Parazitologie Výzkum cizopasníků v akvatickém a terestrickém prostředí Prof. RNDr. Milan Gelnar, CSc. gelnar@sci.muni.cz I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5281.jpg Vítejte na pracovišti oddělení parazitologie UBZ Diverzita cizopasníků Výsledek obrázku pro hořavka duhová Výsledek obrázku pro synodontis multipunctata Desmodus.jpg Výsledek obrázku pro adult trematode Výsledek obrázku pro Giardia Výsledek obrázku pro Anisakis Babesia lions Výsledek obrázku pro Cymothoa exigua Výsledek obrázku pro acanthocephala fish Výsledek obrázku pro Eudiplozoon nipponicum Schistocephalus Parazitologie – představení pracoviště •Fascinující obor umožňující nejširší multidisciplinaritu •Evoluční ekologie a molekulární interakce cizopasníků • •Expedice za parazity do celého světa – Afrika, Amerika, Antarktida, Asie, Evropa • • milan8 Macr5 Haptor SP6 DSC06543.JPG cid:4B3B5FE3-B51F-4298-BA41-932870666931 Parazitologie - lidé •Prof. RNDr. Milan Gelnar, CSc. •Prof. RNDr. Andrea Vetešníková -Šimková, PhD. •Prof. MVDr. Iva Dyková, DrSc. •Prof. MVDr. David Modrý, PhD •Doc. RNDr. Andrea Bardůnek – Valigurová •RNDr. Eva Řehulková, PhD •MVDr. Ivona Foitová, PhD DSC06560.JPG I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_4933.jpg DAV_3587.jpg C:\Users\para\Desktop\ZK\IMG_20161122_132124_1.jpg Spolu s svým symbiontem I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5132.jpg I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5187.jpg I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5087.jpg I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5123.jpg Mgr. Kateřina Francová, PhD Mgr. Iveta Hodová, PhD RNDr. Kristýna Civáňová, PhD Mgr. Mária Seifertová, PhD Hádej, hádej, hádači ? I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_4982.jpg Naši studenti DSP (pouze část) Celkem na parazitologii: cca 20 doktorandů a postdoků Z těchto zemí: Alžír, Anglie, Ukrajina, Srbsko, Slovinsko, Slovensko, Bangladéš, ČR V minulosti: Rusko, Mexiko, Brazílie, Čína, Francie, Belgie, Chahrazed Radka Nikol Tomáš Vadym I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_4963.jpg Pracovny oddělení parazitologie UBZ – tým biochemie I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5110.jpg I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5010.jpg Naše naděje J Mgr. Tomáš Tyml, PhD –(FLA) – amfizoické améby, University of Berkeley, USA Mgr. Nikol Kmentová, PhD – Tanganyika - evoluční ekologie Monogení, Hassel University, Belgie Mgr. Michal Benovics, PhD – cizopasníci endemických druhů ryb jižní Evropy - Široká mezinárodní spolupráce: Irán, Irák, Turecko, Řecko, Srbsko, Chorvatsko, Itálie, Francie, Španělsko, Portugalsko, Maroko … (Zapojení Bc. studentů viz níže) Co se u nás naučíte ? Co je cílem bakalářské práce ? 1.Analyzovat a pochopit vybraný vědecký problém 2.Naučit se a použít vhodné metody vědecké práce 3.Samostatnou prací získat vlastní a originální výsledky (mgr.) 4.Výsledky vyhodnotit a přiměřeně interpretovat 5.Sepsat rukopis své první vědecké práce 6.Prezentovat svou práci před odbornou komunitou 7.Obhájit své výsledky a expertízu v diskuzi s odborníky a kolegy 8. Jak na to půjdeme ? Komplexní studium interakcí mezi parazitem a hostitelem Jaké jsou možnosti zapojení Bc. studentů ? Co nabízíme ? •Akvatický ekosystém: • •Diverzita vybraných skupin cizopasníků ryb (protista – FLA, monogenea – Dactylogyrus, Gyrodactylus, Diplozoon – systematika a taxonomie - např. Afrika) •Identifikace nových druhů patogenních agens •Molekulární fylogeneze, koevoluce, fylogeografie cizopasníků •Analýza biodiverzity cizopasníků endemických druhů ryb •Studium rozmanitosti cizopasníků obojživelníků, především žab •Evoluční ekologie modelových skupin cizopasníků •Analýza MHC genů, molekulární interakce mezi P a H •Imunoekologie, imunogenetika - interspecifické