NUCLEAR MAGNETIC RESONANCE S icr97 rad s_1T_1 % v pTTrodě e 1/2 -182,000 100 1/2 0,277 99,98 13C 1/2 0,067 1,1 14N 1 0,019 99,6 15N 1/2 -0,027 0,4 17o 5/2 -0,036 0,04 19p 1/2 0,252 100 31p 1/2 0,108 100 129Xe 1/2 -0,075 24,4 Počet stacionárních stavů =25+1 kvadrupolárnf jádra (prfliš rychle se vracf do rovnováhy) vzácné izotopy (vyžadují obohacení proteinů během exprese) Energie magnetického momentu v poli U = -ji ■ B = — \ii\\B \ cosO á B 7L M = (ßi + Č2 + ßz + ßA + ßs + ßö H----)/^ Magnetizace Magnetické momenty v magnetickém poli Vertikálně polarizované magnetické momenty ve vertikálním magnetickém poli Sklopení vektoru magnetizace Horizontálně polarizované koherentní magnetické momenty ve vertikálním magnetickém poli i:. /{.-ft, '' i ,': ' ' ffř f j .1......;.^-*-ŕ«---ŕ-r---:--i 'U"T"ŕi"-Li / i : i : i : ííí <: » : .' : .....* ľ (•:■»: • : ..,*- :...... • \ . : . : . i.. . - * J . -■- * » I -------V." i*. ••: ' '■ .-*»■. i»: j-r ' : \- -:. . « : ■ . . : . '. tii '\'-'\\. * í .i \W' .í-— v VV v. * s ' ■ V*. V. • ■ .....\- ■ .. j - »■ ■ ■ : 1 ■ i*í ■j----i" : i : • : ■ ;' :. J : : :r\.....: : ; -yä \te-Cy> \\\ W 5í i ŕ"r;/n:f .....-.; ' • '.'í' .,.'.-•»r*--'; 'i . » . • . »V». .» .*# r "^"-9?.....í.-' / -V :/*/ .-..j.....u. /: JJ./--&•'/"?:# ■ ,■ • • v--— .•».•%* ■ í / / / :•' /-'I! : •'* .' v .•■;•-•.-.'•».•' > .súr • • /• / *• •-i'.•*í* ■• ' r' .•'.*' --'^'ýď^** -CH=0 -C=CH- -CH2-0- -CH2-C=0 -CH2-C- (CH3)4Si H2 H + I I I I 499.9985 499.9990 499.9995 500.0000 MHz -CH=0 -C=CH- -CH2-0- -CH2-C=0 -CH2-C- (CH3)4Si H2 H + I I I I 99.997% 99.998% 99.999% 100.000% -CH=0 -C=CH- -CH2-0- -CH2-C=0 -CH2-C- (CH3)4Si H2 H+ I I I I 0 ppm 10 ppm 20 ppm 30 ppm -/^elektron * %dro * ^(elektron v jádře) J (C-H) 130-230 Hz J (N-H) 90 Hz J (C-C) 35-55 Hz J (N-C) 10-15 Hz J (H-C-H) 14 Hz J (H—C—C—H) 0—14 Hz závisí na torzním úhlu O 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 t/s 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 -3000 -2000 -1000 0 1000 2000 3000 f/Hz 1 1 J 1 1 1 1 1 1 -1500 -1400 -1300 -1200 -1100 -1000 f/Hz I_I_I_I_I_I 2300 2400 2500 2600 2700 2800 f/Hz Acetaldehyd Methyl acetaldehydu Hänschen klein P GET ONE 3N ]H H5XFS, H ELO DV "HflENSÖCN KLEIN" L£-ftJB 5FILE EKtlCO IR H CT raiMT FFEGJU FILTR SCANS ĽĽHľTi' fiCBTH PÜ FĚPDJ FU1 lehlľ üefrü ÜE5ET DÍHLĽ IRFRÜ i IRGET i mam i IRfiPU i IKHP] i BiflPĚ i D?fiN£ i TRHUC i TRFRŮ i TREET i TRUTH i TR B PH i TRBP1 i TRAPS i TftíNS CTEHP CSPED SLYNT RE50L NNBHD EF OF PF Feapo FĚ3F1 Ti TZ TT3 T4 REFU. TT13F *E K3 VB L3:H5:£9.34 HHN5 HHN5 NBN Z04B Z04B 90UB.3B Hl «DB Hl 1 D Ü.2275 iuc 2.7232 íbc JD LUD ucŕĹ ]H 5ÚB.LID HHi 1GÜ2BÜ.BÜ Hi 13C LĽ5.ť5 HHi J2795S.QO Hi 511 50. D ufíľO 5B D 1H 50B.0B HHi JĚ2410.B0 Hi 5J1 50. D u sto 3B D 24.1 r CfiK 11 Hi ■í. 39 Hi B B.1B Hi B.OB Hi S4B Op Li den o.oo lea B.OB B.OB 3B.0B LOB.OB B.OB p [in WZ 4ZĽ3Z Hl ■6Tfi.S3 Hl □.