Sylabus botanické mikrotechniky Bi1301 0/2 (H. Cempírková) podzim 2021 1. 16.9.2021 Úvod do praktika: náplň cvičení, doporučená literatura, organizace, protokoly, bezpečnost práce. Vývoj stavby mikroskopů, Köhlerův princip, Abbeův kondenzor, pankratický kondenzor. Popis mikroskopu, centrování. Rozlišovací schopnost, numerická apertura. 2. 23.9.2021 01_Metody studia neprůhledných objektů: mikroskopie v dopadajícím světle, mikroreliéfová metoda pro studium stavby krycích pletiv (epidermální buňky, svěrací buňky průduchů, vedlejší buňky, klasifikace průduchů podle různých kritérií, trichomy). 3. 30.9.2021 02_Metody projasňování rostlinného materiálu a jejich aplikace v rostlinné embryologii (vývoj samičího gametofytu a embrya) nebo při studiu vývoje cévních svazků ve vývojové biologii, šikmé osvětlení. 4. 7.10.2021 03_Rychlé cytologické metody: Roztlaky a roztěry, typy barviv pro jaderné barvení roztlakových preparátů (acetokarmín, laktopropionový orcein), kořenová čepička, předpůsobení pro karyologická studia (mitotické jedy). 5. 14.10.2021 04_Samčí gametofyt: Typy pylových zrn a jejich klasifikace, barvení pylových zrn, struktura stěny pylového zrna. Metody určování životaschopnosti pylu, klíčení pylových zrn, kultury stojící nebo visící kapky. 6. 21.10.2021 05_Interferenční kontrasty: fázový kontrast, stavba fázového kondenzoru a fázových objektivů, pozorování živých (fázových) objektů, Nomarského diferenciální interferenční kontrast (DIC). 7. 28.10.2021 Státní svátek – cvičení se nekoná 8. 4.11.2021 06_Histologické techniky: fixace, fixační látky a fixační směsi, jejich vlastnosti a použití, odvodňování, zalévání do parafínu a do pryskyřice. V úvodu hodiny první zápočtový test. 9. 11.11.2021 06_Histologické techniky: typy mikrotomů, krájení na mikrotomu a ultramikrotomu, žehlení a lepení řezů, odparafínování řezů. 10. 18.11.2021 06_Histologické techniky: Barvení řezů: typy metod (histologické a histochemické barvení) a barviva užívaná v botanické mikroskopické technice - klasifikace a příklady použití. 11. 25.11.2021 07_Dokumentace mikroskopických objektů: Kreslení, kreslící přístroje, mikrofotografie analogová a digitální, mikrokinematografie, videozáznam. Měření a počítání mikroskopických objektů: mikrometrický okulár, mikrometr objektivní měřítko, programy analýzy obrazu. 12. 2.12.2021 Téma bude upřesněno. 13. 9.12.2021 08_Fluorescenční mikroskopie: (Olympus BX51), autofluorescence, primární a sekundární fluorescence (použití např. pro sledování změn vývoje pylu, uspořádání cytoskeletu v průběhu buněčného cyklu apod.), fluorochromy, imunohistochemie, GMO – GFP (použití pro sledování exprese genů). 14. 16.12.2021 Závěrečný test, kontrola protokolů, zápočet. Doporučená literatura Bózner A. et al.: Cytológia. - Osveta, 1986. Braune W., Leman A., Taubert H.: Pflanzenanatomisches Praktikum I.,II., Gustav Fischer, Jena, 1983, 1982. Erdelská O.: Embryológia krytosemenných rastlín. - Veda, Bratislava, 1981. Jásik J.: Praktikum z cytológie rastlín. - Skriptum UKom., Bratislava,1995. Kiernan J.: Histological and Histochemical Methods. Theory and Practise, Pergamon Press, 1979. Knoz J., Opravilová V.: Základy mikroskopické techniky. - Skriptum MU, Brno, 1992. Lojda Z. et al.: Enzyme histochemistry. A laboratory manual. - Springer Berlin etc.,1979. Němec B. et al.: Botanická mikrotechnika. - ČSAV, Praha, 1962. Pazourek J.: Pracujeme s mikroskopem. - SNTL Praha, 1961. Pazourková Z.: Botanická mikrotechnika. - Skriptum UK, Praha, 1986. Votrubová O.: Anatomie rostlin -Skriptum UK Praha, 1996. Michalová K. et al.: Vybrané metody studia chromozómů. - Skriptum UK Praha, 1989. Wedzony M.: Mikroskopia fluorescencyjna dla botanikow. – PAN, Krakov, 1996. Pluta M.: Mikroskopia optyczna. – PWN, Varšava, 1982.