hybridizace •Analýza transkriptomu, genová exprese • • •Terestrický ekosystém • •Adaptace k parazitismu, funkční morfologie a ultrastruktura parazita (gregariny, cryptosporidie, opaliny) •Strategie invaze a přichycení parazita k hostitelské buňce/tkáni •Cytoskelet a buněčný pohyb parazita •Biodiverzita a fylogeneze výtrusovců •Histopatologie, cytologie, (imuno)cyto- a histochemie ð světelná (+ fluorescence) a elektronová mikroskopie •Komplexní studium A. cantonensis - invazní patogen lidí a zvířat. Infekce má významný dopad na savce a ptáky v ostrovních ekosystémech, stejně jako na zdraví lidí v JV Asii. •Problematika parazitárních infekcí působených prvoky a helminty u afrických primátů (gorily, šimpanzi a paviáni) •Paraziti primátů JV Asie a jejich sebemedikace •Výskyt a druhová diverzita parazitů rodu Nycticebus • • • • • • • • • Jakými metodami pracujeme ? Co se u nás můžete naučit ? •Pracovní skupiny: • •Organismální a strukturní diverzita monogeneí •Evoluční ekologie cizopasníků •Molekulární interakce, imunogenetika a fylogeneze •FLA •Adaptace k parazitismu, funkční morfologie a ultrastruktura parazita •Invazní biologie patogenů člověka a zvířat •Parazitárních infekcí působených u afrických primátů (gorily, šimpanzi a paviáni) •Sebemedikace primátů JV Asie • • •Naše laboratoře a know how: • •Velká parazitologická laboratoř (pitevna) •Laboratoř speciální mikroskopie •Laboratoře molekulární parazitologie •Laboratoř histologická, příprava pro SEM a TEM •Laboratoř biochemie •Laboratoř pro kultivace tkáňových kultur (FLA) •Laboratoř pro práci s infekčními patogeny – sérologie •Chovy hostitelských ryb •Technologické zázemí pracoviště •Partneři a externí spolupracovníci • • „Čerstvě“ obhájené bakalářské práce - náhodný výběr • •Nikol Kmentová, 2015: Monogenean parasites from deepwater Lake Tanganyika cichlids: reduced specificity or hidden diversity ? •Kristýna Peterková, 2016: Monogenea čeledi Diplozoidae Palombi, 1949 – současný stav a persketivy •Jitka Fojtů, 2016: Endoparazitická monogenea (Platyhelminthes): druhová diverzita a spektrum hostitelů •Daniela Slamková, 2016: Využití laboratorních technik ke studiu reprodukční soustavy u monogeneí se zaměřením na čeleď Diplozoidae •Klára Nováková, 2016: Diverzita monogeneí sladkovodních ryb střední Evropy •Kateřina Skočovská, 2017: In vitro testování účinnosti vybraných léčiv na zástupce třídy Monogenea •Vojtěch Dlapka, 2017: Paraziti endemických kaprovitých ryb Apeninského poloostrova •Eliška Fuchsová 2018: Biologie živorodých monogeneí rodu Gyrodactylus ve světle současných znalostí • • I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5261.jpg Velká parazitologická laboratoř I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5145.jpg Laboratoř speciální mikroskopie Aplikace různých mikroskopických technik obrazky2 Phase contrast microscopy – viviparous gyrodactylids DIC according to Nomarski 50 µm Haptor SP6 Dorsal anchor Ventral anchor Ventral anchor Dorsal anchor Dorsal bar Ventral bar Hooks • milan8 milan9 clamps STA_5518_stitch Olympus CellR - motorizovaný invertovaný mikroskop se systémem rychlé fluorescence pro sledování procesů v živých buňkách dipantvyvody100a adGMzup100 diporpanovasvorka Haptor20X20 juvkrizenipri20 adhltanup CLSM - Confocal laser scanning microscopy konfokal • konfokal3 CLSM Macr5 Th Thylacicleidus nmacrogyrodactylus Anatomie a topografie povrchu těla Afrodiplozoon polycotyleus I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5142.jpg Vědecká kresba morfologických struktur parazitů z mikroskopu a jejich digitalizace IMG_0030 I. Organismal and structural diversity - species identification Drawings: microscope Olympus BX 50 equipped with a phase contrast optics and drawing tube; Measurements: Digital Image Analysis • Obsah obrázku stůl, interiér, vsedě, papír