□DL] t-r t-1-1-r t-1-1-r 10 o S(1H)/ppm S(15N)/ppm J_I_L * I ♦ •« 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 —i-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1— 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 C02 - 1H (ppm) 9.0 8.5 0.5- íl C02-15N : 113.721 (ppm) 8.0 J_i_i_i_i— 7.5 1111 7.0 6.5 111111111 0.5 1.0- O 1.0 E 1.5- CL CL 0 o 1.5 2.0- 2.5- o O 2.0 ■2.5 3.0- 3.0 t-1-1-1-1-1-1-1-r t-1-1-r 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 C03-1H (ppm) s s ref 'rre? \ r ) (1) S ry* ryt ref ref \ S (2) Referenční protony vzdálenost geminální v methylenu H-C-H 0,17 nm vicinálnf v aromatickém kruhu H-C=C-H 0,25 nm meta v aromatickém kruhu H-C=CH-C-H 0,42 nm -180 -120 -60 0 60 120 180 / stupně Zbytkové dipólové interakce oc (3cos^ö — 1} orientace Data ß-\ist a-sroubovice ô(Ca) l t ste?), 5(Ha) t Hai_i N i HH-1 l_|Ni_|N Ha i_i i Hz N Ha i_i i Hz N Hau N ■2 3 ■4 0,22 nm 0,40 nm daleko daleko daleko 0,35 nm 0,28 nm 0,42 nm 0,34 nm 0,42 nm 3J(HjslHf) >8Hz <5Hz a-helix 3io"helix antiparallel /3-sheet parallel /3-sheet • •• — • o----•-- OlO-OOOOOIOO- OO-----OO----i o o • - o — ooi-ii- »000 »•00 i---o - o - > O O O • • - -IOIIOOO-I • • • O - O I ---000-00000- • 00 — o o o •--• - o»»o-o»ooooo< ••IOOOIOOOOO- »o o -0-000- 000000- 000 — 0-00000000000-• •-o«— -• — 0-0 — • — •---»o- 000-0— -00-1---OOOOOOO-OOI 000000- oo o••o-o ooo ooo oo oo--0-0-00 OOOOIO-OOO-OOOOOOO- ■00000000000-0-)••—•— 10--HO-OOOI-O- IOOOOOOOOOOOOO-•OOOOOOOOOOIOO -OOOOO---0-- ----• • O O • • O - ■OOOOO-tOOt-IOOOOOH-Otl -0000000 — •< Jg[3 STISU8SU03 ISO g/0 ISO oH ISO oO ISO 00 (^ + ?'?)n;d -0-00- »000 »001 o < ■00000000-0 IOOOI OOOOOOOOOIOO I o - ■ 000000- »000- (OOOOO- ■ o o -----------------•------•------•-----00000-000000- oooii — 0000000000-m---oooooooooooti — 00001----- HHHHHH31ÜI33aiÜaAdAWSH10WIÜaSlVldH0aiNiaiAdÜVIHa0 133MMA0nSVI3Nn3ÍDddAdMMH33dl3HVI3AlVW3M133ÍDSAÍDMI0 06 08 OZ 09 39 0^ 0£ 0Z 01 =>■ (00) => • •<= (0000000000000000 00) • • (00000000000) • • • • (00000000000) • • • (000) ' ' (00000000000000 o) ' ' (0000000000000'00000000000000) ' ' (0000) ' .....(00000000000000000)(0000)(000) • • • • (000000000000 00) • • • • (00000000) '<=> ' ' ' (000000000) • • • • (00) (c + ?'?)n» (z + ?'?)n» i + } '?)n» i + ?'?)nn (NH0H)fe sen ví uoipipaid jg[3 uoipipaid aON uoipipaid f g uoi^ipaid SCnVX ain;oruis QC Gjnjonjjs ÁjBpuooes v. J J Q O / D \ C7(H7)3 04 C5—C4 ZH5"H6—C6 f N3H3 ... H5' \ / C5' .04' N1 — C2 H4' H3' •C4' / / 03' 03' /JVH2' iC2^ Hľ H2" 02 H5 \ H42 \ / C5—C4 -C6 q N3 N1 —C2 / \ N4—H41 06 t // g r N9—C4 ^ / Q / ■o \ Ň9-C4 / \ -í>C2 05' C5 H4' H5 D4 \ // C5—C4^ ZH5" H6-C6 (j N3H3 H5' \ / N1 —C2 I /04' / \ I ^ \ / 02 C4' H3'- / / 03' C3'i ■ C^ Hľ 02'H2' N7 •H21 H62 \ / N6 / \ i a ľ1 / N3^ \ H61 N2 H22 H2 DNA double helix B DNA double helix A 12345678 CTGATCAG 1 2 3 4 5 6 C T G A A T GACTAGTC G A C T T A 8 7 6 5 4 3 2 1 6' 5' 4' 3' 2' ľ G8 G3 T5 T2 G6' G3 T3' T2 T2' T6 H H