Sylabus botanické mikrotechniky Bi1301 0/2 (H. Cempírková) podzim 2024 1. 18.9.2024 Zrušená výuka 2. 25.9.2024 Úvod do praktika: náplň cvičení, doporučená literatura, organizace, protokoly, bezpečnost práce. Vývoj stavby mikroskopů, Köhlerův princip, Abbeův kondenzor, pankratický kondenzor. Popis mikroskopu, centrování. Rozlišovací schopnost, numerická apertura. 3. 2.10.2024 01_Metody studia neprůhledných objektů: mikroskopie v dopadajícím světle, mikroreliéfová metoda pro studium stavby krycích pletiv (epidermální buňky, svěrací buňky průduchů, vedlejší buňky, klasifikace průduchů podle různých kritérií, trichomy). 4. 9.10.2024. 02_Metody projasňování rostlinného materiálu a jejich aplikace v rostlinné embryologii (vývoj samičího gametofytu a embrya) nebo při studiu vývoje cévních svazků ve vývojové biologii, šikmé osvětlení. 5. 16.10.2024 03_Rychlé cytologické metody: Roztlaky a roztěry, typy barviv pro jaderné barvení roztlakových preparátů (acetokarmín, laktopropionový orcein), kořenová čepička, předpůsobení pro karyologická studia (mitotické jedy). 6. 23.10.2024 04_Samčí gametofyt: Typy pylových zrn a jejich klasifikace, barvení pylových zrn, struktura stěny pylového zrna. Metody určování životaschopnosti pylu, klíčení pylových zrn, kultury stojící nebo visící kapky. 7. 30.10.2024 05_Interferenční kontrasty: fázový kontrast, stavba fázového kondenzoru a fázových objektivů, pozorování živých (fázových) objektů, Nomarského diferenciální interferenční kontrast (DIC). Polarizační mikroskopie. Srovnání různých technik pozorování preparátů. 8. 6.11.2024 06_Histologické techniky: fixace, fixační látky a fixační směsi, jejich vlastnosti a použití, odvodňování, zalévání do parafínu a do pryskyřice. V úvodu hodiny první zápočtový test.. 9. 13.11.2024 06_Histologické techniky: typy mikrotomů, krájení na mikrotomu a ultramikrotomu, žehlení a lepení řezů, odparafínování řezů. Kryořezy 10. 20.11.2024 06a_Histologické techniky: Barvení řezů: typy metod (histologické a histochemické barvení) a barviva užívaná v botanické mikroskopické technice - klasifikace a příklady použití. 11. 27.11.2024 06b Barvení řezů – praktické vyzkoušení různých barviv na nativních preparátech. 12. 4.12.2024 07_Dokumentace mikroskopických objektů: Kreslení, kreslící přístroje, mikrofotografie analogová a digitální, mikrokinematografie, videozáznam. Měření a počítání mikroskopických objektů: mikrometrický okulár, objektivní měřítko, programy analýzy obrazu. 13. 11.12.2024 08_Fluorescenční mikroskopie: (Olympus BX51), autofluorescence, primární a sekundární fluorescence, fluorochromy, imunohistochemie, GMO – GFP (použití pro sledování exprese genů). 14. 18.12.2023 Závěrečný test, kontrola protokolů, zápočet. Doporučená literatura Kiernan J.: Histological and Histochemical Methods. Theory and Practise, Pergamon Press, 1979. Knoz J., Opravilová V.: Základy mikroskopické techniky. - Skriptum MU, Brno, 1992. Němec B. et al.: Botanická mikrotechnika. - ČSAV, Praha, 1962. Pazourek J.: Pracujeme s mikroskopem. - SNTL Praha, 1961. Pazourková Z.: Botanická mikrotechnika. - Skriptum UK, Praha, 1986.