Popis byl vytvořen automaticky Základ je kvalitní fixace parazitologického materiálu – mikroskopický preparát Pečlivá fixace a preparace cizopasníků Řehulková Řehulková et al. 2018, ABC Taxa 533-15-10k6(60x1)-kopie 533-15-10h6(60x1)-kopie 533-15-10k5(60x1)-kopie-vagina-oříznuté Nanotrema niokoloensis n.sp. Host: Citharinus citharus citharus Locality: Niokolo Koba River near Pont Suspendu Niokolo-Koba National Park, Senegal FIGURE3 Sclerotised structures of Nanotrema niokoloensis sp.nov.: va = ventral anchor, vb = ventral bar, da = dorsal anchor, I-VII = pairs of hooks, co = copulatory organ, vg = vagina Thylacicleidus serendipitus Thylacicleidus sp. 1 Thylacicleidus sp. 2 SchHak1 Kombinace různých mikroskopických technik Histology (BF) SEM Morphometry- digital image analysis Phase contrast I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\__Selar_MG_5266_detail_DIC micrskopy.jpg Histologická laboratoř, příprava vzorků pro SEM a TEM I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5114.jpg Laboratoře molekulární parazitologie I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\porteréty Budejovice\_MG_8840.jpg Experimentální chov ryb I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\foto_cerve_2015_portrety_BRNO_MU\_MG_5196.jpg Zázemí pro experimenty Electrofishing I:\ECIP propagace\ECI foto Oliver Staša\portréty BRNO_CAS\IVB CAS Brno.jpg Spolupráce s ichtyology je klíčová (ÚBO AV ČR) Africa Satellite small.jpg August 29 – September 9, 2016,Brno, Czech Republic Summer School of Fish Parasitology 2016: Parasites of Fish in Africa Department of Botany and Zoology,Faculty of Science, Masaryk University, Kotlařská 2, 611 37 Brno, Czech Republic Importance of sampling design: how to collect data on fish parasites Milan Gelnar 24249_385080824054_224827899054_3970585_6043051_n Tož vítaj synku, a gábl si přines ? Afrika 35a Národní park Niokolo Koba Senegal 2004 - 2008 bigeye-sml Výsledek obrázku pro madagascar continent Madagascar field trip (7 – 24 April 2016) Nosy Be Antananarivo Antsohihy Andovoranto Ankarafantsika Nature Reserve DSC05654.JPG Výsledek obrázku pro universite antananarivo madagascar DSC06536.JPG DSC05749.JPG DSC05941.JPG DSC05426.JPG Antsohihy Nosy Be DSC06377.JPG Andovoranto Ankarafantsika Nature Reserve DSC05348.JPG DSC05574.JPG DSC06050.JPG DSC05779.JPG Dlouholetý výzkum parazitů sladkovodních ryb v Africe (2004 – 2018) • Senegal111 Gill nets • Senegal129 Angling Osteoglossiformes: Arapaimidae Gymnarchidae Notopteridae Mormyridae Gymnarchus niloticus Heterotis niloticus Papyrocranus afer foto ryb – Blažek, Reichard Petrocephalus bovei Marcusenius senegalensis Mormyrops anguilloides Mormyrus hasselquistii Brevimyrus niger Mormyrus rume Ctenochromis horei Cyprichromis microlepidotus Eretmodus marksmithi Gnathochromis pfefferi Lamprologus callipterus Neolamprologus mondabu Ophthalmotilapia nasuta Oreochromis tanganicae x O. niloticus hybrid Spathodus erythrodon How to investigate fish for parasites ? Organismus of host fish – very complex habitat for parasites Terénní laboratoř někde v Africe J foto029 foto028 foto031 foto032 • P8280167 Mgr. Iva Přikrylová, PhD Lake Cariba, Zimbabwe Monogenean Research Group - 1997 Out of Africa Diverzita monogeneí korálových ryb - Nová Kaledonie Milan_Eva Diverzita monogenei korálových ryb Nová Kaledonie (2005 – 2011) ird Prof. Jean-Lou JUSTINE - specialista na systematiku rybích parazitů, zejména monogeneí korálových ryb Jean-Lou and baby sharks Parupeneus barberinus Parupeneus multifasciatus Parupeneus barberinoides Parupeneus pleurostigma Parupeneus spirulus Upeneus vittatus Mulloidichthys vanicolensis Parupeneus haptacanthus Mullidae Počet vyšetřených druhů/kusů: 8/21 Počet monogeneí: 500 ks R0006 Antarktida – stanice Masarykovy univerzity na ostrově J. Rosse