F1190 Úvod do biofyziky Masarykova Univerzita Podzimní semestr 2022 Vyučující: Prof. Jiří Kozelka, Biofyzikální Laboratoř, Ústav fyziky kondenzovaných látek, PřF MU, Kotlářská 2, kozelka.jiri@gmail.com OPVK_hor_zakladni_logolink_RGB_cz Řešení k přednášce z 5.10.2023_radioaktivita Počet atomů, který se rozpadne za infinitesimální časovou jednotku, je přímo úměrný stávajícímu počtu atomů N: l je rychlostní konstanta pro tuto reakci, tzv. rozpadová konstanta. Řešení této diferenciální rovnice je exponenciální funkce: Poločas rozpadu t1/2 je čas, za který se rozpadne 50% materiálu. Je to parametr nepřimo úměrný rychlostní konstantě l. Cvičení 1: odvoďte rovnici pro t1/2 N(t=t1/2) = 1/2 = exp(-lt1/2) -ln2 = -lt1/2 t1/2= ln2/l Poločasu rozpadu 5730 ± 40 y tedy odpovídá rychlostní konstanta l = ? Cvičení 2: vypočítejte l l (5690 y) = 1.218 10-4 y l (5770 y) = 1.201 10-4 y l = (1.21 ± 0.01) 10-4 y-1 Cvičení 3 Analýzou kosti zvířete bylo zjištěno, že obsahuje 70% z původního množství izotopu 14C. Určete stáří zvířete, když poločas rozpadu izotopu je 5730 ± 40 y. (Požadováno je řešení, výsledek a standardní odchylka.) 0.7 = exp(-lt) ln(0.7) = -lt t = [0.3567/ (1.21 ± 0.01)] .104 y-1 t(lower) = (0.3567/ 1.22 ).104 y = 0.2924 104 y t(upper) = (0.3567/ 1.20 ).104 y = 0.2972 104 y t = 2948 ± 24 y Pokud bychom počítali s přesnými hranicemi pro l, danými směrodatnou odchylkou pro t1/2, tedy 1.201 .10-4 y-1 a 1.218 .10-4 y-1 (viz Cvičení 2) , obdržíme t = 2948 ± 21 y Oba výsledky lze považovat za správné. Příklad: Protein LEF-1 je tzv. transkripční regulátor, který reguluje produkci (expresi) antigenových receptorů na povrchu lymfocytů T. Jeho funkcí je vázat DNA na specifické sekvenci 5'-CCTTTGAA a vytvořit v DNA ohyb, který je předpokladem k transkripci. Je zajímavé zjistit, s jak velkou afinitou se váže doména HMG (zelená stuha) proteinu LEF-1 na DNA, která obsahuje sekvenci 5'-CCTTTGAA (modrá/zlatá). Při vzniku komplexu mezi DNA a LEF-1 hraje důležitou úlohu aminokyselina methionin (hnědá), která se vklíní („interkaluje“) mezi dvě adeninové báze (tlusté modré čáry). P* P* P (protein) D* (DNA) PD * (komplex) Značenou DNA necháme reagovat s proteinem, přičemž se vytvoří rovnováha: + O koncentracích v rovnováze platí: Ka: asociační konstanta Kd: disociační konstanta Kd: disociační konstanta P + D PD [P] = [P]0-[PD] [D] = [D]0-[PD] Cvičení 4: Dokažte, že pokud platí [P]0 >> [D]0, je Kd rovna koncentraci [P]0, při které je [PD]/[D]0 = 0.5 [PD] nemůže být větší než [D]0, tedy pro [P]0 >> [D]0 platí, že, [P]0 >> [PD] a [P] » [P]0 Þ Þ takže když Koncentrace před reakcí (v okamžiku smíchání): [P]0 [D]0 0 Koncentrace po ustálení rovnováhy: [P] [D] [PD]