Laboratorní cvičení z biologie
Jméno:............................................. Třída:............... Datum:
Pozorování fází mitózy
Mitóza je dělení buněčného jádra, při němž zůstává zachován počet chromozomů. Tento typ dělení je charakteristický pro jádra tělních (somatických) buněk. Mitotické dělení jádra probíhá ve čtyřech fázích: profáze, metafáze, anafáze a telofáze. Pro studium fází mitózy jsou vhodná rostlinná pletiva, v nichž probíhá intenzivní buněčné dělení, např. meristémy kořenových špiček.
Materiál a pomůcky: naklíčená semena hrachu (cibule), fixační roztok (směs 96% alkoholu a ledové kyseliny octové v poměru 3:1), macerační roztok (směs 96% alkoholu a koncentrované kyseliny chlorovodíkové v poměru 1:1), barvivo (laktopropionorcein), destilovaná voda, pinzeta, preparační jehla, podložní a krycí skla, Petriho misky, filtrační papír.
Postup:
(0. Přibližně 5 dní před prováděním pokusu je nutné dát na vlhký filtrační papír do Petriho misky naklíčit semena hrachu (cibule).)
1. Kořenové špičky dlouhé asi 1 cm odřízneme ostrou žiletkou a pinzetou přeneseme do fixačního roztoku. Minimální doba působení fixačního činidla jsou 2 hodiny, optimální je nechat materiál v ledničce do druhého dne.
2. Fixovaný materiál pinzetou přeneseme do maceračního roztoku. Doba macerace je 1-3 minuty, macerační směs musí být v přikryté nádobě.
3. Po maceraci provádíme vypírání v destilované vodě. Doba vypíraní je shodná s délkou macerace.
4. Takto vypraný objekt připravíme na barvení: Umístíme ho do kapky vody na podložní sklíčko. Žiletkou odřízneme co nejmenší kousek kořenové špičky a odsajeme přebytek vody.
5. Kápneme kapku barviva (laktopropionorceinu), přiložíme krycí sklíčko a objekt opatrně rozmáčkneme špičkou preparační jehly. Žiletkou lehce nadzvedneme rožek krycího sklíčka, aby se barvička přelila přes objekt. Protější rožek přidržujeme, aby se krycí sklíčko neposunulo.
Na takto zhotoveném preparátu pozorujeme pod mikroskopem jádra buněk v různých fázích mitózy. Fáze mitózy zakreslíme.
Literatura
Jelínek J. a Zicháček V.: Biologie pro střední školy gymnaziálního typu. Praktická část. - Fin Publishing, Olomouc 1996.
Pazourková Z. a Pazourek J. : Rychlé metody botanické mikrotechniky. - Československá akademie zemědělských věd, Praha 1960.