Arktida – polární ekologie C:\Users\user\Desktop\Svalbard-prezentace\IMG_3505.JPG • Podyji_07_03 Terénní výzkumy na jižní Moravě - Podyjí • Eudiplozoon nipponicum – biologická invaze Životní cyklus SEM pootevřená ústa upr TEM senzila TEM senzila-15A-51 TEM mikrov-15A-17 TEM sval buc suc 16B-41 100 µm 10 µm SEM SEM TEM TEM TEM buccal sucker buccal sucker glandulomascular organs muscle tissue microvilli uniciliate sensilla Eudiplozoon nipponicum – topografie povrchu těla a ultrastruktura milan7 (Zurawski T.H. et al., 2001) •Acetylcholine visualised with 5-bromo-chloro-indolyl acetate Bright field Barvene preparaty juvkrizenipri20 Vizualizace oblasti srůstů párujících se jedinců Zurawski T.H. et al., 2003: Microscopic evaluation of neural connectivity between paired stages of Eudiplozoon nipponicum. J. Parasitol 89:198-200 Schematické znázornění nervového propojení mezi dvěmi heterogeními CNS cizopasníků Major neuronal pathways of the central nervous system of Eudiplozoon nipponicum adult stare foto007 RNDr. Radim Ergens, DrSc. Proč právě monogenea ? International Symposium on Fish Parasites International Symposium on Monogenea 1983 – České Budějovice, ČR 1988 – České Budějovice, ČSSR 1987 - Tihany, Maďarsko 1993 – Perpignan, Francie 1991 - Petrodvorec, Rusko 1997 – Brno, Česká Republika 1995 - Mnichov, Německo 2001 – Brisbane, Austrálie 1999 – České Budějovice, ČR 2005 – Guangzhou, Čína 2002 – Blomfontain, Jižní Afrika 2009 - Cape Town, Jižní Afrika 2007 – Viterbo, Itálie 2013 – Rio de Janeiro, Brazilie 2011 - Santiago, Chile 2017 - Brno, Česká Republika 2015 – Valencie, Španělsko 2020 (1) - Lucknow, Indie ! 2019 (20)(21) - (Brisbane), Cairns, Austrálie ? Česká ichtyoparazitologická škola – velká čtyřka RNDr. Jiří Lom, DrSc., Prof. MVDr. Iva Dyková, DrSc. RNDr. Radim Ergens, DrSc. RNDr, František Moravec, DrSc. LB007 stare foto003 Organizace prvních mezinárodních vědeckých setkání v oboru v Českých Budějovicích ! C:\Users\N. Agrawal\Desktop\4.jpg 1st International Symposium on Monogenea, České Budějovice, 1988 C:\Users\N. Agrawal\Desktop\3.jpg 3rd International Symposium on Monogenea, Brno, 1997 • 8th International Symposium on Monogenea, Brno, 2017Brno, Evoluční expanze monogeneí - obrovská morfologická strukturální rozmanitost •Typy opisthaptoru •Evoluce opisthaptoru Základní anatomie monogeneí Životní cyklus monogeneí Příklad: Strukturální rozmanitost monogeneí Studium evolučních mechanismů posilujících koexistenci kongenerických druhů 3 4 5 Šimková et al., Biol J Linn Soc 2002 Jarkovský et al. Parasitol Res 2004 Specializace niky a reprodukční izolace 1 2 DSC06560.JPG Evoluce preferované niky Arch Segment Area Šimková et al., Evolution 2006 Koevoluce v parazito-hostitelském systému 1 Obr3_Evoluce HP D:\Data\Andrea\Untitled-1.tif Šimková et al., Evolution 2004 Host-specific parasites and fish hosts koevoluceobrjednavrstva cospeciation failure to diverge duplication host switching sorting event sorting event MOLEKULÁRNÍ INTERAKCE HOSTITEL-PARAZIT NA MODELU MHC GENY – MNOHOBUNĚČNÍ PARAZITI JELCE TLOUŠTĚ Hlavní histokompatibilní komplex (MHC) u ryb: struktura a funkce Obr_3 obr_4 Ø komplex genů kódující povrchové buněčné glykoproteiny Ø vazba antigenů derivovaných z patogenů nebo parazitů a prezentace T-lymfocytům Ø T-lymfocyty = imunitní odpověď - produkcí protilátek nebo destrukcí buněk prezentujících antigen Ø MHC molekuly třídy I a II Ø funkční MHC IIB geny (DAB) – exon 2 - β1 řetězec – nejvíc polymorfní část MHC molekul – pozitivní selekce, (dS < dN), přímá interakce s antigeny derivovanými z parazitů = parazity hlavní příčina selekčního tlaku Ø Cyprinidae : DAB1 a DAB3 C:\Users\Majka\Desktop\submitted JBiogeoraphy\Figures\Figure_1rev.tif ü Potvrzení hypotézy existence několika refugií a rozdílných cest postglaciální kolonizace . ü