E1241 Experimentální a aplikovaná toxikologie a ekotoxikologie Úvodní blok (25.10.) Představení biotestů, výpočty, vyhodnocení dat – Excel + Graphpad – Zuzana Toušová, Marek Šudoma, Jiří Novák Laboratorní blok (7.11. – 11.11) + plášť, přezůvky, manuál, zápisník, mobil/kalkulačka Řasy – Zuzana Toušová Rybí embrya – Marie Smutná Chvostoskoci – Marek Šudoma Databázovy blok (středa 9.11. - 9-11?) Ekotoxikologické databáze, model ECOSAR – Zuzana Toušová Závěrečný blok (středa 16.11/23.11 ??) Protokoly, zpětná vazba - Zuzana Toušová, Marie Smutná, Marek Šudoma, Jiří Novák E1241 Experimentální a aplikovaná toxikologie a ekotoxikologie - cvičení Test inhibice růstu zelené řasy Raphidocelis subcapitata Obsah obrázku interiér, láhev, plavidlo, zelená Popis byl vytvořen automaticky Obsah obrázku interiér, trouba, vykachlíkované Popis byl vytvořen automaticky •Ředění řasové suspenze •Ředění testované látky – rozpustnost ve vodě, rozpouštědlo? •Ředění pozitivní kontroly – dichroman draselný (ve vodě) Triclosan XX mg/L v MeOH Jamka 250uL 125 uL řasová suspenze v médiu 125 uL médium + testovaná látka/rozpouštědlo 125 uL médium + testovaná látka/rozpouštědlo – koncentrace se v jamce 2x sníží (rozředí) Příklad triclosan: cílová koncentrace v jamce 500 ug/L – 166 ug/L – 55.5 ug/L – 18.5 ug/L – 6.2 ug/L (3x ředicí řada) Triclosan rozpuštěný v MeOH: c= XX mg/L Maximální obsah rozpouštědla v testovém systému – 0.5% 125 uL řasová suspenze v médiu 125 uL médium + testovaná látka v rozpouštědle 1% 1485 1000 1000 1000 1000 Objemy v uL 15 (1%) 500 500 500 500 1000 ug/L 332 ug/L 111 ug/L 37 ug/L 12.3 ug/L Příklad triclosan: cílová koncentrace v jamce 500 ug/L – 166 ug/L – 55.5 ug/L – 18.5 ug/L – 6.2 ug/L (3x ředicí řada) Triclosan rozpuštěný v MeOH: c= XX mg/L Maximální obsah rozpouštědla v testovém systému – 0.5% 125 uL řasová suspenze v médiu 125 uL médium + testovaná látka v rozpouštědle 1% Triclosan 100 mg/L v MeOH 1485 1000 1000 1000 1000 Objemy v uL 500 500 500 500 15 (1%) 1000 ug/L 332 ug/L 111 ug/L 37 ug/L 12.3 ug/L Přídavek rozpouštědla 1% do rozřeďovacího roztoku – koncentrace C2-C5 4000 + 40uL MeOH Test stanovení akutní toxicity pro rybí embryo Maximální obsah rozpouštědla v testovém systému – 0.1% Triclosan XX g/L v MeOH 60 60 60 60 60 Objemy v mL 4 mg/L 2 mg/L 1 mg/L 0.5 mg/L 0.25 mg/L 0.06 mL = 60 uL 0.1% Příklad triclosan: cílová koncentrace v misce 4 mg/L – 2 mg/L – 1 mg/L – 0.5 mg/L – 0.25 mg/L (2x ředicí řada) Test stanovení akutní toxicity pro rybí embryo Maximální obsah rozpouštědla v testovém systému – 0.1% 0.06 mL = 60 uL 0.1% Triclosan (TCS) 4 g/L v MeOH 60 60 60 60 60 Objemy v mL 4 mg/L 2 mg/L 1 mg/L 0.5 mg/L 0.25 mg/L Úplně přesné by bylo sem dát 59.94 mL, ale to 0.1% objemu můžeme klidně zanedbat 30uL TCS 30uL MeOH 15uL TCS 45uL MeOH 7.5uL TCS 52.5 uL MeOH 3.75uL TCS 56.25 uL MeOH Příklad triclosan: cílová koncentrace v misce 4 mg/L – 2 mg/L – 1 mg/L – 0.5 mg/L – 0.25 mg/L (2x ředicí řada)