Jak pracovat s mikroskopy Olympus V laboratoři lékařské mikrobiologie budete pracovat s: •Mikroskopy Olympus CX-31 •Mikroskopy Olympus CX-33 •Na každém stole jsou dva mikroskopy. Nepracujte bez vyzvání s demonstračními mikroskopy (pod tabulí a na bočním stole!) •Je důležité žádný mikroskop nepoškodit •Na následujících dvou obrazech je ukázána práce s oběma mikroskopy. V detailu je pak už představen jen Olympus CX-31, ale pochopitelně práce s CX-33 je podobná olympus_cx31 CX-31 •Okulár s čočkou (10×) •Objektivy •Mikroskopický stolek •Kondenzorová clona •Regulátor pozice •Lampa s polní clonou •Regulátor světla •Mikrošroub a makrošroub Vypínač Olympus CX-33 •Okulár s čočkou (10×) •Objektivy •Mikroskopický stolek •Kondenzorová clona •Regulátor pozice •Lampa s polní clonou •Mikrošroub a makrošroub •Regulátor světla •Vypínač je na druhé straně Přepínač mezi objektivem a obrazovkou olympus_cx31 Části mikroskopu Olympus – 1: •Makrošroub • • • •Mikrošroub Části mikroskopu Olympus – 1: •Makrošroub: nikdy ho nepoužívejte, když se díváte do mikroskopu! Používejte pouze, když se strany kontrolujete, že objektiv je v bezpečné vzdálenosti od preparátu •Mikrošroub: i mikrošroub musíte kontrolovat ze strany, pokud posouváte objektiv dolů (¯). Jen při posouvání nahoru () je možno se dívat do okuláru olympus_cx31 Části mikroskopu Olympus – 2: •Okuláry • • •Vypínač • • •Regulátor světla U CX-33 je regulátor světla tady: Části mikroskopu Olympus – 2: •Okuláry nevyžadují vaši péči, nesnažte se je čistit nebo s nimi nějak manipulovat. Zvětšují desetkrát. •Vypínač: po práci s mikroskopem vždy mikroskop vypněte! •Regulátor světla: obvykle ho nebudete potřebovat (používejte spíše kondenzorovou, případně i „polní“ clonu, viz dále) olympus_cx31 Části mikroskopu Olympus – 3: •Kondenzorová clona • •Lampa s „polní“ clonou Části mikroskopu Olympus – 3: •Kolektorová a „polní“ clona: čím více zvětšuje objektiv, tím více světla potřebujete. K regulaci světla užívejte regulátor osvětlení i obě clony. Posun napravo – méně světla, posun nalevo – více světla. U kondenzorové clony můžete také nastavit její hodnotu na číslo uvedené na objektivu, který právě používáte. (U Leiky je přímo uvedeno, pro který objektiv je daná hodnota clony určena.) Olympus-BX41-upright-life-science-microscope1 Světlo + Světlo – [USEMAP] Poznámka: Köhlerovo osvětlení •Existuje také sofistikovaný přístup, kterým získáte optimální, tzv. pravé Köhlerovo osvětlení. Zpravidla není nezbytně nutné, pokud je mikroskop dobře nastaven, stačí intuitivně pomocí clon upravit osvětlení v závislosti na použitém objektivu. Zájemci se nicméně mohou o Köhlerově osvětlení poučit například zde: Köhlerovo osvětlení na stránkách PřF UK v Praze Části mikroskopu Olympus – 4: •Revolverový měnič objektivů • •Kondenzor • • • • • •Regulátor pozice bx41_d Části mikroskopu Olympus – 4: •Kondenzor: nemanipulujte s ním prosím, pokud opravdu přesně nevíte, k čemu slouží a jak se používá •Regulátor pozice vám umožní „cestovat“ po preparátu •Revolverový měnič objektivů •Použijte 100× zvětšující objektiv pro pozorování barvených preparátů (Gram, Giemsa, Trichrom) a za použití imerzního oleje •Použijte 4×, 10×, 20× či 40× zvětšující neimerzní objektivy pro pozorování nativních preparátů (včetně metod dle Fausta a Kato v parazitologii). U těchto objektivů se nepoužívá imerzní olej! Použití imerzního oleje •NIKDY NEPOUŽÍVEJTE IMERZNÍ OLEJ U NEIMERZNÍCH OBJEKTIVŮ!!! •Používáte-li imerzní olej s imerzním objektivem, je nezbytné objektiv po použití vyčistit Čištění mikroskopu •Po použití mikroskopu je potřeba očistit neimerzní objektivy, jsou-li znečištěné. Imerzní objektivy je potřeba očistit vždy, a to benzínem a gázou. Nepoužívejte pro čištění objektivů čtverečky filtračního papíru! Ty slouží jen k čištění mikroskopického stolku (= to je plochá část mikroskopu, na kterou umisťujete sklíčka) Vyhazování/čištění preparátů •Preparáty vyrobené vámi je třeba po použití odmrštit do desinfekčního roztoku na sklíčka •Preparáty již připravené na začátku praktika je potřeba očistit (viz dále) a umístit zpátky do původní Petriho misky Jak očistit preparát, aniž byste ho zničili •Očistěte sklíčko důkladně ze spodní strany benzínem a filtračním papírem •Z horní strany proveďte totéž pouze tam, kde není viditelný preparát •V části s preparátem pouze odsajte přebytečný olej. Nepohybujte papírem proti sklíčku, poškodili byste ho nebo dokonce i úplně zničili! Co je třeba udělat po mikroskopování •Vypněte mikroskop. Pokud jste pracovali s počítačem, vypněte i ten. •V případě potřeby očistěte objektiv(y) •V případě potřeby očistěte mikroskopický stolek •Mikroskop zakryjte protiprachovým obalem •Vyhoďte nebo očistěte preparát Hlavní mikroskopické metody v lékařské mikrobiologii Sušení a fixace Krycí sklíčko Imerzní systém Nativní preparát ne ano ne Barvené preparáty ano ne ano Sušení, fixaci a všechny další procedury při přípravě preparátu se naučíte v prvních dvou prakticích. Zkontrolujte si, že jste alespoň ty nejpodstatnější instrukce pochopili správně •K tomuto tématu patří také odpovědník „číslo 0“ Vyplňte ho prosím. Úspěšné vyplnění odpovědníku je podmínkou práce v prvním praktiku. CX-33 a obraz na monitoru •Zapněte počítač •Klikněte na ikonu „QuickPHOTO CAMERA“ •Klikněte na Soubor → Otevřít ovládací panel snímacího zařízení •Najděte a zaostřete preparát (můžete přepínat mezi obrazem v okuláru a na monitoru) •Až bude váš obraz v pořádku, klikněte na „Snímat“, abyste obrázek mohli ukázat spolužákům a učiteli •Klikáním přepínáte mezi obrazem online a nasnímanými obrazy •Na konci obrázky neukládejte • • Na setkání s vámi v prvním praktiku se těší Vaši učitelé