Mikrosatelity nepotvrdily signifikantní introgresi mezi hlavními liniemi (východní a západní) v centrální Evropě. ü Fylogeografická studie jelce tlouště potvrdila expanzi západní linie ve dvou krocích, existenci sekundárního refugia na řece Rhôně během posledního zalednění a rychlou populační expanzi atlantické linie. ü Mediteránní populace vykazovaly vysokou divergenci = odlišný původ a malý podíl na celkovém genofondu jelce tlouště ve střední Evropě. VÝSLEDKY MITOCHONDRIÁLNÍ A JADERNÍ DNA Populace tvořily v obou případech několik totožných, vzájemně se nepřekrývajících skupin, což potvrdilo hypotézu existence několika refugií a rozdílných cest postglaciální kolonizace u sladkovodních evropských ryb. Mikrosatelity na rozdíl od mtDNA nepotvrdily signifikantní introgresi mezi hlavními liniemi (východní a západní) v centrální Evropě. Fylogeografická studie jelce tlouště potvrdila expanzi západní linie ve dvou krocích, existenci sekundárního refugia na řece Rhôně během posledního zalednění a rychlou populační expanzi atlantické linie. Mediteránní populace vykazovaly vysokou divergenci, což je výsledkem jak jejich odlišného původu, tak i jejich malého podílu na celkovém genofondu jelce tlouště ve střední Evropě Patterns and processes related to host hybridization Cyprinus carpio Carassius gibelio Symptoms of spring viraemia of carp virus (Rhabdovirus carpio) 89 üInterspecific hybridization üTranscriptome analyses üGene expression (especially immune genes) üParasite identification (virus quantification) P1 P2 F1P1 F1P1 F1P2 F1P2 P2 F2 Parents F1 P1 F1 F1 90 F1 generation F2 generation Diverzita helmintů bezocasých obojživelníků –Michal Benovics Čím se zabýváme? •studiem společenství parazitů u obojživelníků západního palearktu •zkoumáním diversity kosmopolitních a endemických helmintů žab •objasňováním fylogenetických vztahů mezi endemickými cizopasníky a jejich neendemickými příbuznými •ekologii a životními cykly helmintů Proč se tým zabýváme? •i navzdory klesajícím populacím obojživelníků je len málo známo o jejich cizopasnících •preliminární data naznačují, že diverzita helmintů žab je v Evropě daleko vyšší, než se původně předpokládalo •životni cykly a spektrum hostitelů některých druhů nejsou téměř vůbec známé •studiem cizopasníků můžeme odhalit další potencionální rizika pro již ohrožené taxony žab Ranidae Bufonidae Hylidae Druhová diverzita obojživelníků v západním palearktu (Dufresnes, 2018) Carlson et al., 2019 Diverzita helmintů bezocasých obojživelníků – Michal Benovics Jak metodicky postupujeme? •vzorkování žab napříč Evropou •odběr krvi a parazitologická pitva odchycených jedinců •fixace, farbení a determinace cizopasníku •molekulární analýzy – fylogeneze, kofylogeneze, populační genetické Aktuálně řešená téma: Diverzita a distribuce parazitických helmintů u vodních skokanů rodu Pelophylax na Balkáně (Bc. Zuzana Žákovicová) Diplodiscus subclavatus Haematoloechus sp. Gorgodera sp. Volné téma k řešení: Rozšíření a diverzita strongylidních hlístic u evropských zelených skokanů Parazitární manipulace hostitele v systéme cizopasník – obojživelník Kofylogenetické vztahy mezi plícními motolicami rodu Haematoloechus a jejimi hostiteli Kofylogenetické vztahy mezi hostitelsky špecifickými Monogenea a kaprovitými rybami Čím se zabýváme? •studiem diversity ektoparazitických Monogenea kaprovitých ryb •objasňováním fylogenetických vztahů mezi endemickými cizopasníky a jejich neendemickými příbuznými •testováním fylogeografických scénářů s pomocí hostitelsky specifických parazitů Kde a jak metodicky postupujeme? •vzorkování parazitu kaprovitých ryb napříč blízkym východem •fixace, identifikace a extrakce DNA z nazbíraných cizopasníků •molekulární analýzy – fylogeneze, kofylogeneze, populační genetické •rekonstrukce historické disperze hostitelů IF004 