Detekce protilátek treponemové infekce pomocí imunochromatografického kazetového testu

Trepomena pallidum-původce syfilis

Vr. 2012 hlášeno dalších 12 milionů nemocných (WHO)

Přenos: pohlavní styk, z matky na plod, krevní transfuze, transplantace

Tvorba Ab: 2 týdny trvá vytvoření IgM, 2 – 3 týdny IgG

Ab jsou zaměřené proti fosfolipidovým Ag na povrchu T. Pallidum, reakce Ab zkříženě s
kardiolipinem, který se uvolňuje, když treponema poškodí hostitelské buňky

Postup: detekce protilátek v séru

1. Krev je odebrána z prstu a zpracována s cílem získání séra nebo použita rovnou k provedení
testu.

2. 50 μl séra nebo celé krve se nanese na místo v kazetě označené šipkou.

3. Test probíhá 15-60 min. V případě použití celé krve se 1 min po aplikaci vzorku přidá
jedna kapka Chase pufru do stejného místa jako vzorek.

4. Vyhodnocení výsledků odečtením vzniklých precipitačních proužků (Obr. 1).

Obr. 1: Interpretace výsledků:


pozitivní: rudý proužek se objeví jak na kontrolním panelu, tak na pacientově panelu

negativní: rudý proužek se objeví pouze v kontrolní části

neplatný: nikde se neobjeví rudý proužek

Výsledky:

Vzorek krve projde během inkubace všemi částmi kazetového testu. Po cca 15 min dojde k vytvoření
zřetelného proužku v kontrolní části testu (Obr. 2).



Obr. 2: Kazetový test pro detekci protilátek proti Treponema pallidum s viditelným červeným
proužkem v kontrolní části. Pacientova část je prázdná, protože testovaný vzorek neobsahoval
protilátky proti T. Pallidum, které by se mohly navázat na zde imobilizovaný antigen.