Metody studia neprůhledných objektů – Mikroreliéfová metoda Botanická mikrotechnika 2021 H. Cempírková Snímka 1 Cíle cvičení • vyjmenovat různé metody studia povrchu rostlinného těla • vysvětlit principy těchto metod • vytvořit preparát, na kterém je možné rozlišit jednotlivé struktury na povrchu pozorovaného objektu • posoudit vhodnost metody na různé rostlinné objekty a vybrat tu nejvhodnější • posoudit kvalitu získaného preparátu a ovládat možnosti, jak preparát nebo pozorování vylepšit Možnosti studia povrchu neprůhledných objektů • mikroskopie v dopadajícím „osvětlení“ – optická (např. mikroskop Lug Zeiss) – elektronová – SEM, kryo SEM (aquaSEM) • izolace povrchové vrstvy • zhotovení otisku mikroreliéfu • konfokální mikroskopie Lug Zeiss Jena Mikroskop pro práci v dopadajícím světle speciální konstrukce objektivu, který štěrbinou ve vnějším plášti osvětluje objekt shora časté využití při studiu epidermis a průduchů Tvar a rozmístění průduchů děloha Arabidopsis thaliana Heynh. Transmission electron micrograph Zhao and Sack (1999) Bar = 2 μm Cryo-scanning electron micrograph of maturing epidermis from a cotyledon. The larger, non-stomatal cells are pavement cells that are shaped like pieces of a jigsaw puzzle. Nadeau J.A. and Sack F.D. Bar = 30 μm The Arabidopsis Book, 2002 2 svěrací buňky Průduchová štěrbina Stomatální komplex Epidermální buňky Vedlejší buňky Buňka sousední (Neighbour cell) •epidermální buňka v kontaktu s průduchem nebo jeho prekurzorem • morfologicky stejná jako ostatní epidermální buňky • Buňka vedlejší (Subsidiary cell) •epidermální buňka v kontaktu s průduchem nebo jeho prekurzorem • morfologicky odlišná od ostatních epidermálních buněk clip_image002_thumb-89 Klasifikace stomat podle počtu a uspořádání obklopujících buněk • stomata izocytická – epidermální buňky se neliší od buněk epidermis – anomocytická – anomotetracytická (Chlorophytum, Iris) • stomata anizocytická – diferencované sousední buňky různě uspořádané: – paracytická (Magnolia, Cyperus) – brachyparatetracytická (Tradescantia) – polocytická (Dryopteris, Nephrolepis) – amfianizocytická (Begonia) Stomata in Begonia (monocots) – PLANT STOMATA ENCYCLOPEDIA Pletiva provětrávací Jaké jsou funkce mechanické vodivé základní tkáně? Základní tkáně, funkce, struktura a klasifikace Listy podle umístění průduchů • hypostomatické – nejčastější typ, dvouděložné • amfistomatické – (Iris, trávy), jednoděložné • epistomatické – (vzplývavé listy vodních rostlin, některé trávy – Festuca, Melica, Brachypodium) Stomata podle umístění na listech • stomata faneroporní – svěrací buňky a epidermis leží v jedné rovině = nejčastější případ • stomata emerzní – vyčnívají nad úroveň epidermis – hygrofyty, plovoucí listy vodních rostlin • stomata submerzní – ponořená stomata – xerofyty (Iris, Chlorophytum, Pinus, Nerium oleander) Huseyin Tombuloglu, Phd. GBE 304 Spring 2015 Chp4 Water Balance of Plants. - ppt download Research Finds How Plants Measure CO2 Uptake- Crop Biotech Update (August 28, 2019) | ISAAA.org Příprava preparátů: -Mikroreliéfová metoda: A. otisk v laku na nehty, B. otisk v laku na nehty nalepený na průhledné lepící pásce -Stržená epidermis -Pozorování v procházejícím světle a při šikmém osvětlení - Hodnocení: srovnání metod a způsobu přípravy (náročnost, možné problémy, snadnost pozorování, výhody/nevýhody metod a různých způsobů přípravy preparátů), posouzení přínosu pozorování při šikmém osvětlení