IMG_3172, Tomas 021 002a Free-living amoeba meeting Jamaica 2011 Prof. MVDr. Iva Dyková, DrSc R tab trof Model parasites group: free living amoebae Modelové organismy: gregariny, kryptosporidie a „nižší“ kokcidie ze suchozemských a vodních hostitelů (bezobratlí i obratlovce) Metodické přístupy: •terénní sběr, laboratorní chovy, in vivo a in vitro experimentální přístupy •cytologie a histopatologie, (imuno)cyto- a histochemie ð světelná (+ fluorescence) a elektronová mikroskopie; biochemické a molekulárně-biologické techniky • • • • ü ü Aktuálně řešené tematické okruhy: sAdaptace k parazitismu, funkční morfologie a ultrastruktura parazita sStrategie invaze a přichycení parazita k hostitelské buňce/tkáni sCytoskelet a buněčný pohyb parazita sBiodiverzita a fylogeneze výtrusovců Andrea Bardůnek Valigurová Diverzita a evoluce parazitických strategií u bazálních Apicomplexa Příklady výsledků ze studie buněčného pohybu a hostitelsko-parazitických interakcí u gregarin z mořských a suchozemských bezobratlých Eugregarina Gregarina garnhami ze střeva sarančete. (1) Gamont (SEM); (2) celkový a (3) detailní pohled na fluorescenční znační F-aktinu (CSLM); (4) ultratenký řez nařasenou pelikulou na povrchu parazita (TEM); (5) ultratenký a (6) histologický řez trofozoitu přichyceného ke střevnímu epitelu (Bestův karmín); (7) histologický řez gamontu klouzajícího ve střevě pod peritrofickou matrix (červená šipka) (Massonův trichrom). α-tubulin F-aktin mukron B A D C Archigregarina Selenidium pygospionis ze střeva mořského mnohoštětinatce. (A) Gamont (SEM); (B) fluorescenční značení subpelikulárnich mikrotubulů a F-aktinu (CSLM); (C) apikální konec parazita; (D) místo na střevním epitelu kde byl parazit přichycen (SEM). myonemy (F-aktin) záhyby epicytu F-aktin 1 2 3 4 5 6 7 Modelové organismy: výtrusovci (Apicomplexa) a opalinky (Stramenopila) z obojživelníků Evropy Metodické přístupy: üterénní sběr, koprologické metody, parazitologická pitva üpříprava nativních a roztěrových preparátů, histologické postupy üsvětelná mikroskopie (A, B) + fluorescence (C) a elektronová mikroskopie (D) ü ü ü ü ü ü ümolekulárně-biologické techniky Tematické okruhy k řešení: sJsou opalinky (Opalinidae) neškodní komenzálové studenokrevných obratlovců? sBuněčný pohyb a cytoskelet opalinek sNematopsis temporariae (Apicomplexa): enigmatická gregarina z jater pulců sPatologický vliv výtrusovců (Apicomplexa) na evropské zástupce obojživelníků Andrea Bardůnek Valigurová (ve spolupráci s Dr. M. Benovicsem) Jednobuněční paraziti a symbionty obojživelníků Hepatozoon v krevním roztěru Oocysty kryptosporidií (test vitality) Sporoziti kryptosporidií lezoucí po žaludeční tkáni ropuchy Opalinky v nativním preparátu B C D A Obsah obrázku text Popis byl vytvořen automaticky Příklady výsledků z předešlých studií zaměřených na výtrusovce žab 4 5 (2, 3) Oocysty kryptosporidií pod světelným mikroskopem NIC; (4) parazitovaná tkáň žaludku ropuchy pod SEM a (5) na histologickém řezu (Hematoxylin-eozin). (A-C) Makrofágy s oocystami a (D) sporozoit parazita na vlhkém roztěru (světelná mikroskopie NIC); jaterní tkán s makrofágy obsahujícími oocysty parazita na (E) histologickém řezu (Toluidinová modř) a (F) ultratenkém řezu (TEM). Eugregarina Nematopsis temporariae z jater pulců skokana Cryptosporidium fragile ze žaludku ropuchy Andrea Bardůnek Valigurová ve spolupráci s Dr. Ivou Kolářovou (PřF UK) Vliv časné imunitní odpovědi u myší opakovaně pobodaných flebotomy na průběh kožní leishmaniózy Leishmanióza - významné onemocnění člověka způsobené parazity r. Leishmania (Trypanosomatida). Leishmanie jsou přenášeni krevsajícími flebotomy, jejichž sliny mají imunomodulační účinek ovlivňující průběh leishmaniové infekce. Modelové organismy: Leishmania major, Balb/c myši a flebotomové (laboratorní chovy) Metodické