena, vedení dokumentace ...
• opatření pro případ havárie - speciální havarijní plán
Hodnocení rizik GMO
• PLÁN ETAPY
– účel, údaje o organismu, osoby, specifikace materiálu, postupy
nakládání, likvidace, odpady
– schválení odborným poradcem
• Provozní deník (každý zápis s podpisem)
– plán etapy, průběh etapy
– primární údaje (!)
– zápisy o kontrolách
• Závěrečná zpráva etapy
• Průběžná archivace a reporting  MŽP
Nakládání s GMO (dokumentace, principy GLP)
Závěrem
GLP: Good Laboratory Practice; GCP: Good Clinical Practice; GMP: Good
Manufacturing Practice; GQP: Good Quality Practice; GVP: Good Vigilance
Practice; VP: Pharmacovigilance
PHARMACEUTICAL PRODUCT LIFE CYCLE AND REGULATIONS
QUALITY ASSURANCE SPANNING THE ENTIRE PRODUCT LIFE CYCLE