přístupy: üin vivo experimentální přístupy a inokulace myší, sérologické a biochemické postupy (I. Kolářová) ühistopatologie, cytologie, (imuno)cyto- a histochemie ð světelná (+ fluorescence) a elektronová mikroskopie (A. Bardůnek Valigurová) Ušní boltce (A, B) myší neimunizovaných opakovaným sáním a (C, D) myší imunizovaných opakovaným sáním. B A C D infekce 1x sání před infekcí infekce 1x sání před infekcí Aktuálně řešené tematické okruhy: sStandardizace histopatologických a (imuno)histochemických postupů se zaměřením na tkáně ušních boltců myší ü ü ü ü ü ü ü Histologický řez ušním boltcem myši: barvení (A) Hematoxylin-eozinem a (B-C) Massonovým trichromem. Vliv ošetření tkáně dekalcifikací před zalitím do parafinu: (A-B) bez dekalcifikace (zachovaná struktura chrupavky); (C) dekalcifikace v 10% EDTA/6 dnů (poškození chrupavky). sMikroskopická analýza imunitní reakce u myší pobodaných flebotomy sAnalýza histopatologických změn a vlivu reakce u opakovaně pobodaných myší na vývoj leishmaniové infekce • Na toto téma je vedená 1 DP. V případě zájmu a po domluvě s Dr. Kolářovou lze tematický okruh rozšířit (dle aktuálního zaměření společného výzkumu). B A C Obhájené bakalářské práce: •Využití experimentálních a morfologických metod při studiu interakcí mezi hostitelem a jednobuněčným parazitem •Studium kontraktilních elementů u modelových druhů gregarin •Buněčný pohyb kryptosporidií (Apicomplexa) •Buněčné interakce a formování hostitelsko-parazitického rozhraní u mořských zástupců bazálních výtrusovců •Vliv gregarin na přežívání a vývoj potemníka moučného v laboratorních podmínkách •Kultivace kryptosporidií v podmínkách in vitro •Patologický vliv vybraných zástupců bazálních linií výtrusovců (Apicomplexa) na tkáň hostitele •Hostitelsko-parazitické interakce a způsob příjmu živin u bazálních linií Apicomplexa (Protista) Obhájené diplomové práce: •Studium hostitelsko-parazitických interakcí u žaludečního parazita Cryptosporidium muris •Buněčný pohyb a invaze kryptosporidií (Apicomplexa) •Kultivace kryptosporidií na buněčných a bezbuněčných kulturách •Buněčný pohyb eugregarin (Apicomplexa) • Aktuálně vedená bakalářské práce: •Výtrusovci (Apicomplexa) parazitující obojživelníky Evropy Aktuálně vedené diplomové práce: •Aplikace (imuno)histochemických metod na buněčný pohyb eugregarin (Apicomplexa) v podmínkách in vivo a in vitro •Vliv časné imunitní odpovědi u myší opakovaně pobodaných flebotomy na průběh kožní leishmaniózy Biologie a ekologie parazitické hlístice Angiostrongylus cantonensis •A. cantonensis je významný invazní patogen lidí a zvířat jehož zdrojem jsou krysy a potkani. Infekce má významný dopad na savce a ptáky v ostrovních ekosystémech, stejně jako na zdraví lidí v JV Asii. • •významná část vývojového cyklu probíhá v mezihostitelích a paratenických hostitelích •plži a poikilotermní obratlovci jsou významným zdrojem infekce člověka • • •cílem výzkumu do kterého se mohou zapojit i bakalářští studenti je získat detailní informace o vývoji v plžích, rybách a obojživelnících cestou experimentálních infekcí modelových hostitelů • • • • • • • • rat-silhouette-clipart-38510.png DAV_0292.jpg Prof. MVDr. David Modrý, PhD DAV_3587.jpg Diverzita a ekologie parazitů afrických primátů •tým se dlouhodobě věnuje problematice parazitárních infekcí působených prvoky a helminty u afrických primátů • •cílem výzkumu je diverzita, ekologie a hostitelská specifita •klíčovými modelovými hostiteli jsou gorily, šimpanzi a paviáni • • •bakalářští studenti se mohou zapojit do dílčích projektů založených na mikroskopické a molekulární detekci parazitů a jejich identifikaci • • • • • • • • Prof. MVDr. David Modrý, PhD PARAZITÉ PRIMÁTŮ JV ASIE A JEJICH SEBEMEDIKACE Assoc. Prof. MVDr. Ivona Foitová, Ph.D. •Co zkoumáme? •výskyt, ekologie a druhová diverzita • parazitů primátů JV Asie rodů • Pongo, Hylobates a Nycticebus • •sebemedikace orangutanů • 1. 1. \\Augusta\orangutan\Ivona\photoes for presentation\sarah IMG_0005 (90)compressed.jpg New Species Of Slow Loris Discovered In Borneo | Asian Scientist Magazine F:\CZ\Presentations\powerpoints\photoes for presentation\buck7.tif Pongobius hlava Gibbon - Wikipedia cid:4B3B5FE3-B51F-4298-BA41-932870666931 PARAZITÉ PRIMÁTŮ JV ASIE A JEJICH SEBEMEDIKACE Assoc. Prof. MVDr. Ivona Foitová, Ph.D. • •Aktuální okruhy otázek k řešení •výskyt, diverzita a molekulární analýzy veterinárně významných parazitů orangutanů, jejich rozdíly na úrovni populací •existuje vnitřní sebemedikace u orangutanů a jakým způsobem působí? (vnější jsme již potvrdili) •výskyt a druhová diverzita parazitů rodu Nycticebus • • •Metodické přístupy •koprologie, světelná mikroskopie, SEM– skenovací elektronová mikroskopie, morfometrické analýzy, molekulární analýzy, statistické analýzy behaviorálních datasetů, • •Spolupráce •UGM, Yogyakarta (Indonesia) - Dr. Wisnu Nurcahyo •Inuyama Primate Research Institute (Japan) - prof. M. Huffman • • • • • 1. F:\CZ\Presentations\powerpoints\photoes for presentation\wild orangutan-anne (1) compressed.jpg Slow lorises and climate in Java - People's Trust for Endangered Species Confused? No need, we are here with a helping hand TESTOVÁNÍ PŘÍRODNÍCH ANTIPARAZITIK Assoc. Prof. MVDr. Ivona Foitová, Ph.D. •Co zkoumáme? •antiparazitární aktivitu rostlinných složek potravy orangutanů • •Metodické přístupy •lyofilizace rostlinného materiálu, kultivace, in vitro a in vivo testování, světelná mikroskopie, SEM, histologické analýzy • • • • • • http://4.bp.blogspot.com/-5wDNdb7FMNw/T9iq6FMMIJI/AAAAAAAAAqQ/QA92iqEyOFo/s400/herbal+ingredients.j pg TESTOVÁNÍ PŘÍRODNÍCH ANTIPARAZITIK Assoc. Prof. MVDr. Ivona Foitová, Ph.D. •Aktuální okruhy otázek k řešení • •amebicidní aktivita vybraných rostlinnných extraktů/frakcí a charakterizace účinných molekul • •jaké složky potravy orangutanů mají potencionální proti parazitární efekt • a jakým způsobem působí? • • •spolupráce •University of Bergen (Norway) - prof N. Langeland •Medical University of Vienna (Austria) - prof Duchêne •CDC Atlanta (USA) - Dr. Ali Ibne • Dara Dara leaf branch F:\ÚTZ-3\vybrané fotky\IMG_3076.JPG VÝSKYT NÁLEVNÍKŮ U OBOJŽIVELNÍKŮ Assoc. Prof. MVDr. Ivona Foitová, Ph.D. •Aktuální téma k řešení •výskyt nálevníků kmene Ciliophora u evropských •zelených skokanů • •Metodické přístupy: •koprologie, světelná mikroskopie, barvení protargolem, •SEM, molekulární analýzy • •Spolupráce: •Universita Komenského (Slovensko) - Dr. P. Mikulíček •MU, Brno - Dr. M. Benovics • • • Assoc. Prof. MVDr. Ivona Foitová, Ph.D. VEDENÍ TĚCHTO OBHÁJENÝCH ZÁVĚREČNÝCH PRACÍ NA MU •Výskyt a molekulární analýzy druhu Balantioides coli (Malmsten, 1857) u divokých bornejských orangutanů Pongo pygmaeus (Linnaeus, 1760) •Balantidium coli u primátů •Paraziti gastrointestinálního traktu volně žijících gibonů (Hylobates albibarbis) z Kalimantanu •Diagnostika malárie u lidoopů •Biologicky aktivní látky s antiparazitárním účinkem •Vliv vybraných ekologických faktorů na parazitární infekci sumatránského orangutana (Pongo abelii) na dvou odlišných lokalitách jeho přirozeného výskytu •Paraziti gastrointestinálního traktu orangutanů (Pongo abelii) • KONZULTACE OBHÁJENÝCH ZÁVĚREČNÝCH PRACÍ NA MU •Analýza asociací parazitárních společenstev, potravních a behaviorálních dat u populace orangutanů Co vám můžeme slíbit ? Perspektiva kvalitní a originální vědecké práce v mezinárodním týmu ! Pište na mail: gelnar@sci.muni.cz simkova@sci.muni.cz Mikulášek Mireček Kristínka Adrianka Nelinka Systematická péče o budoucí generaci parazitologů Obsah obrázku osoba, fotka, pózování, skupina Popis vygenerován s velmi vysokou mírou spolehlivosti Děkuji za pozornost